In an attempt to shift the optimal pH of the xylanase B (XynB) from Aspergillus niger towards alkalinity, target mutation sites were selected by alignment between Aspergillus niger xylanase B and other xylanases that have alkalophilic pH optima that highlight charged residues in the eight-residues-longer loop in the alkalophilic xylanase. Multiple engineered XynB mutants were created by site-directed mutagenesis with substitutions Q164K and Q164K+D117N. The variant XynB-117 had the highest optimum pH (at 5.5), which corresponded to a basic 0.5 pH unit shift when compared with the wild-type enzyme. However, the optimal pH of the XynB-164 mutation was not changed, similar to the wild type. These results suggest that the residues at positions 164 and 117 in the eight-residues-longer loop and the cleft's edge are important in determining the pH optima of XynB from Aspergillus niger.
배추흰나비의 變態에 따른 中腸內 蛋白質分解酵素의 變化, 分布 및 性質을 調査 分析하였다. 中腸內 蛋白質分解酵素는 5齡 幼蟲과 前 期에서 變態直前에 높은 活性이 나타났으나 時期에는 變態後 1日에 가장 높았다. 또한 中腸內의 optimum pH는 5齡 幼蟲에서 pH 8, 前 期에서 pH 6.5, 羽化直後에 pH 8.5로 각각 相異하게 나타났다. 細胞內 酵素 分布는 5齡에서는 주로 中腸의 組織에서 發見되었으나 이후 羽化直前까지는 주로 中腸 內容物에서 發見되었고 中腸 組織에서는 거의 식별할수 없었다. 이러한 結果로 보아 蛋白質分解酵素는 幼蟲期동안 中腸組織에서 合成되였다가 化期에 中腸 內腔으로 放出되는 것 같다.
황산화박테리아인 Thiobacillus sp. IW를 사용한 황함유악취 제거장치를 제작하기 위한 기초자료로서 균의 최적성장조건, 활성탄과 bioceramics에서의 고 정화특성을 조사하였다. Thiobacillus sp. IW는 최척 성장조건이 pH 7, $30^{\circ}C$이고, 이때 세대시간이 38 분으로 다른 황산화균에 비해 아주 빠른 성장속도를 보여주었다. 균의 최적성장조건은 활성탄을 담체로 사용할 경우 pH 5, $35^{\circ}C$였으며, bioceramic의 경우 pH 7~8, $35^{\circ}C$로 액상배양시와는 상이한 성장조건 을 보여주었다. pH, 온도의 변화에 대한 균의 성장은 활성단보다 bioceramics에서 보다 안정적이었고, 총균수도 많았다. 전체적으로 균의 성장속도면에서 는 bioceramics가 활성탄보다 우수한 담체로 사료된다.
에타놀을 생산하는 Flocculent 균주는 균체순환을 위한 외부적인 장치 없이도 발효조 내부 자체에서 고농도의 균체를 유지시킬 수 있는 장점이 있다. 본 연구에서는 Flocculation 특성을 가지고 있는 Saccharomyces uvarum을 사용하여 Glucose 배지에서 회분식 및 연속식 발효특성을 고찰하였고 에타놀 발효의 수학적 모델을 만들었다. 이를 이용하여 여러 온도 및 pH에 따른 발효특성을 비교 검토한 결과 균체성장과 에탄올 생산의 최적온도는 33~35$^{\circ}C$ 이었고 pH 에 대한 영향은 그리 크지 않았으나 pH5가 최적 조건이었다. 이러한 환경적 최적 조건하에서 Semi-batch 발효에 의한 에타놀 최고 생산성은 12g/$\ell$/h이었다.
Rhodopseudomonas capsulata H161에 다량 축적되어 있는, 천연 색소 자원으로 중요한 carotenoid 색소 생성조건을 검토하기 위하여 본 실험을 행하였다. Rhodopseudomonas capsulata H161이 생성하는 주된 carotenoid는 spheroidene, rhodovibrin, spirilloxanthin, lycopene이었다. 본 균주는 anaerobic light, 온도 3$0^{\circ}C$, pH 7.4, 광도 5,000Lux에서 5일간 배양하였을 때 균체 생성과 carotenoid 생성량이 최대치를 보여주었다.
Objective : Kyenegum(Galli Stomachichum Corium) has been popularly used long as the digestive. The purpose of this study was to investigate the enzymatic characteristic of Kyenegum crude enzyme. Methods : To evaluate of the enzymatic characteristic of Kyenegum, we examined the activity of Kyenegum crude enzyme from optimum solvent, optimum temperature and pH of crude Kyenegum extract. Futhermore, we examined the effects of NaCI and acidity of crude Kyenegum extract. Results : The Kyenegum was composed with crude protein about 20%, crude lipid 2%. The optimum Kyenegum dry condition, optimum extract solvent, optimum temperature and optimum pH were $4{\sim}6$ hours at $60^{\circ}C$, commercial apple vinegar, $50^{\circ}C$ and 2.0. Conclusion : The result suggests that the Kyenegum crude enzyme extract very strong enzyme in temperature, NaCl and acidity, respectively.
본 연구는 Monascus purpureus P-57 변이주를 이용하여 액체배양을 통한 세포내 색소 생성의 최적 배양조건을 규명 하고자 하였다. M. purpureus P-57의 색소생성을 위한 최적 배지조성은 $4\%$ rice powder, $0.1\%$ beef extract, $0.03\%$ glutamic acid, $0.1\%\;MgSO_4{\cdot}7H_2O,\;0.25\%\;KH_2PO_4$이며, 배지의 pH는 5.0이였다. 그리고 최적 배양조건은 $30^{\circ}C$ , 150 rpm에서 8일간 배양했을 때 가장 높은 색소 생성력을 나타내었다. M. purpureus P-57을 이상의 최적 조건에서 배양했을 때 적색 색소가 356.04 mit, 황색 색소가 268.20 unit으로 가장 많은 색소를 생성하였고, 균체량은 15.00 g/L를 생산할 수 있었다.
수질계의 부식산을 화학적 산화처리하기 위한 방법의 하나로 광산화공정을 도입하여 부식산의 특성 변화를 조사하였다. 광산화공정은 UV단독, UV/$TiO_2$ 및 UV/$H_2O_2$ 시스템을 실험하였다. UV 단독 조사시 TOC 제거율은 pH 7-9에서 가장 높았으며, 흡광도는 강알카리성 영역에서 감소율이 향상된 결과를 보였다. 각 시스템별로 처리도를 보면, UV/$TiO_2$ 시스템의 경우 $TiO_2$ 의 농도가 50ppm 일때 TOC 제거와 흡광도 감소의 효율이 높았으며 50ppm 이상을 투입해도 처리율에 변화가 없었다. UV/$H_2O_2$ 시스템에서는 과산화수소의 농도가 20mM이 최적의 주입농도로 조사되었으며, 그 이상 투입할 경우 TOC와 흡광도의 처리율이 저하되었다. 탄산이온을 첨가할 경우, TOC 제거율 및 UV 흡광도의 감소율 모두 감소하며, TOC 제거율이 흡광도 감소율에 비해 상대적으로 더 크게 나타났다.
본 연구에서는 형질전환된 식물세포배양으로 생산한 (hGM-CSF)를 cationic exchange resin인 CM-sepharose와 anionic exchange resin인 DEAE-sepharose에 통과키며 pH의 변화를 주었을 때 흡착 여부를 확인하였다. hGM-CSF는 pH가 5-7사이의 범위에서 가장 안정함을 보였으며 이 결과를 바탕으로 각각의 pH 범위를 결정하였다. Buffer exchange를 했을 때 cationic exchange resin인 CM-sepharose의 경우 pH 4.8에서 상대적으로 가장 높은 흡착율(77%)을 보였으며 anionic exchange resin인 DEAE-sepharose를 이용한 흡착에서는 pH 5.5에서 높은 흡착율(74%)을 보였다. 이러한 결과를 바탕으로 buffer exchange 없이 hGM-CSF가 secretion된 배지를 pH를 맞춘 후 좁은 범위에서의 흡착 실험을 수행하였다. 그 결과 pH 4.6에서 CM-sepharose를 이용했을 때 흡착율이 84%로 가장 좋았다. 이러한 결과를 이용하면 외래 단백질을 생산하는 식물세포 배양시에 가장 문제가 되는 protease에 의한 목적 단백질의 degradation을 해결할 수 있는 in situ adsorption이 가능하리라 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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