• 제목/요약/키워드: optimal fertilization

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해수산 rotifer Brachionus rotundiformis의 유성생식유도에 관한 염분 및 기사용 배양수의 효과 (Effect of salinity and used medium on the induction of sexual reproduction in the rotifer Brachionus rotundiformis)

  • 이균우;심소명
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제17권4호
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    • pp.692-697
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    • 2016
  • 해수산 rotifer Brachionus rotundiformis의 내구란 대량생산을 위한 효과적인 유성생식자극요인을 구명하기 위해 염분자극과 기사용배양수의 효과를 9일 동안 조사하였다. 각 염분에 노출된 후 모든 실험구에서 배양 3일째부터 유성생식률이 증가하기 시작했으며 이후 배양 4-5일째 이후 감소하는 경향을 보였다. 내구란은 10‰, 15‰, 20‰, 25‰ 실험구에서 배양 4일째에 출현하였으며 특히 20, 25‰ 실험구는 배양 6일째 수정률이 각각 33.3%와 31.3%로 다른 실험구에 비해 높게 나타났다. 9일간 평균 유성생식률은 10‰와 20‰ 실험구에서 각각 25.3%와 20.2%로 높게 나타났다. 수정률은 25‰ 실험구에서 14.0%로 가장 높았다. 각 기사용배지농도에 노출된 후 모든 실험구의 유성생식률은 염분실험결과와 유사한 경향을 보였고 내구란은 0%과 25% 기사용배지에 노출되었을 때 만 출현하였다. 평균수정률은 모든 실험구가 차이를 보이지 않은 반면, 유성생식률은 25% 실험구가 22.3%로 대조구인 0%에 비해 높게 나타났다. 본 연구결과를 종합해보면, B. rotundiformis의 내구란 대량생산을 위한 효과적인 유성생식유발요인으로 기배양수자극보다 염분자극이 더 효과적이며 최적 염분은 비교적 높은 유성생식률과 수정률을 유도한 20-25‰로 판단된다. 본 연구결과는 차후 rotifer 내구란 대량생산을 위한 핵심적인 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

동결액 조성이 소 난자의 체외성숙, 발육능 및 생존성에 미치는 영향 (Effect of Different Cryoprotectants on the Viability, Maturation and Development of In Vitro Bovine Oocytes)

  • 류일선;양병철;연성홈;이동원;서국현;손동수;이병천;황우석
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.147-157
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    • 1998
  • This study was conducted to investigate the effects of in vitro fertilization, culture and embryo development according to in vitro maturation rate, protectant composition and equilibrium time after frozen /thawing of bovine immature oocytes. This results obtained in studies on the effect of different cryoprotectants on the viability, maturation and development of in vitro bovine oocytes were as follow: 1.The post-thawing of immature oocytes matured to metaphase II during culture time for 0 to 26 h, and those group (62~3%) were low than control group (76.7%). The optimal maturation time of frozen-thawed immature oocytes was at 24 h. 2.The viability of cryopreserved immature oocytes was not affected by sort of cryoprotectants. The developmental competence of frozen4hawed oocytes was not affected by cryoprotectants. These results indicate that an optimal maturation time of frozen /thawed immature oocytes was at 24h. Furthermore the viability of cryopreserved immature oocytes was not affected by sort of cryoprotectants and developmental competence of frozen /thawed oocytes.

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경북남부지방에서 콩과 사료작물의 혼파와 우분의 시용이 호밀의 생산성, 사료가치 및 단위면적당 유기한우 사육능력에 미치는 영향 (Effects of Mixed-Sowing of Legume and Applying of Cattle Manure on the Productivity, Feed Values and Organic Hanwoo Carrying Capacity of Rye in Southern Area of Gyeongbuk Province)

  • 황보순;최광원;정순미;조익환
    • 한국유기농업학회지
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    • 제23권3호
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    • pp.583-593
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    • 2015
  • 본 연구는 토양의 지력향상과 환경오염을 감소시키고, 안전한 유기축산물의 생산에 기여할 수 있는 유기조사료를 효율적으로 생산하기 위해 대표적인 동계사료작물인 호밀에 콩과 사료작물 혼파와 발효우분을 시용하여 생산성과 사료가치를 평가하고, 가축분뇨의 적정 시용수준을 구명하여 단위면적당 유기 한우의 사육 능력을 추정하고자 하였다. 조단백질 수량은 단파구(평균 353 kg/ha)보다 콩과사료작물 혼파구가(평균 760~786 kg/ha) 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 단파, 사료용 완두 혼파구는 무비구에 비해 질소시비 수준이 증가할수록 높아지는 경향을 보였다. 호밀에 콩과 사료작물 혼파에 따른 조단백질 함량은 단파구(평균 4.93%)보다 혼파구가(평균 8.29~9.90%) 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 질소 시비 수준에 따른 비교에서는 호밀 단파구의 경우 무비구 보다 50 kg N/ha구가 유의하게 높게 나타났다(p<0.05). TDN 함량은 호밀 단파구가 평균 46.86%로 콩과 사료작물 혼파구의 평균 49.96~50.12% 보다 낮은 경향이었고, 특히 질소시비 수준이 150 kg N/ha구에서는 사료용 완두 혼파구가 54.55%로 가장 높게 나타났다(p<0.05). 호밀의 사료가치에 따른 단위면적당 연간 유기가축 사육능력은 단파구(평균 2.26두) 보다 콩과 작물 혼파구가 3.72~4.12두로 유의하게 높은 사육능력을 보였다(p<0.05). 이상의 결과를 종합해 볼 때, 경북남부지역에서 유기 가축사육 능력 증대를 위한 호밀의 생산성과 사료가치 향상을 위해서는 콩과 사료작물의 혼파가 필요하며, 콩과작물 혼파와 함께 가축분뇨의 적정 시용수준 추정은 앞으로 추가 시험과 함께 조사가 더 필요하다고 사료된다.

한국 재래산양에서의 과배란유기와 외래유전자 주입에 적합한 수정란의 회수에 관한 연구 (Studies on the Superovulation and Collection of microinjectable Embryos in Korean Native Goats (Capra hircus aegagrus))

  • 윤우식;이철상;;방남수;구덕본;한용만;신상태;유욱준;박창식
    • 한국가축번식학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.373-379
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    • 1997
  • This study was carried out to determine the hormone treatment scheme for an efficient superovulation and optimal recovery time for obtaining pronuclear embryos suitable for DNA injection in Korean native goats. For a superovulation, FSH(5.6mg) was given over four days in twice daily injections with (FSH/hCG group) or without(FSH group) hCG(100 IU) co-injection at the time of 7th FSH injection. Estrus cycle was synchronized by norgestomet ear-implantation for 11 days and its removal at the time of 6th FSH injection. Among the treated goats, the percentage of ovulated goats, which were examined at 70 to 76 h following implant removal, was greater in FSH/hCG group than in FSH group (100% vs 36.4%) but there was no significant difference in the mean numbers of ovulation points and fertilization rates between the two groups. To optimize hCG treatment scheme and recovery time, we injected hCG at the time of 7th (FSH/hCGa) or 8th(FSH/hCGb) FSH injection and then examined the developmental stage of the embryos recovered at different times after implant removal. In FSH/hCGa group, significant portions(31 to 44%) were beyond 1-cell stage, which was non-injectable, irrespective of their recovery time. However, in FSH/hCGb group recovered at 70 to 76 h after implant removal, great portions(69%) were fertilized and most of them(96.6%) were injectable 1-cell stage. Considering together the fertilization rate and developmental stage of recovered embryos, it is recommendable to administrate hCG at the time of final 8th FSH injection and collect the embryos at 70 to 76 h after implant removal to obtain injectable embryos as many as possible in Korean native goats.

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남부 산간고랭지에서 쌀 품질 향상을 위한 적정 질소시비량 (Optimum N-fertilization Level for Quality Rice Production in the Southern Alpine Area of Korea)

  • 김상수;최원영;남정권;이준희;백남현;박홍규;최민규;김정곤
    • 한국작물학회지
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    • 제51권spc1호
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    • pp.30-34
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    • 2006
  • 남부 산간고랭지에서 고품질 쌀 생산을 위한 질소시비량을 구명하고자 $2002{\sim}2004$년에 남부 산간고랭지 인 운봉에서 삼천벼를 공시하여 질소시비량에 따른 생육, 수량구성요소, 쌀 수량 및 품질 관련형질을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 단위면적당 수수와 입수는 다비할수록 많았으나, 등숙비율과 현미천립중은 다비할수록 저하되었다. 2. 백미 외관상 품위에서 완전립 비율은 질소시비량이 많을수록 낮았고, 아밀로스 함량은 질소시비량 간에 별 차이가 없었으나, 단백질 함량은 질소시비량이 증가됨에 따라 다소 높아지는 경향이었다. 3. 쌀 수량과 완전미 수량은 질소 9 kg/10a 수준까지는 증수 되었으나 그 이상의 질소시비량에서는 수량 차이가 인정되지 않았다. 4. 따라서 남부 산간고랭지에서 완전미 수량, 완전미비율, 미질, 등숙비율 등을 고려한 품질향상을 위한 적정 질소시비량은 10a당 9 kg 내외로 판단된다.

Glucose가 소 초기배의 분할 및 발육에 미치는 영향 (Effects of Glucose on the Cleavage and Further Development of Early Bovine Embryos)

  • 노상호;이병천;황우석
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제12권2호
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    • pp.161-169
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    • 1997
  • This study was conducted to compare the insemination time of bovine oocytes and determine the effects of glucose(1.5 mM) on the development of bovine embryos at early cleavage stage. Oocytes were matured for 24 h, followed by exposure to sperm and cultured in modified Tyrode's media drops or with bovine oviduct epithelial cell monolayer prepared in TCM199(BOECM). Insemination time and culture system were varied in each experiment. In experiment 1, to investigate the developmental capacity of bovine embryos after different time of exposure to sperm, bovine ova and sperm were co-incubated for 18, 30 or 54 h, respectively. The development to blastocysts of 30 and 54 h insemination groups were significantly higher(P<0.05) than 18 h group, and in case of blastocysts of cleaved embryos, 30 h group were significantly higher(P<0.05) than other groups. In experiment 2, we investigated the effect of glucose on early bovine embryos. After 18 h insemination, in vitro fertilized oocytes were separated following 3 groups ; G+0, C+24 and C+48. Oocytes of G+0 group were cultured in glucose added Tyrode's medium after fertilization, oocytes in C+24 and C+48 groups were cultured in glucose free Tyrode's medium after fertilization. After 24 h culture, G+24 group was moved to glucose added medium. All oocytes of 3 groups were moved to BOECM after 48 h culture. The rates of cleavage and development to blastocysts in G+0 group were significantly lower than other groups. In experiment 3, we determined the effects of glucose exposure from 8 to 20 h after insemination on the cleavage and development of oocytes. The oocytes in glucose added group had high capacity of cleavage and further development. This study shows that in bovine oocytes, the optimal exposure to sperm is 30 h and glucose exposure to bovine one-cell embryos is detrimental to their first cleavage and further development in vitro but there has no evidence of detrimental effect of glucose(1.5 mM) exposure to bovine embryos over the two-cell stage in vitro.

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Effect of in vitro testicular spermatozoa culture on pregnancy outcomes: an experience at a single university hospital

  • Lee, Jisun;Yoo, Jung Hyeon;Lee, Jae Hun;Ahn, Hyun Soo;Hwang, Kyung Joo;Kim, Miran
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제38권1호
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    • pp.53-59
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    • 2021
  • Background: There are no guidelines for the optimal incubation time or temperature to improve pregnancy outcomes in testicular sperm extraction-intracytoplasmic sperm injection (TESE-ICSI) cycles. We aimed to evaluate whether a 24-hour in vitro culture of testicular spermatozoa affects pregnancy outcomes in TESE-ICSI cycles. Methods: This was a retrospective study of 83 TESE-ICSI cycles using testicular spermatozoa in 46 couples with male partners suffering from nonobstructive or obstructive azoospermia. Sperm retrieval was performed either on the oocyte retrieval (OR) day (65 cycles in 33 couples; group A) or on the day before OR (18 cycles in 13 couples; group B) followed by in vitro culture for 24 hours. The clinical characteristics and pregnancy outcomes, including the number of retrieved oocytes, fertilization rates, embryo transfer rates, implantation and clinical pregnancy rates, were compared between the two groups. Results: There were no differences in terms of clinical characteristics except for the levels of luteinizing hormone (LH) in males. Group B had higher LH levels than group A (4.56±1.24 IU/L vs. 3.67±1.07 IU/L, p= 0.017). Group B showed higher fertilization rate (72.4%±32.1% vs. 59.2%±21.7%, p=0.045), implantation rate (35.0%±34.1% vs. 14.0%±21.5%, p=0.010), pregnancy rate per cycle (80% vs. 39%, p=0.033), and clinical pregnancy rate per cycle (80% vs. 37.5%, p=0.024) than those of group A. Conclusion: Testicular sperm retrieval performed on the day before OR followed by in vitro culture can potentially improve pregnancy outcomes.

돼지 난자의 체외 수정에 있어서 난구 세포의 존재가 정자 침투율 및 배 발육에 미치는 영향 (Presence of Intact Cumulus Cells during In Vitro Fertilization Inhibits Sperm Penetration but Improves Blastocyst Formation In Vitro)

  • 용환율;이은송
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.1-7
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    • 2007
  • 본 연구는 체외 성숙된 난자와 동결 융해 정자를 이용한 돼지의 체외 수정 과정에서 난구 세포의 존재가 정자 침투율, 웅성전핵 형성률 그리고 후기배로의 체외 발육에 미치는 영향을 알아보기 위하여 수행되었다. 돼지 난소로부터 난자-난구세포 복합체를 채취하여 eCG/hCG, 10% 돼지 난포액, epidermal growth factor 등이 첨가된 TCM 199 배양액에서 44시간 배양하여 체외 성숙을 유도하였다. 성숙 배양 후 난구 세포를 제거한 난자와 난구 세포가 부착되어 있는 난자를 돼지 동결 융해정액을 이용하여 5mM caffeine과 10mM calcium chloride를 함유한 mTBM배양액에서 8시간 체외 수정하였다. 체외 수정 후 난자를 고정, 염색하여 정자 침투율과 웅성전핵 형성률을 조사하였고(실험 $1{\sim}3$) 일부 수정란을 North Carolina State University-23 배양액에서 체외 수정 후 156시간 배양하여 후기배로의 발육능을 검토하였다(실험 3). 실험 1에서는 정자 농도를 $7.5{\times}10^5/ml$로 조정하여 나화 난자와 난구 세포 부착난자에서 정자 침투율 및 웅성전핵 형성률을 조사하였다. 실험 2에서는 난구 세포 부착 난자의 체외 수정에 적합한 정자 농도를 구하기 위해 2, 3, 4, 및 $5{\times}10^6/ml$의 농도로 난자를 수정한 후 정자 침투율 및 웅성전핵 형성률을 조사하였다. 실험 3에서는 나화 난자 및 난구 세포 부착 난자를 각각 $7.5{\times}10^5/ml$의 정자 농도로 체외 수정한 후 후기배로의 발육률을 조사하였다. 실험 1의 결과 정자 침투율은 나화 난자에 비해 난구 세포 부착 난자에서 유의적으로 감소되었다(35.2% vs. 77.4%; p<0.01). 실험 2에서 다양한 정자 농도에 의한 정자 침투율과 정상 수정률을 바탕으로 판단했을 때 $4.6{\times}10^6/ml$의 정자 농도가 다른 정자 농도에 비해 난구 세포부착 난자의 체외 수정에 적합한 것으로 나타났다. 체외 수정과정에서 난구 세포 부착된 상태로 수정된 난자는 나화 난자에 비해 유의적으로(p<0.05) 높은 분할률(48.8% vs. 58.9%), 배반포 형성률(11.0% vs. 22.8%)과 배반포 세포수$(22{\pm}2\;vs.\;29{\pm}2)$를 나타내었다. 본 연구의 결과로부터 돼지의 체외 수정과정에서 난구 세포의 존재는 정자 침투를 저해하지만 분할률, 배반포 형성률 및 배반포의 세포수를 증가시키는 것으로 사료된다.

콩의 MSM (Methyl Sulfonyl Methane) 처리 방법에 관한 연구 (Studies on the MSM (Methyl Sulfonyl Methane) Treatment Method of Soybeans)

  • 채세은;오승가;조영손;심두보;윤동경;전승호
    • 한국작물학회지
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    • 제69권1호
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    • pp.25-33
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    • 2024
  • 본 연구는 콩 재배시 최적 MSM 농도설정을 위한 MSM 처리 방법에 따른 콩의 생육, 수량 및 품위 특성을 알아보았다. 1. 2022년 생육 특성 조사에서는 처리 농도가 50%~200%로 증가함에 따라 생육 특성인 초장, 경태 및 분지수가 증가하는 경향을 보였고, 이에 수량구성요소 및 수량에서도 같은 경향으로 농도가 가장 높았던 기비+추비3회 200% 처리구에서 협수가 가장 많아, 수량 또한 355 kg·10a-1로 가장 많았다. 2. MSM 처리 농도 200% 이상의 최적 농도설정을 위한 연구에서의 생육 특성은 초장 및 분지수에서 400% > 200% > 800% 경향이 나타났으며, 기비+추비3회 400% 처리구에서 각각 106.7 cm, 6개로 가장 길고, 많았다. 3. 종실 품위에서도 기비+추비3회 400% 처리구가 종실 직경 6.7 mm 이상의 비율이 66.9%로 가장 높게 나타났다. 4. 수량구성요소인 협수, 입수 및 백립중에서도 같은 경향으로 기비+추비3회 400% 처리구에서 각각 90.0개, 1.95개 23.0g으로 가장 많고, 무거웠으며 종실 수량 또한 374 kg·10a-1로 가장 많아 무처리구 대비 최대 23.4% 증수하였다. 5. 따라서, 콩의 고품질 안정생산 재배를 위한 MSM 최적 처리 방법으로는 400% 농도로 기비 후, 수확 전 30일 간격으로 추비 3회 처리하는 것이 가장 유리할 것으로 판단된다.

체외수정시술을 위한 과배란유도에 있어 GnRH Antagonist의 임상적 효용성과 혈중 호르몬 농도의 변화 (Clinical Efficacy and Hormonal Change of GnRH Antagonist in Controlled Ovarian Stimulation for IVF-ET)

  • 문신용;천은경;김상돈;최영식;지병철;구승엽;서창석;최영민;김정구;김석현
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제31권4호
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    • pp.225-234
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    • 2004
  • Objectives: To evaluate the efficacy of GnRH antagonist cetrorelix in women undergoing controlled ovarian hyperstimulation (COH) for in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) and to determine changes in serum hormone concentrations during cetrorelix administration. Methods: We performed a clinical trial on 30 patients undergoing COH with highly purified follicular stimulating hormone (HP-FSH) and gonadotropin releasing hormone antagonist (GnRHant), cetrorelix. FSH was administrated from day 2 or 3 of cycle with fixed dose and adjusted according to individual response. 0.25 mg of cetrorelix was injected daily subcutaneously from stimulation day 5 until the day of hCG administration. Daily ultrasound monitoring was performed for growing follicles and serum levels of luteinizing hormone (LH), estradiol ($E_2$) and progesterone were measured daily during cetrorelix administration. Up to 4 embryos were transferred. Results: Mean age of enrolled patients was $32.0{\pm}3.4$ years (mean $\pm$ S.D.). All of 30 patients underwent oocyte pick-up, and embryo transfer was done in 28 patients. The total and mean numbers of received oocytes were 196 and $6.5{\pm}4.7$, the number of fertilized eggs was 111, and the fertilization rate was 56.6%. Total duration of FSH administration was $9.2{\pm}2.2$ days and mean of $24.3{\pm}7.7$ ampules of HP-FSH was administered. Total duration of cetrorelix administration was $5.7{\pm}1.9$ days. Serum LH and progesterone levels were maintained in the range of $1.4{\sim}2.9\;mIU/mL$ and $0.3{\sim}0.6\;ng/mL$, which respectively reflected effective prevention of premature LH surge. Clinical pregnancies were achieved in 9 patients, and overall clinical pregnancy rate was 30.0% per oocyte retrieval, and 32.1% per embryo transfer. Conclusion: GnRH antagonist is safe and convenient for COH for IVF-ET and effective with optimal pregnancy rate.