Mucinase complex from V. parahaemolyticus ATCC 17802 was purified 6-fold with 0.4% yield by two sequential steps of Q-Sepharose and Superdex 200HR column chromatographies. Partially purified mucinase complex showed at least 8 times higher mucin-degrading activity than the culture filtrates. The mucinase complex also showed gelatin-and-casein-hydrolyzing activities, which demonstrates that the protein is a complex compound containing several proteases. The optimum pH and temperature of partially purified mucinase complex for mucin degradation was 8.0 and $35^{\circ}C$, respectively. The partially purified mucinase complex showed high cytotoxic activity on vero cells when examined by MTT assay and microscopic observations. Cytotoxicity was significantly increased in proportion to the concentration of the mucinase complex. Mouse experiments revealed that the jejunum, ileum. and large intestinal tissues were damaged by the injection of the mucinase complex. In particular, the reduction of the goblet cells in the large intestine was remarkable. Collectively, these data suggest that the mucinase complex partially purified from V. parahaemolyticus ATCC 17802 contributes to the adhesion and invasion of V. parahaemolyticus into the host intestinal tract.
The maintenance of physiological activity during dilution is very critical for the accurate enumeration of Vibrio spp. in marine samples. We investigated the effect of various diluents on the recovery of Vibrio parahaemolyticus using the direct plate counting and most probable number (MPN) methods. The effects of NaCl (0.85 and 3%) and pH (from 6.6 to 7.4) in diluents based on distilled water or phosphate buffered saline (PBS) were evaluated with three V. parahaemolyticus strains. PBS-3% NaCl (pH 6.6), as opposed to PBS, was the most effective diluent at maintaining viable cell numbers up to 2 log CFU/g during dilution for direct plate counting using on thiosulfate citrate bile salts sucrose (TCBS) selective agar, as well as minimizing the difference in cell numbers between TCBS and non-selective nutrient agar. It also increased counts of V parahaemolyticus inoculated into oysters relative to PBS (p<0.01), suggesting that PBS-3% NaCl (PH 6.6) can reduce the problem of underestimating V. parhaemolyticus counts using PBS alone.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.22
no.4
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pp.413-425
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1987
In the present experiments, isolated Vibrio species from marine and clinical specimens from July, 1985 to October, 1986, had the results as follows: 1. The 55 strains of Vibrio were isolated and identified; Vibrio parahaemolyticus was 35 strains, Vibrio vulnificus was 10 strains, Vibrio alginolyticus was 10 strains. 2. In the K-serotyping of Vibrio parahaemolyticus, fourteen serotypes identified but three were not strains typable by the availble K-antisera. 3. In the Kanagawa phenomenon experiment of Vibrio parahaemolyticus, it proved positive reaction, 14 of 15 strains(93%) isolated from the patient and 13 of 20 strains(65%) isolated from the nature. 4. In twelve antibiotic resistance experiments, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus showed 100% resistance on ampicilline, but Vibrio vulnificus showed 100% sensitivity. But all of them proved 100% sensitivity on chloramphenicol, tetracycline, nalidixic acid. 5. In the antibiotic resistance patterns, Vibrio parahaemolyticus proved that 15 strains(43%) resisted on 4 antibiotics and 5 strains(14%) resisted on 7 antibiotisc and. Vibrio vulnificus proved that 1 strain(10%) resisted on 2 antibiotics and 6 strains(60%) without resistance, Vibrio alginolyticus proved that 7 strains(70%) resisted on 3 antibiotics and 2 strains(20%) resisted on 8 antibiotics.
A tetracycline resistant Vibrio parahaemolyticus, capable of growing on TCBS medium containing tetracycline, was isolated from cultivated fishes. A gene responsible for the tetracycline resistance was cloned from chromosomal DNA of the V. parahaemolyticus strain using Escherichia coli KAM3, which lacks major multi-drug efflux pumps (${\Delta}acrB$) as host cells. The nucleotide sequence and homology analysis revealed an open reading frame (ORF) for tetracycline resistance protein (TetB). In order to characterize the antibiotic resistance of TetB originated from the V. parahaemolyticus strain, the gene was sub cloned into plasmid pSTV28. The resulting plasmid was designated as pSTVTetB and transformated into E. coli KAM3. E. coli KAM3 cells harboring the recombinant plasmid pSTVTetB are able to grow on plates containing tetracycline and oxytetracycline but not doxycycline, indicating that the tetB gene confers the tetracycline- and oxytetracycline-resistance to the host cell.
The objective of this study was to investigate the possibility of using low-amperage electrical treatment (LAET) as a selective bacteriocide. Mixtures containing Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Vibrio parahaemolyticus were treated with different electric current intensities and for different times. The results showed that at 263 mA, treating bacteria for 100 ms eliminated all V. parahaemolyticus colonies. Although LAET reduced the populations of the three microorganisms, V. parahaemolyticus was more injured by LAET than S. aureus and E. coli when treated at the same processing conditions.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.1
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pp.94-99
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1999
This study was carried out to determine the inhibitory effect of juice of garlic, onion, ginger and red pepper against Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Vibrio parahaemolyticus and Enterobacter cloacae which are food born disease organisms. It was found that 1~2.5%(wt/vol.) garlic juice showed strong antimicrobial action against growth of all test bacteria at 1/20$\times$10-6 dilution. Especially 1% garlic juice completly inactivated Vibrio parahaemolyticus but approximately 71.9~88% of reduction at same concentration in other bacteria was occurred. 2.5% onion juice had 28.5% antimicrobial activity on Sal. enteritidis, but 50% reduction was occurred on St.aureus and V. parahaemolyticus at same concentration. Antibacterial activity of ginger juice was similar to that of onion juice. 2.5% ginger juice showed approximately 50% reduction on Sal. enteritidis and V.parahaemolyticus, but less antimicrobial activity was occured on St. aureus and E. cloacae. Red pepper juice showed the least antimicrobial activity on food born disease organism compared to that of other juices. 2.5% red pepper juice showed 11.3%, 18.7% and 8.1% reduction on St. aureus, Sal. enteritidis and V.parahaemolyticus, respectively.
Seventy-five Vibrio parahaemolyticus isolates from the surface seawater of the Geum River Estuary area, on the west coast of Korea, were analyzed for the presence of virulence genes and susceptibility to 17 different antimicrobials. All 75 isolates were examined for the presence of two virulence genes (tdh or trh) using polymerase chain reaction; Only one of the isolates possessed the tdh or trh gene. According to the results of disk diffusion susceptibility tests, all of the strains were resistant to penicillin G, 92.0% were resistant to ampicillin, 82.7% were resistant to amoxicillin, 2.7% were resistant to ciprofloxacin, 2.7% were resistant to trimethoprim, 1.3% were resistant to cephalothin, and 1.3% were resistant to erythromycin. However, all of the strains were susceptible to amikacin, cefoxitin, chloramphenicol, gentamycin, kanamycin, nalidixic acid, nitrofurantoin, rifampin, streptomycin, and tetracycline. The average minimum inhibitory concentrations for ampicillin for V. parahaemolyticus was 557.6 ㎍/mL. These results not only provide novel insight into the necessity for seawater sanitation in Geum river estuary area, but they help reduce the risk of contamination of antimicrobial-resistant bacteria.
Distribution of Vibrio parahaemolyticus in the Tegillaria granosa Linne in Costal area Inchun. The survey has been done chiefly from the Inchun Sea ports during 5 months from Oct. 1974 to May 1975. 1. The number of Vibrio parahaemolyticus isolated 17(13.8%) of 117 specimens from Anadara Subcrenata. 2. The number of Vibrio alginolyticus isolated 92 strains of 119 specimens from Tegillaria granosa Linne. 3. Bacteriological characterigation such as morphological, ecological, biochemical results of 17 isolated strain has been identified the category of typical Vibrio parahaemolyticus differentiation. 4. Most of Kanagawa positive strains was positive in Greig test, and considerable number of Kanagawa negative strains was also positive. The result of Greig test was almost the same between cultures in brain heart infusion broth and brain heart infusion agar. 5. Kanagawa positive strains showed same lethal activity in inoculated mice into peritoreal cavity as compared with Kanagawa negative strain.
Urease is an important microbial enzyme and its production is a marker to predict potential pathogenicity. An unusual halophilic bacterium producing urease was isolated from sea product and identified as Vibrio parahaemolyticus KH410. Its biochemical properties were indole negative, gelatin positive, sodium citrate positive and Kanagawa positive whereas other characteristics were identical as the standard strain except it showed a positive reaction on Christensen's urea agar. V. parahaemolyticus urease production was directly related to urea concentration. The production of urease was noticeable by the addition of 0.2% urea, 0.5% glucose, 2% NaCl in LB broth, and the initial pH of 5.5. The maximum production reached after 6 hr of incubation at 37$^{\circ}C$. However, NiCl2, metal ions, phosphorus did not affect production of urease.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.3
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pp.500-504
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2004
This study was designed to investigate the possible utilization of Zanthoxylum schinifolium as a source of decontamination agents. The antimicrobial effect of Zanthoxylum schinifolium extract was investigated against Vibrio parahaemolyticus which is food-born disease organism. Ethanol extract of Zanthoxylum schinifolium was compared with water extract of Zanthoxylum schinifolium to test antimicrobial activities against Vibrio parahaemolyticus by disk method. Ethanol extract was more effective than water ,extract on the antimicrobial activities. It had remarkable antimicrobial activities against Vibrio parahaemolyticus. It was very stable on the wide range of temperature and pH. It turned out by GC-MS that estragole (4-allyl anisole) was a major antimicrobial component of Zanthoxylum schinifolium extract. These results indicated that Zanthoxylum schinifolium extract could protect against bacterial contamination and inhibit a growth of Vibrio parahaemolyticus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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