We experienced mortality of dark-banded rockfish (Sebastes inermis) maintained in the rearing facility located in Gangneung, after transportation. Moribund fish showed various symptoms such as exophthalmia, skin ulcers, tail rots, gill rots, discoloration of liver with petechiae, yellowish fluid in intestines and ascites. Two different colonies were dominantly appeared after spreading the lesions on the agar plates and incubation. One isolate (SI_1) showed swarming movement on TSA, and formed yellow colonies on TCBS agar. The other (SI_2) showed no swarming motility and green colonies on TCBS agar. Both of them were Gram-negative. All of these results are similar with those of Genus Vibrio. They were identified as V. harveyi and V. gigantis by PCR with subsequent sequencing of 3 different genes (16 rDNA, recA, rpoA). V. harveyi is well-known as a serious pathogen of marine fish and invertebrates, while V. gigantis is known to be often isolated from marine invertebrates, but the pathogenicity is still unknown. We suspect V. harveyi as the cause of the mortality of dark-banded rockfish, but challenge experiments with these 2 Vibrio species are thought to be necessary to make a clear conclusion.
Hegde, Rajat;Hegde, Smita;Kulkarni, Suyamindra S.;Pandurangi, Aditya;Gai, Pramod B.;Das, Kusal K.
Genomics & Informatics
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제19권4호
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pp.44.1-44.9
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2021
Autism is a complex neurodevelopmental disorder, the prevalence of which has increased drastically in India in recent years. Neuroligin is a type I transmembrane protein that plays a crucial role in synaptogenesis. Alterations in synaptic genes are most commonly implicated in autism and other cognitive disorders. The present study investigated the neuroligin 3 gene in the Indian autistic population by sequencing and in silico pathogenicity prediction of molecular changes. In total, 108 clinically described individuals with autism were included from the North Karnataka region of India, along with 150 age-, sex-, and ethnicity-matched healthy controls. Genomic DNA was extracted from peripheral blood, and exonic regions were sequenced. The functional and structural effects of variants of the neuroligin 3 protein were predicted. One coding sequence variant (a missense variant) and four non-coding variants (two 5'-untranslated region [UTR] variants and two 3'-UTR variants) were recorded. The novel missense variant was found in 25% of the autistic population. The C/C genotype of c.551T>C was significantly more common in autistic children than in controls (p = 0.001), and a significantly increased risk of autism (24.7-fold) was associated with this genotype (p = 0.001). The missense variant showed pathogenic effects and high evolutionary conservation over the functions of the neuroligin 3 protein. In the present study, we reported a novel missense variant, V184A, which causes abnormal neuroligin 3 and was found with high frequency in the Indian autistic population. Therefore, neuroligin is a candidate gene for future molecular investigations and functional analysis in the Indian autistic population.
Purpose: To explore differences in the subgingival microbiome according to the presence of periodontitis and/or type 2 diabetes mellitus (T2D), a metagenomic sequencing analysis of the subgingival microbiome was performed. Methods: Twelve participants were divided into 4 groups based on their health conditions (periodontitis, T2D, T2D complicated with periodontitis, and generally healthy). Subgingival plaque was collected for metagenomic sequencing, and gingival crevicular fluids were collected to analyze the concentrations of short-chain fatty acids. Results: The shifts in the subgingival flora from the healthy to periodontitis states were less prominent in T2D subjects than in subjects without T2D. The pentose and glucuronate interconversion, fructose and mannose metabolism, and galactose metabolism pathways were enriched in the periodontitis state, while the phosphotransferase system, lipopolysaccharide (LPS) and peptidoglycan biosynthesis, bacterial secretion system, sulfur metabolism, and glycolysis pathways were enriched in the T2D state. Multiple genes whose expression was upregulated from the red and orange complex bacterial genomes were associated with bacterial biofilm formation and pathogenicity. The concentrations of propionic acid and butyric acid were significantly higher in subjects with periodontitis, with or without T2D, than in healthy subjects. Conclusions: T2D patients are more susceptible to the presence of periodontal pathogens and have a higher risk of developing periodontitis. The pentose and glucuronate interconversion, fructose and mannose metabolism, galactose metabolism, and glycolysis pathways may represent the potential microbial functional association between periodontitis and T2D, and butyric acid may play an important role in the interaction between these 2 diseases. The enrichment of the LPS and peptidoglycan biosynthesis, bacterial secretion system, and sulfur metabolism pathways may cause T2D patients to be more susceptible to periodontitis.
In the present investigation, bacterial isolates from infected apple trees causing apple canker during winter were studied in the northern Gyeongbuk Province, Korea. The pathogen was identified as Pseudomonas syringae pv. syringae (Pss) through various physiological and biochemical characterization assays such as BIOLOG, gas chromatography of fatty acid methyl esters, and 16S rRNA. Bioassays for the production of phytotoxins were positive for syringopeptin and syringomycin against Bacillus megaterium and Geotrichum candidum, respectively. The polymerase chain reaction (PCR) method enabled the detection of toxin-producing genes, syrB1, and sypB in Pss. The differentiation of strains was performed using LOPAT and GATTa tests. Pss further exhibited ice nucleation activity (INA) at a temperature of -0.7℃, indicating an INA+ bacterium. The ice-nucleating temperature was -4.7℃ for a non-treated control (sterilized distilled water), whereas it was -9.6℃ for an INA- bacterium Escherichia coli TOP10. These methods detected pathogenic strains from apple orchards. Pss might exist in an apple tree during ice injury, and it secretes a toxin that makes leaves yellow and cause canker symptoms. Until now, Korea has not developed antibiotics targeting Pss. Therefore, it is necessary to develop effective disease control to combat Pss in apple orchards. Pathogenicity test on apple leaves and stems showed canker symptoms. The pathogenic bacterium was re-isolated from symptomatic plant tissue and confirmed as original isolates by 16S rRNA. Repetitive element sequence-based PCR and enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR primers revealed different genetic profiles within P. syringae pathovars. High antibiotic susceptibility results showed the misreading of mRNA caused by streptomycin and oxytetracycline.
Mi-Hyun Lee;Sung-Jun Hong;Dong Suk Park;Hyeonheui Ham;Hyun Gi Kong
The Plant Pathology Journal
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제39권4호
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pp.409-416
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2023
Bacterial leaf blight of carrots caused by Xanthomonas hortorum pv. carotae (Xhc) is an important worldwide seed-borne disease. In 2012 and 2013, symptoms similar to bacterial leaf blight were found in carrot farms in Jeju Island, Korea. The phenotypic characteristics of the Korean isolation strains were similar to the type strain of Xhc. Pathogenicity showed symptoms on the 14th day after inoculation on carrot plants. Identification by genetic method was multi-position sequencing of the isolated strain JJ2001 was performed using four genes (danK, gyrB, fyuA, and rpoD). The isolated strain was confirmed to be most similar to Xhc M081. Furthermore, in order to analyze the genetic characteristics of the isolated strain, whole genome analysis was performed through the next-generation sequencing method. The draft genome size of JJ2001 is 5,443,372 bp, which contains 63.57% of G + C and has 4,547 open reading frames. Specifically, the classification of pathovar can be confirmed to be similar to that of the host lineage. Plant pathogenic factors and determinants of the majority of the secretion system are conserved in strain JJ2001. This genetic information enables detailed comparative analysis in the pathovar stage of pathogenic bacteria. Furthermore, these findings provide basic data for the distribution and diagnosis of Xanthomonas hortorum pv. carotae, a major plant pathogen that infects carrots in Korea.
Objective: Familial intracranial aneurysms (FIAs) are found in approximately 6%-20% of patients with intracranial aneurysms (IAs), suggesting that genetic predisposition likely plays a role in its pathogenesis. The aim of this study was to identify possible IA-associated variants using whole exome sequencing (WES) in selected Korean families with FIA. Materials and Methods: Among the 26 families in our institutional database with two or more IA-affected first-degree relatives, three families that were genetically enriched (multiple, early onset, or common site involvement within the families) for IA were selected for WES. Filtering strategies, including a family-based approach and knowledge-based prioritization, were applied to derive possible IA-associated variants from the families. A chromosomal microarray was performed to detect relatively large chromosomal abnormalities. Results: Thirteen individuals from the three families were sequenced, of whom seven had IAs. We noted three rare, potentially deleterious variants (PLOD3 c.1315G>A, NTM c.968C>T, and CHST14 c.58C>T), which are the most promising candidates among the 11 potential IA-associated variants considering gene-phenotype relationships, gene function, co-segregation, and variant pathogenicity. Microarray analysis did not reveal any significant copy number variants in the families. Conclusion: Using WES, we found that rare, potentially deleterious variants in PLOD3, NTM, and CHST14 genes are likely responsible for the subsets of FIAs in a cohort of Korean families.
2023년 8월 청주 땅콩 재배포장에서 기보고되어 있는 점무늬 병징과는 다른 양상의 잎 반점을 발견하였다. 갈색 반점은 주로 잎 가장자리에 형성되었으며, 반점 부위에서 원인균을 분리하였다. 순수 분리한 병원균을 땅콩 유묘에 인공접종하여 병원성 검정을 수행하였다. 그 결과, 접종 5-7일 뒤에 유사한 병징을 확인할 수 있었고 병징 부위에서 동일한 균을 재분리하였다. 분리한 균주의ACT-CHS-1-GAPDH-ITS-TUB2 영역을 이용하여 동정 및 유연관계 분석을 수행한 결과 C. sojae임을 확인하였다. 따라서 본 연구는 국내 최초로C. sojae에 의해 발생한 땅콩 탄저병을 보고하고자 한다.
프루텔고치벌 브라코바이러스(CpBV)는 배추좀나방(Plutella xylostella)의 어린 유충에 기생하는 프루텔고치벌(Cotesia plutellae) 공생 폴리드나바이러스이다. 일부 CpBV 유전자들은 피기생체 유충의 면역반응을 낮추는 데 중요한 역할을 담당한다. 본 연구는 기주의 면역작용을 억제하는 CpBV 유전자를 이용하여 살충력이 높은 재조합 벡큘로바이러스를 개발하는 데 응용할 목적으로 수행되었다. 기보고 자료에 기초하여 CpBV-ELP1를 발현하는 재조합 벡큘로바이러스(AcMNPV-ELP1)를 선발하여 파밤나방(Spodoptera exigua) 충체에서 증식시켰다. 충체에서 증식된 재조합바이러스들은 파밤나방 유충 한 마리 당 $5{\times}10^{10}$ polyhedral inclusion body (PIB)를 생산하였다. 배양된 AcMNPV-ELP1은 파밤나방 유충에 높은 병원성을 보였다. 특히 파밤나방 1령과 노숙령기에 높은 살충력을 나타냈다. 파밤나방 유충이 가해하는 배추에 재조합 벡큘로바이러스($5{\times}10^6PIB/mL$)를 살포한 결과 처리 7일 후에 화학 농약인 테부페노자이드 보다 높은 방제효과(약 88%)를 나타냈다. 이 결과는 충체에서 대량배양된 AcMNPV-ELP1이 높은 병원성을 나타내 새로운 미생물방제제로 응용될 수 있음을 제시한다.
Fungal pathogens have huge impact on health and economic wellbeing of human by causing life-threatening mycoses in immune-compromised patients or by destroying crop plants. A key determinant of fungal pathogenesis is their ability to undergo developmental change in response to host or environmental factors. Genetic pathways that regulate such morphological transitions and adaptation are therefore extensively studied during the last few decades. Given that epigenetic as well as genetic components play pivotal roles in development of plants and mammals, contribution of microbial epigenetic counterparts to this morphogenetic process is intriguing yet nearly unappreciated question to date. To bridge this gap in our knowledge, we set out to investigate histone modifications among epigenetic mechanisms that possibly regulate fungal adaptation and processes involved in pathogenesis of a model plant pathogenic fungus, Magnaporthe oryzae. M. oryzae is a causal agent of rice blast disease, which destroys 10 to 30% of the rice crop annually. Since the rice is the staple food for more than half of human population, the disease is a major threat to global food security. In addition to the socioeconomic impact of the disease it causes, the fungus is genetically tractable and can undergo well-defined morphological transitions including asexual spore production and appressorium (a specialized infection structure) formation in vitro, making it a model to study fungal development and pathogenicity. For functional and comparative analysis of histone modifications, a web-based database (dbHiMo) was constructed to archive and analyze histone modifying enzymes from eukaryotic species whose genome sequences are available. Histone modifying enzymes were identified applying a search pipeline built upon profile hidden Markov model (HMM) to proteomes. The database incorporates 22,169 histone-modifying enzymes identified from 342 species including 214 fungal, 33 plants, and 77 metazoan species. The dbHiMo provides users with web-based personalized data browsing and analysis tools, supporting comparative and evolutionary genomics. Based on the database entries, functional analysis of genes encoding histone acetyltransferases and histone demethylases is under way. Here I provide examples of such analyses that show how histone acetylation and methylation is implicated in regulating important aspects of fungal pathogenesis. Current analysis of histone modifying enzymes will be followed by ChIP-Seq and RNA-seq experiments to pinpoint the genes that are controlled by particular histone modifications. We anticipate that our work will provide not only the significant advances in our understanding of epigenetic mechanisms operating in microbial eukaryotes but also basis to expand our perspective on regulation of development in fungal pathogens.
Saprolegniasis is one of the most devastating oomycete diseases in freshwater fish which is caused by species in the genus Saprolegnia including Saprolegnia parasitica. In this study, we isolated the strain of S. parasitica from diseased rainbow trout in Korea. Morphological and molecular based identification confirmed that isolated oomycete belongs to the member of S. parasitica, supported by its typical features including cotton-like mycelium, zoospores and phylogenetic analysis with internal transcribed spacer region. Pathogenicity of isolated S. parasitica was developed in embryo, juvenile, and adult zebrafish as a disease model. Host-pathogen interaction in adult zebrafish was investigated at transcriptional level. Upon infection with S. parasitica, pathogen/antigen recognition and signaling (TLR2, TLR4b, TLR5b, NOD1, and major histocompatibility complex class I), pro/anti-inflammatory cytokines (interleukin $[IL]-1{\beta}$, tumor necrosis factor ${\alpha}$, IL-6, IL-8, interferon ${\gamma}$, IL-12, and IL-10), matrix metalloproteinase (MMP9 and MMP13), cell surface molecules ($CD8^+$ and $CD4^+$) and antioxidant enzymes (superoxide dismutase, catalase) related genes were differentially modulated at 3- and 12-hr post infection. As an anti-Saprolegnia agent, plant based lawsone was applied to investigate on the susceptibility of S. parasitica showing the minimum inhibitory concentration and percentage inhibition of radial growth as $200{\mu}g/mL$ and 31.8%, respectively. Moreover, natural lawsone changed the membrane permeability of S. parasitica mycelium and caused irreversible damage and disintegration to the cellular membranes of S. parasitica. Transcriptional responses of the genes of S. parasitica mycelium exposed to lawsone were altered, indicating that lawsone could be a potential anti-S. parasitica agent for controlling S. parasitica infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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