• Molecules and Cells
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• 제40권2호
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• pp.109-116
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• 2017

Soybean agglutinin (SBA) is an anti-nutritional factor of soybean, affecting cell proliferation and inducing cytotoxicity. Integrins are transmembrane receptors, mediating a variety of cell biological processes. This research aims to study the effects of SBA on cell proliferation and cell cycle progression of the intestinal epithelial cell line from piglets (IPEC-J2), to identify the integrin subunits especially expressed in IPEC-J2s, and to analyze the functions of these integrins on IPEC-J2 cell cycle progression and SBA-induced IPEC-J2 cell cycle alteration. The results showed that SBA lowered cell proliferation rate as the cell cycle progression from G0/G1 to S phase (P < 0.05) was inhibited. Moreover, SBA lowered mRNA expression of cell cycle-related gene CDK4, Cyclin E and Cyclin D1 (P < 0.05). We successfully identified integrins ${\alpha}2$, ${\alpha}3$, ${\alpha}6$, ${\beta}1$, and ${\beta}4$ in IPEC-J2s. These five subunits were crucial to maintain normal cell proliferation and cell cycle progression in IPEC-J2s. Restrain of either these five subunits by their inhibitors, lowered cell proliferation rate, and arrested the cells at G0/G1 phase of cell cycle (P < 0.05). Further analysis indicated that integrin ${\alpha}2$, ${\alpha}6$, and ${\beta}1$ were involved in the blocking of G0/G1 phase induced by SBA. In conclusion, these results suggested that SBA lowered the IPEC-J2 cell proliferation rate through the perturbation of cell cycle progression. Furthermore, integrins were important for IPEC-J2 cell cycle progression, and they were involved in the process of SBA-induced cell cycle progression alteration, which provide a basis for further revealing SBA anti-proliferation and anti-nutritional mechanism.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제37권1호
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• pp.73-81
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• 2010

목 적: 클로미펜을 이용한 배란유도 주기에서 불량한 자궁내막 발달을 보이는 불임 여성에서 레트로졸의 효용성을 알아보고자 하였다. 연구방법: 2004년 3월부터 2009년 8월까지 분당서울대학교병원에서 클로미펜을 이용한 배란유도 주기에서 자궁내막 두께가 6.5 mm 이하여서 다음 주기에 레트로졸을 사용하였던 18명의 불임 여성을 선정하였다. 환자들의 평균 연령은 $30.7{\pm}2.8$세, 불임 기간은 $33.1{\pm}26.6$개월이었다. 불임의 인자는 자궁내막증이 1명, 다낭성난소증후군이 5명, 원인불명의 불임증이 12명이었다. 레트로졸은 2.5 mg의 용량으로 월경 3~5일 사이에 시작하여 5일간 투여하였다. 결 과: 이전 클로미펜 사용시와 비교하였을 때 레트로졸 주기에서 우성난포의 개수는 더 적었으나 ($1.1{\pm}0.3$ vs. $2.2{\pm}1.5$, p=0.011) 자궁내막 두께는 유의하게 증가하였으며 ($8.4{\pm}1.7$ mm vs. $5.8{\pm}0.5$ mm, p<0.001) 자궁내막 패턴 중 type C의 빈도는 이전 클로미펜 주기에서 50%이었던 것이 레트로졸 사용시 94.4%로 유의한 증가를 보였다 (p=0.036). 레트로졸을 이용한 배란 유도 주기에서 임신율은 11.1%였다. 결 론: 얇은 자궁내막 발달을 보였던 클로미펜 주기에 비해 레트로졸 사용시 자궁내막이 좀 더 두꺼워지고 패턴이 호전되는 것으로 보아 클로미펜에 불량한 자궁내막을 보이는 여성에서 이차 선택약제로 레트로졸의 사용은 유용한 방법으로 사료된다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제44권4호
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• pp.796-805
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• 1997

연구배경 : 세포주기의 활성화, 그 중에서도 특히 $G_1$/S 이행에 관여하는 세포주기관련 단백질들은 암발생에 있어서 매우 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. $G_1$ 세포주기 관련 단백질 중의 하나인 cdk4 (cyclin dependent kinase 4)의 억제제로 알려져 있는 p16 유전자는 최근에 밝혀진 종양억제유전자중의 하나로서 MTS1 (multiple tumor suppressor 1)이라고도 불린다. p16 유전자는 지금까지 알려진 어느 종양관련 유전자보다도 유전자변이의 빈도가 높은 암억제유전자인데, 특히 비소세포폐암인 경우는 70% 이상의 세포주에서 p16 단백질의 발현이 없는 것으로 밝혀져 있어 p16 유전자는 비소세포폐암 발생에 매우 중요한 역할을 할 것이라고 알려져 있다. 본 연구에서는 비소세포폐암에서 p16을 이용한 유전자치료의 타당성을 입증하기 위하여 다음과 같은 연구를 시행하였다. 방 법 : p16이 결여된 비소세포폐암 세포주 (NCI-H441)에, 정상섬유아세포에서 총 RNA를 추출하여 역전사효소 및 DNA 중합효소반응으로 증폭된 p16 cDNA를 유핵세포 발현 vector인 pRC-CMV plasmid에 subcloning하여 구축된 pRC-CMV-p16 plasmid vector를 lipofectin을 이용하여 유전자 이입한 후, 단백질을 추출하여 Western blot 분석과 면역침전법으로 $G_1$ 세포주기관련 단백질의 변동을 관찰하고, colony 형성능을 비교함으로써 암억제효과를 확인하였다. 결 과 : p16이 유전자주입된 NCI-H441 세포주에서 p16과 cdk4가 복합체를 형성하고 있고 인산화 Rb가 대조 세포주에 비해 감소되어 있음을 확인할 수 있어, p16이 cdk4와 결합함으로써 cdk4에 의한 Rb의 인산화를 방해하고 이에 따른 $G_1$ 세포주기 정체에 의해 종양억제효과가 나타난다는 설명을 뒷받침할 수 있었다. Clonogenic assay 결과는 p16 유전자주입된 NCI-H441 세포주의 colony 형성능이 대조 세포주에 비하여 현격히 감소함을 관찰하였다. 결 론 : 이상의 결과로 p16(MTS1) 유전자를 p16 단백질을 발현하지 못하는 비소세포폐암 세포주에 주입할 경우, 주입한 유전자에서 생성되는 p16 단백질이 cdk와 결합하여 Rb 단백질의 인산화를 저하시켜 궁극적으로 암억제 효과를 일으킬 수 있음이 확인되었고, 이는 향후 비소세포폐암의 유전자치료에 있어서 p16 유전자의 이용 가능성을 확인한 기초자료가 된다고 생각된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제23권3호
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• pp.190-197
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• 1999

본 연구는 인삼 panaxynol이 인체 흑색종 세포주 SK-MEL-1 미치는 항증식효과의 분자적 기전을 알아보고자, 세포주기와 세포주기 조절인자들의 발현변화, 단백질 합성 억제제와 proteasome억제제가 panaxynol의 항암효과에 미치는 영향을 조사하였다. panaxynol은 세포주기의 G1 단계 진행을 억제시켰으며, 동시에 $p21^{WAF1}$ 발현 증가와 cdc2의 발현 감소를 유발하였다. 이에 비해 p16, p27, E2F-1, Rb, p53의 발현에는 변화가 없었다. 이 결과는 panaxynol의 SK-MEL-1 세포에서 $p21^{WAF1}$의 발현을 증가시키고 cdc2의 발현을 감소시켜, 세포주기의 G1-S 이행 단계를 억제한다는 것을 보여준다 또한 CHX는 panaxynol의 항암효과를 감소시키고, LLnL은 panaxynol의 항암 효과를 증가시켰는데, 이는 panaxynol에 의한 SK-MEL-1 세포의 증식억제에 새로운 단백질 합성이 필요하며, LLnL이 panaxyno떼 의한 세포증식억제를 매개하는 $p21^{WAF1}$등의 단백질 분해를 저해시키기 때문인 것으로 생각된다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제29권6호
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• pp.658-666
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• 2021

Podophyllotoxin (PT), a lignan compound from the roots and rhizomes of Podophyllum peltatum, has diverse pharmacological activities including anticancer effect in several types of cancer. The molecular mechanism of the anticancer effects of PT on colorectal cancer cells has not been reported yet. In this study, we sought to evaluate the anticancer effect of PT on human colorectal cancer HCT116 cells and identify the detailed molecular mechanism. PT inhibited the growth of cells and colony formation in a concentration-dependent manner and induced apoptosis as determined by the annexin V/7-aminoactinomycin D double staining assay. PT-induced apoptosis was accompanied by cell cycle arrest in the G2/M phase and an increase in the generation of reactive oxygen species (ROS). The effects of PT on the induction of ROS and apoptosis were prevented by pretreatment with N-acetyl-L-cysteine (NAC), indicating that an increase in ROS generation mediates the apoptosis of HCT116 cells induced by PT. Furthermore, Western blot analysis showed that PT upregulated the level of phospho (p)-p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK). The treatment of SB203580, a p38 inhibitor, strongly prevented the apoptosis induced by PT, suggesting that PT-induced apoptosis involved the p38 MAPK signaling pathway. In addition, PT induced the loss of mitochondrial membrane potential and multi-caspase activation. The results suggested that PT induced cell cycle arrest in the G2/M phase and apoptosis through the p38 MAPK signaling pathway by upregulating ROS in HCT116 cells.

• 대한의생명과학회지
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• 제16권2호
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• pp.71-74
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• 2010

Cell proliferation is governed by precise and orderly process the regulation of which involves many different proteins. The key enzyme for cell growth and arrest is cyclin dependent kinases (cdks). In human cells, several cdks orchestrate four distinct cell cycle phases (M, $G_1$, S and $G_2$ ) and they sequentially operate in an order of cdc1, cdk4, cdk6 and cdk2. The regulatory components of cdks consist of cyclins and two family of cdk inhibitors, INK4 (inhibitors of cdk4) and KIP (kinase inhibitor protein). $G_1$ regulatory molecules for cdk mainly respond to environmental cues of mitogenic and anti-mitogenic stimuli and therefore influence activities of $G_1$ cdks, namely, cdk4/6 and cdk2. $G_1$ inhibitors include $p21^{CIP}$ and $p27^{KIP1}$. Between them, $p27^{KIP1}$ has attracted attentions of many researchers because of its characteristic regulatory features and diverse functions. Besides, the role of $p27^{KIP1}$ in cancer development warrants further studies in the future. Therefore, this review will focus on the recent findings and especially on the complexity of regulatory mechanisms of $p27^{KIP1}$.

• Laboraroty Animal Research
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• 제34권4호
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• pp.264-269
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• 2018

Cell cycle dysfunction can cause severe diseases, including neurodegenerative disease and cancer. Mutations in cyclin-dependent kinase inhibitors controlling the G1 phase of the cell cycle are prevalent in various cancers. Mice lacking the tumor suppressors $p16^{Ink4a}$ (Cdkn2a, cyclin-dependent kinase inhibitor 2a), $p19^{Arf}$ (an alternative reading frame product of Cdkn2a,), and $p27^{Kip1}$ (Cdkn1b, cyclin-dependent kinase inhibitor 1b) result in malignant progression of epithelial cancers, sarcomas, and melanomas, respectively. Here, we generated knockout mouse models for each of these three cyclin-dependent kinase inhibitors using engineered nucleases. The $p16^{Ink4a}$ and $p19^{Arf}$ knockout mice were generated via transcription activator-like effector nucleases (TALENs), and $p27^{Kip1}$ knockout mice via clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9 (CRISPR/Cas9). These gene editing technologies were targeted to the first exon of each gene, to induce frameshifts producing premature termination codons. Unlike preexisting embryonic stem cell-based knockout mice, our mouse models are free from selectable markers or other external gene insertions, permitting more precise study of cell cycle-related diseases without confounding influences of foreign DNA.

• 대한전자공학회:학술대회논문집
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• 대한전자공학회 2000년도 하계종합학술대회 논문집(2)
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• pp.40-43
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• 2000

The electrons and holes trapped in the tunneling oxide and interface-states generated in the Si/SiO$_2$ interface during program/erase (P/E) operations are known to cause reliability problems which can deteriorate the cell performance and cause the V$_{th}$ window close. This deterioration is caused by the accumulation of electrons and holes trapped in the oxide near the drain and source side after each P/E cycle. we propose three new erase schemes to improve the cell's endurance characteristics: (1)adding a Reverse soft program cycle after the source erase operation, (2)adding a detrapping cycle after the source erase operation, (3)adding a convergence cycle after the source erase operation. (3) is the most effective performance among the three erase schemes have been implemented and shown to significantly reduce the V$_{th}$ window close problem. And we are able to design the reliable periperal circuit of flash memory by using the (3).(3).

• 대한수의학회지
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• 제35권4호
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• pp.833-841
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• 1995

젖소 16두를 대상으로 발정주기중 황체의 크기와 progesterone 농도 사이의 상관관계를 알아보기 위하여 황체의 크기를 초음파 진단장치로 측정하였다. 검사우 16두중 9두는 낭종양 황체(corpus luteum with cavity) 나머지 7두는 정상 황체 (corpus luteum without cavity)를 가지고 있었다. Progesterone 농도측정을 위한 우유의 채취 및 초음파 검사는 배란일 부터 배란후 12일 까지는 매 2일 간격으로 그리고 14일 이후부터 다음 배란일 까지는 매일 실시하였다. 발정주기중 황체의 크기와 progesterone 농도는 낭종양 황체 및 정상 황체를 가지고 있는 소들 사이에서 유의성 있는 차이가 없었다. 황체의 크기와 progesterone 농도 사이의 상관관계는 황체발육기(Days 2~8)때 낭종양 황체를 가지고 있는 소가 0.71(p<0.0001), 정상 황체를 가지고 있는 소는 0.74 (p<0.0001) 이었고, 황체퇴행기 (Days -6~0) 때는 0.73(p<0.0001)과 0.76(p<0.0001) 이었으며 전체적으로는 0.70(p<0.0001) 이었다. 이처럼 발정주기중 황체의 크기와 progesterone 농도 사이에는 밀접한 상관관계가 있어서 초음파 진단장치에 의한 황체크기의 측정은 progesterone 농도를 추측할 수 있는 수단으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

• 대한설비공학회지:설비저널
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• 제20권3호
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• pp.218-223
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• 1991