Background: Ergothioneine (EGT) is a natural amino acid derivative in various animal organs and is a bioactive compound recognized as a food and medicine. Objectives: This study examined the effects of EGT supplementation during the in vitro maturation (IVM) period on porcine oocyte maturation and subsequent embryonic development competence after in vitro fertilization (IVF). Methods: Each EGT concentration (0, 10, 50, and 100 μM) was supplemented in the maturation medium during IVM. After IVM, nuclear maturation, intracellular glutathione (GSH), and reactive oxygen species (ROS) levels of oocytes were investigated. In addition, the genes related to cumulus function and antioxidant pathways in oocytes or cumulus cells were investigated. Finally, this study examined whether EGT could affect embryonic development after IVF. Results: After IVM, the EGT supplementation group showed significantly higher intracellular GSH levels and significantly lower intracellular ROS levels than the control group. Moreover, the expression levels of hyaluronan synthase 2 and Connexin 43 were significantly higher in the 10 μM EGT group than in the control group. The expression levels of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) and NAD(P)H quinone dehydrogenase 1 (NQO1) were significantly higher in the oocytes of the 10 μM EGT group than in the control group. In the assessment of subsequent embryonic development after IVF, the 10 μM EGT treatment group improved the cleavage and blastocyst rate significantly than the control group. Conclusions: Supplementation of EGT improved oocyte maturation and embryonic development by reducing oxidative stress in IVM oocytes.
Park, Dong Hwa;Lee, Seung Tae;Jun, Do Youn;Lee, Ji Young;Woo, Mi Hee;Kim, Ki Young;Seo, Myung Chul;Ko, Jee Yeon;Woo, Koan Sik;Jung, Tae Wook;Kwak, Do Yeon;Nam, Min Hee;Kim, Young Ho
Journal of Life Science
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v.24
no.1
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pp.26-38
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2014
To examine the antioxidant activities of 11n selected miscellaneous cereal grains (proso millet, yellow glutinous proso millet, hwanggeumchal sorghum, glutinous sorghum, white glutinous sorghum, yellow glutinous foxtail millet, nonglutinous foxtail millet, green glutinous foxtail millet, golden foxtail millet, barnyard millet, and adlay), the free radical-scavenging activities of 80% ethanol extracts of the individual grains were investigated using 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) methods. The ethanol extracts of hwanggeumchal sorghum, glutinous sorghum, and barnyard millet grains exhibited more potent free radical-scavenging activities as compared to the other grains. When these three ethanol extracts were sequentially fractionated with n-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, and n-butanol, the majority of the antioxidant activities were detected in the ethyl acetate and butanol fractions in which phenolic ingredients were abundant. The ethyl acetate and butanol fractions of hwanggeumchal sorghum and the ethyl acetate fraction of glutinous sorghum showed higher antioxidant activity than that of ${\alpha}$-tocopherol. Both ferric thiocyanate (FTC) and thiobarbituric acid (TBA) methods demonstrated that these organic solvent fractions could inhibit lipid peroxidation. The ethyl acetate fractions from hwanggeumchal sorghum, glutinous sorghum, and barnyard millet grains could suppress tertiary-butyl hydroperoxide (TBHP)-induced apoptotic events, including sub-G1 peaks, ${\Delta}{\Psi}m$ loss, activation of caspase-9 and caspase-3, and cleavage of PARP and lamin B, in human HL-60 cells. These results show that the grains of hwanggeumchal sorghum (Sorghum bicolor L. Moench cv. Hwanggeumchalsusu), glutinous sorghum (Sorghum bicolor L. Moench cv. Chalsusu), and barnyard millet (Echinochloa esculenta) possess efficient antioxidant activity, which could protect cells from oxidative stress-mediated cytotoxicity.
The formation of reactive lipid aldehydes, 4-hydroxynonenal (HNE) is shown to be derived from fatty acid hydroperoxides through the oxidative process. Among its known effects in cytotoxicity, HNE has been implicated in apoptotic cell death. To delineate its putative role as a potential mediator, we investigated the mechanism by which HNE induces apoptosis of endothelial cells (ECs). The anti-proliferative effects of HNE were tested through MTT assay after exposure to various concentrations ($5\sim15\;{\mu}M$) of HNE. We observed apoptotic bodies with propidium iodide staining, and measured the HNE induction of endothelial apoptosis by flow cytometry assay. We observed that cells exposed to HNE for 24 hr resulted in increased poly(ADP-ribose) polymerase cleavage and up-regulation of Bax. Data on the HNE action strongly indicated the involvement of reactive species, namely, intracellular ROS, nitrite, and peroxynitrite. To obtain evidence on the implication of ROS and peroxynitrite in HNE-induced apoptosis, a ROS scavenger, N-acetylcysteine (NAC), and a peroxynitrite scavenger, penicillamine, were tested. Results clearly indicate that the induction of apoptosis by HNE was effectively inhibited by NAC and penicillamine. Based on the present data, we conclude that the endothelial apoptosis induced by HNE involves both ROS generation and peroxynitrite activity. Our new data could lead to a redefinition of HNE action on apoptosis in ECs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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