Liying, Dong;Shufang, Liu;Jing, Li;Didier, Tharreau;Pei, Liu;Dayun, Tao;Qinzhong, Yang
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.6
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pp.679-684
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2022
Rice blast is one of the most destructive diseases of rice worldwide, and the causative agent is the filamentous ascomycete Magnaporthe oryzae. With the successful cloning of more and more avirulence genes from M. oryzae, the direct extraction of M. oryzae genomic DNA from infected rice tissue would be useful alternative for rapid monitoring of changes of avirulence genes without isolation and cultivation of the pathogen. In this study, a fast, low-cost and reliable method for DNA preparation of M. oryzae from a small piece of infected single rice leaf or neck lesion was established. This single step method only required 10 min for DNA preparation and conventional chemical reagents commonly found in the laboratory. The AvrPik and AvrPi9 genes were successfully amplified with the prepared DNA. The expected DNA fragments from 570 bp to 1,139 bp could be amplified even three months after DNA preparation. This method was also suitable for DNA preparation from M. oryzae strains stored on the filter paper. All together these results indicate that the DNA preparation method established in this study is reliable, and could meet the basic needs for polymerase chain reaction-based analysis of M. oryzae.
Aspergillus oryzae is a filamentous fungus classified in the group Aspergillaceae Ascomycetes. It is an important microorganism for industrial production of enzymes and fermented food productions. The genetic transformation system in A. oryzae was used to protoplast mediated transformation with PEG/$CaCl_2$. When the protoplast was used, the regeneration efficiency was decreased and then transformation frequence was also effected. In this study, fungal transformation was carried out by bypassing the protoplast isolation step, changing enzymes, such as hemicellulase and celluclast, and decreasing the culturing time for the increment of the transformation efficiency. 83 transformants/10ug of DNA with hemicellulase were obtained, compared with less than 10 transformants with novozyme234 and celluclast.
Effects of propylamine on conidial head formation and growth of Aspergillus niger and Aspergillus oryzae were analyzed. Propylamine inhibited conidial head formation in these two fungi, and the inhibitory effect of propylamine was not suppressed by the addition of potassium chloride at high concentration, which promotes conidial head formation in A. nidulans and A. oryzae. Propylamine also inhibited the growth of A. niger and A. oryzae by $41\%\;and\;32\%$, respectively, when the concentration of propylamine was $2\%$.
The most favorable nitrogen source for the production of protease by Aspergillus oryzae PF was 2% soybean flour among sodium nitrate, ammonium sulfate, defatted soybean, skim milk, casein, peptone, and yeast extract. The production of protease from A. oryzae PF was higher at the concentration of 2% lactose than at variable concentration of glucose, sucrose, soluble starch, corn starch, potato starch, wheat starch, rice starch, cellulose, and gum arabic. Protease production was affected by the concentration of KH2PO4, Triton X-100, CaCo3, and MgSO4, and it was the highest at the highest at the concentration of 3% KH2PO4, 0.01% Triton X-100, 0.3% CaCO3, and 0.06% MGSO4.
Soft rot on banana fruit caused by Rhizopus oryzae was identified for the first time in Korea. Colonies were white to light brown and formed numerous sporangiospores. Optimum temperature for mycelial growth was $30^{\circ}C$. Sporangia were globose and $30{\sim}200{\mu}m$. Sporangiophores were usually straight, $8{\sim}20{\mu}m$, and rhizoids usually in groups of 3~5. Columella were globose to sub-globose and $90{\sim}110{\mu}m$. Sporangiospores were sub-globose or oval and $4{\sim}10{\mu}m$. Based on its mycological characteristics, molecular analysis, and pathogenicity to host plants, this fungus was identified as Rhizopus oryzae Went & Prisen Geerligs. This is the first report of soft rot on banana caused by Rhizopus oryzae in Korea.
The enzyme was produced by Asp.oryzae SHW 131. the enzymatic properties of .alpha.-amylase are following : 1) Crystallization of .alpha.-amylase is formed of longish square. 2) The range of stable pH is 5-10 and optimum ph is 5.5. 3) It is very unstable enzyme about EDTA and protection by $Ca^{++}$ ion and best activated at $50^{\circ}C$ about temperature. 4) Asp.oryzae SHW 131 produced .alpha.-amylase with acid-protease, neutral-protease and tepid-alkalin-protease.
The enzyme was produced by Asp.oryzae SHW 131. the enzymatic properties of .alpha.-amylase are following : 1) Crystallization of .alpha.-amylase is formed of longish square. 2) The range of stable pH is 5-10 and optimum ph is 5.5. 3) It is very unstable enzyme about EDTA and protection by $Ca^{++}$ ion and best activated at $50^{\circ}C$ about temperature. 4) Asp.oryzae SHW 131 produced .alpha.-amylase with acid-protease, neutral-protease and tepid-alkalin-protease.
The current investigation was carried out to explore the possibility of submerged fermentation of Saccharina japonica as sole substrate using Aspergillus oryzae. In this study we used 2% S. japonica powder as fermentation media for A. oryzae. Fermentation period was optimized by monitoring the fermented sample at regular intervals for a period of 7 days. Results found that a fermentation period of 5 days was effective with maximum desirable characteristics such as total sugar, total phenolic and flavonoid contents. Under optimum fermentation period, fermented extracts showed enhanced antioxidant activity as determined by different assays such DPPH radical scavenging, ABTS scavenging and phosphomolydenum assay. This study provides the information for the enhancement of bioactive molecules in an eco-friendly manner and also paves way towards the development of wide range of seaweed-based functional foods.
An antagonistic bacterium PM-1 which strongly inhyibits the growth of Pyricularia oryzae was isolated and identified as paenibacillus macerans. The antifungal substances of the strain PM-1 showed the broad antifungal spectra against P.oryzae races. Relating to the localization test, it was found that the antifungal substances existed not only in the cytoplasm but also in the culture supernatant, and importantly the antifungal activity of the latter was stronger than that of the former. The extracellular antifungal substances were extremely heat-stable up to $121^{\circ}C$ for 15 min. The substances were optimally produced at $20^{\circ}C$ and pH 10.0 in a potato dextrose broth. The culture filtrate of the strain PM-1 caused a partial swelling of the mycelia of P.oryzae, and it prevents the normal growth of the fungus as well. This result suggested that the antifungal substances secreted by the strain PM-1 potentially inhibited the germination of P.oryzae.
Plants utilize cytochrome P450, a large superfamily of heme-containing mono-oxygenases, in the synthesis of lignins, UV protectants, pigments, defense compounds, fatty acids, hormones, and signaling molecules. Despite the overwhelming assortment of rice P450 accession numbers in the database, their functional studies are lacking. So far, there is no evidence involving rice P450 in disease immunity. Most of our understanding has been based on other plant systems that are mostly dicot. In this study, we isolated the cytochrome P450 (OsCYP71) in rice, and screened the gene using gain-of-function technique. The full-length cDNA of OsCYP71 was constitutively overexpressed using the 35S promoter. We then explored the functions of OsCYP71 in the rice - Xanthomonas oryzae pv. oryzae pathosystem. Using the gene expression assays, we demonstrate the interesting correlation of PR gene activation and the magnitude of resistance in P450-mediated immunity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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