Helicobacter pylori, an etiologic agent of gastritis and peptic ulceration, produces urease which elicits a powerful immunoglobulin response in H. pylori-infected individuals. To establish a model plant vaccine agains H. pylori, 750 bp -ureA DNA amplified by polymerase chain reaction from pH 808 plasmid harboring urease gene cluster was cloned and manipulated to be expressed in tobacco plants. From the regenerated transgenic tobacco plants, ureA DNA integration,m its mRNA expression and protein synthesis were analyzed and confirmed by standard molecular techniques. The CaMV 35S promoter-driving ureA construct was expressed to produce a 30 kDa protein which was identical with bacterial UreA in size when detected on immunoblot of SDS polyacrylamide gel electrophoresis.
Park, Jae-Seong;Kim, Ik-Hwan;Hong, Eui-Yon;Yun, Tae;Lee, Cheol-Hee;Jeong, Jae-Hun;Yang, Deok-Chun;Yun, Jong-Sun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.15
no.4
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pp.285-290
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2007
This study was conducted to introduce phosphinothricin acetyl transferase (PAT) gene, resistant to basta which was non-selective herbicide, into balloon flower (Platycodon grandiflorum A. De. candolle). Seeds were germinated on MS medium, and 10-day-old immature cotyledon explants and 30-day-old leaf explants were cocultured with Agrobacterium tumefaciens strain MP 90 (pBinSyn) on 1/10 MS medium for 48 hours in the dark at $25^{\circ}C$. The cultures were transferred for selection of kanamycin-resistant shoots to the MS medium supplemented with 0.2 $mg/{\ell}$ NAA, 1.0 $mg/{\ell}$ BA, 3% sucrose, 100 $mg/{\ell}$ kanamycin, 500 $mg/{\ell}$ carbenicillin. Shoots were obtained from 10-day-old immature cotyledon explants after 4 weeks of culture. The shoots were subcultured twice every 4 weeks on the same medium for growth of transgenic shoots. Successful transformation was confirmed by histochemical GUS assay, PCR analysis, RT-PCR analysis, 10 $mg/{\ell}$ phosphinothricin treatment and 0.3% basta spray. The basta-resistant transgenic plants flowered normally.
Kim, Jeong-Min;Lee, Yeung-Ho;Jung, Sung-Hoon;Lee, Jin-Tae;Cho, Moo-Hwan
Clean Technology
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v.16
no.1
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pp.51-58
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2010
Methane was produced from the anaerobic digestion of marine macro-algae. Elemental analysis was first performed to estimate the theoretical methane production of three macro-algae (Undaria pinnatifida, Laminaria japonica, Hizikia fusiformis). Three algae were found to contain C 34 ~ 36%, H 5%, O 37 ~ 43%, N 2 ~ 4%, S 0.4 ~ 0.7%, and ash 14~21%, and the theoretical methane content was in the range of 56 ~ 60%, which can produce 442 ~ 568 mL $CH_4$ per g of volatile solid (VS). Using the biological methane potential (BMP) test, we found that L. japonica resulted in the highest yield of methane (52%). Moreover, various operational conditions, such as algae amount, pH, salinity, particle size, and pre-treatment, were investigated in order to find an optimal condition of anaerobic digestion. At pH 8.0, the autoclaved L. japonica (5g VS/200 mL), when used without washing salt, produced 268.5 mL/g VS which is 65% of the theoretical methane productions. Furthermore, using a CSTR (with the working volume of 7 L out of the total volume of 10 L), we have successfully operated the reactor for 65 days and obtained maximum methane production rate of 1.4 L/day with purity of 70%.
석탄가스화복합발전(IGCC: Integrated Gasification Combined Cycle)의 고온 고압 합성가스로부터 $CO_2$를 저비용으로 포집하기 위한 연소전 포집 기술 중 유동층 촉진수성가스전환(SEWGS) 공정이 제안되어 연구개발 중에 있다. 연소전 $CO_2$ 포집을 위한 SEWGS 공정은 동일한 2탑 순환 유동층 반응기에서 고온 고압의 합성가스($H_2$, CO)를 유동층 WGS 촉매를 사용하여 CO를 $CO_2$로 전환하는 동시에 전환반응으로 생성된 $CO_2$를 흡수제를 이용하여 포집하는 기술이다. 본 연구는 $CO_2$ 회수와 WGS 반응이 동시에 이루어지는 공정에 적용 가능한 건식 재생 흡수제 및 유동층 WGS 촉매 개발을 목표로 $CO_2$ 흡수제(P Series) 및 WGS 촉매(PC Series) 조성을 제안하고 분무건조기를 이용하여 6~8kg/batch로 성형 제조하였다. 제조된 $CO_2$ 흡수제 및 촉매의 특성 평가 결과 내마모도(Attrition resistance)를 포함한 물리적 특성이 유동층 공정의 요구조건을 만족하는 결과를 얻을 수 있었다. 또한, 모사 석탄 합성가스를 이용하여 20bar, $200^{\circ}C$ 흡수/$400^{\circ}C$ 재생 조건에서 열중량 분석기(TGA) 및 가압 유동층(Fluidized-bed) 반응기를 통한 흡수제의 $CO_2$ 흡수능 평가를 수행하였다. 그 결과 내마모도(AI) 3% 이하로 기계적 강도가 우수하며, $CO_2$ 흡수능 17.6 wt%(TGA) 및 11wt%(가압 유동층)를 나타냈다. 유동층 WGS 특성 평가 결과 내마모도가 7~35%로 우수하였고, CO 전환율은 $200^{\circ}C$에서 80% 이상으로, 유동층 SEWGS 공정에 적용 가능한 특성을 확인하였다.
This experiment was carried out to investigate the effect of different stocking rate on growth, cast production and conversion efficiency of organic matter to tissues of earthworm. The carbon and nitrogen ratio (C/N) of tested Korean cow manure was 25.1, it was estimated an adequate ratio as feed for earthworms. The different stocking rates were 1:8(S-1), 1:16(S-2), 1:32(S-3) 1:64(S-4) 1:128(S-5) and 1:256 (S-6) as the ratios of earthworm fresh weight to biomass of Korean cow manure, respectively. A stocking rate of 1:32(S-3) was obtained a significantly highest values of increasing rate and conversion efficiency of organic matter to earthworm tissues. The mean values of increasin g rate of fresh weight and conversion efficiency of organic matter to earthworm tissues were 10.63 mg/day and 6.65% at the ratio of 1:32(S-3) with a rearing volume was $56.6cm^3$. A stocking rate of 1:8(S-1) was obtained a highest ratio of vermicasts, but showed a negative values of increasing rate and conversion efficiency of organic matter to earthworm tissues, it may due to severely food competition between individuals during the rearing periods. The pH, total nitrogen, available phosphorus, cation exchange capacity and exchangeable cations of vermicasts tended to increase with stocking rate. Especially, available phosphorus, cation exchange capacity and exchangeable cations of vermicasts tended to increase with rearing progressed. Vermicasts have the potential for improving plant growth when amended to container medium and soil according to increased availability of nutrients and improved physicochemical properties.
A 5.7Kb EcoRI fragment containing alkaline amylase gene of Bacillus sp. AL-8 obtained in the previons experiment (10) was transformed in B. subtilis via plasmid pUB110. The enzymatic proper-ties of the amylase produced by the transformants were Identical to those of the donor strain. Thus, the alkaline amylase activity from the transformant was maximum at pH 10 and 5$0^{\circ}C$. And the enzyme was very stable over the ranges of alkaline pH. In order to determine the location of the alkaline amylase gene within the 5.7Kb DNA fragment, the fragment was subcloned in E. coli. It was found that the alkaline amylase gene was located k EcoRI fragment of 3.7Kb.
A zwitterionic surfactant shows not only detergency but also mildness effect since it shows characteristics of a nonionic or an anionic surfactant above an isoelectric point, while showing characteristics of a cationic surfactant below an isoelectric point. Therefore, a zwitterionic surfactant can serve as a dual function surfactant by a single molecule through the interconversion of cleaning and softening effects depending on pH variations of the aqueous solution. In this study, physical properties of betaine surfactant such as CMC, surface tension, interfacial tension, contact angle and viscosity were measured and phase behavior study was performed. Also dual function characteristics of betaine zwitterionic surfactant were investigated by measuring an isoelectric point using QCM(quartz crystal microbalance) and zeta potential measurement. The CMC of betaine surfactant was near $10^{-4}mol/L$ and the surface tension at CMC was about 32 mN/m. The interfacial tension between 1 wt% aqueous solution and n-decane measured by spinning drop tensiometer at pH 2~10 resulted in an increase in interfacial tension until pH 5 and a decrease with pH after 5 and equilibration time showed the similar trend with an increase in pH. The isoelectric point of betaine surfactant measured by QCM experiment was found to exist between 3.0 and 3.3, which is the same as the result determined by zeta potential measurement.
Genipin was obtained from hydrolysis of geniposide isolated from gardenia fruits with ${\beta}-glucosidase$. Reaction of genipin with glycine, alanine, histidine, lysine, phenylalanine and glutamate in aqueous buffer solution converted colorless starting materials to blue pigments. Effect of pH for the formation of blue pigments was tested using UV/Vis spectrophotometer. The optimum pH for the formation of blue pigments was 7.0. No pigment and trace amounts were formed at acidic (pH 3.0) and alkaline (pH 12.0) conditions, respectively. The amount and tincture of blue color were distinct with different amino acids. In contrast with lysine $({\lambda}_{max}=573\;nm)$, glycine $({\lambda}_{max}=595\;nm)$, phenylalanine $({\lambda}_{max}=602\;nm)$ and alanine $({\lambda}_{max}=595\;nm)$, the reaction of genipin with histidine $({\lambda}_{max}=601\;nm)$ and glutamate $({\lambda}_{max}=601\;nm)$ produced relatively small amounts of blue pigments. Rate constants for the formation of blue pigments from genipin with amino acids at various temperatures $(60,\;70,\;80,\;90^{\circ}C,\;pH\;7.0\;phosphate\;buffer)$ were obtained. Rate constants of genipin with basic amino acids were larger than neutral or acidic amino acids. Arrhenius activation energies of the formation of blue pigments indicated that activation energy of glycine $(E_A=9.8\;kcal/mol)$ was especially lower than those of other amino acids $(E_A=13.3{\sim}15.4\;kcal/mol)$.
Previously, we synthesized a novel Cyclin-dependent kinase inhibitor, MCS-5A. Also, we investigated the involvement of cell cycle regulatory events during MCS-5A-mediated apoptosis in HL-60(+p16/-p53) cells with up-regulation of p16 protein expression. In contrast, apoptosis was not observed in A549(-p16/+p53) cells. Therefore we propose that $p16^{INK4A}$ is a key enzyme for inducing apoptosis. In the present studies, we have explored the mechanism of $p16^{INK4A}$ -mediated cytotoxicity and the role of p16.sup INK4A/ overexpression in the induction of apoptosis in human tumor cells. The tumor suppressor gene $p16^{INK4A}$ is known as a cyclin-dependent kinase inhibitor (CKI) and cell cycle regulator. We expressed wild type $p16^{INK4A}$ in pcDNA3.1 vector and then transfected into non-small cell lung cancer (NSCLC) cell expressing different statue of p16$^{INK4A}$, p53 gene〔A549(-p16/+p53), H1299(-p16/-p53) and HeLa(+pl6/+p53) cell line〕. TUNEL assay (including propidium iodide staining following transfection of these cell line with pcDNA3.1-pl6) indicate that p16$^{INK4A}$-mediated cytotoxicity was associated with apoptosis. This is supported by studies demonstrating an induction of caspase 3 cleavage due to the transfection of A549, H1299 and HeLa cells with pcDNA3.1-pl6. These results suggest that p16$^{INK4A}$ has a new function of inducing apoptosis which is not related with the function of tumor suppressor gene p53.
This study was conducted to understand the role of oxidative enzyme cytochrome $P_{450}$ in the bioactivation of benfuracarb and to know metabolites of benfuracarb by cytochrome $P_{450}$. The bimolecular imhibition rate constant $(k_i)$ of benfuracarb on acetylcholinesterase (AChE) was as low as $1.1{\times}10^3\;M^{-1}\;min^{-1}$, suggesting that benfuracarb should be activated for its toxic action. The potency of benfuracarb on AChE in the oxidase system (cytochrome $P_{450}$ + NADPH) in vitro was 10-fold higher than that of control (cytochrome $P_{450}$). Such a similar result was also found in the oxidase + PBO system. In vivo the $I_{50}$ of benfuracarb was 22.7mg $kg^{-1}$, but pie-treatment of piperonyl butoxide (PBO) reduced the $I_{50}$ by >100mg $kg^{-1}$. This result suggests that cytochrome $P_{450}$ was involved in the activation of benfuracarb. Using microsomal oxidase system, metabolites of benfuracarb were elucidated. Fifty-eight percent of benfuracarb was converted to carbofuran, a major toxic metabolite, in the oxidase system, while only less than two percent of benfuracarb was converted to carbofuran in the oxidase + PBO system. These results also suggest that cytochrome $P_{450}$ was involved in the activation of benfuracarb. Overall results indicate that cytochrome $P_{450}$ could be involved in the bioactivation of benfuracarb to carbofuran.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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