Mycoplasma ovipneumoniae (Mo) is difficult to culture, resulting in many difficulties in related research and application. Since nucleotide metabolism is a basic metabolism affects growth, this study conducted a "point-to-point" comparison of the corresponding growth phases between the Mo NM151 strain and the Mycoplasma mycoides subsp. capri (Mmc) PG3 strain. The results showed that the largest difference in nucleotide metabolism was found in the stationary phase. Nucleotide synthesis in PG3 was mostly de novo, while nucleotide synthesis in NM151 was primarily based on salvage synthesis. Compared with PG3, the missing reactions of NM151 referred to the synthesis of deoxythymine monophosphate. We proposed and validated a culture medium with added serine to fill this gap and prolong the stationary phase of NM151. This solved the problem of the fast death of Mo, which is significant for related research and application.
We have determined the complete chloroplast genome of Erigeron Canadensis isolated in Korea. The circular chloroplast genome of E. canadensis is 152,767 bp long and has four subregions: 84,317 bp of large single-copy and 18,446 bp of small single-copy regions are separated by 25,004 bp of inverted repeat regions including 133 genes (88 protein-coding genes, eight rRNAs, and 37 tRNAs). The chloroplast genome isolated in Korea differs from the Chinese isolate by 103 single-nucleotide polymorphisms (SNPs) and 47 insertions and deletion (INDEL) regions, suggesting different invasion sources of E. canadensis in Korea and China. A nucleotide diversity analysis revealed that the trend of the nucleotide diversity of E. canadensis followed that of 11 Erigeron chloroplasts, except for three peaks. The phylogenetic tree showed that our E. canadensis chloroplast is clustered with E. canadensis reported from China. Erigeron canadensis can be a good target when attempting to understand genetic diversity of invasive species.
The liverwort Pellia borealis is a diploid, monoecious, allopolypliod species (n=18) that as it was postulated, originated after hybridization and duplication of chromosome sets of two cryptic species: Pellia epiphylta-species N (n=9) and Pellia epiphylla-species 5 (n=9). Our recent results have supported the allopolyploid origin of P.borealis. We have shown that the nuclear genome of P.borealis consists of two nuclear genomes: one derived from P.epiphylla-species N and the other from P.epiphylla-species 5. In this paper we show the origin of chloroplast and mitochondrial genomes in an allopolyploid species P.borealis. To our knowledge there is no information concerning the way of mitochondria and chloroplast inheritance in Brophyta. Using an allopolyploid species of p. borealis as a model species we have decided to look into chloroplast and mitochondrial genomes of P.borealis, P.epiphylla-species N and P.epiphylla-species S for nucleotide sequences that would allow us to differentiate between both cryptic species and to identify the origin of organelle genomes in the alloploid species. We have amplified and sequenced a chloroplast $tRNA^{Leu}$ gene (anticodon UAA) containing an intron that has shown to be highly variable in a nucleotide sequence and used for plant population genetics. Unfortunately these sequences were identical in all three liverwort species tested. The analysis of the nucleotide sequence of chloroplast, an intron containing $tRNA^{Gly}$ (anticodon UCC) genes, gave expected results: the intron nucleotide sequence was identical in the case of both P.borealis and P.epiphyllaspecies N, while the sequence obtained from P.epiphyllasperies S was different in several nucleotide positions. These results were confirmed by the nucleotide sequence of another chloroplast molecular marker the chloroplast, an intron-contaning $tRNA^{Lys}$ gene (anticodon UUU). We have also sequenced mitochondrial, an intron-containing $tRNA^{Ser}$ gene (anticodon GCU) in all three liverwort species. In this case we found that, as in the case of the chloroplast genome, P.borealis mitochondrial genome was inherited from P.epiphylla-species N. On the basis of our results we claim that both organelle genomes of P.borealis derived from P.epiphylla-species N.
Using internal transcribed spacer 1 (ITS1) region ribosomal DNA sequences from 9 strains of Microsporum canis and 5 strains of Microsporum gypseum isolated from dogs and a cat with dermatophytosis, we demonstrated the mutual phylogenetic relationship of these strains. Nucleotide sequence analysis of the ITS 1 gene fragments from the 9 strains of M canis had the 100% nucleotide sequence similarities and the 5 strains of M gypseum also had the 100% nucleotide sequence similarities. The phylogenetic analysis of the nucleotide sequences of the 9 strains of M canis formed a nested cluster with the reference strains of M canis originating from USA, Australia, Japan, and Europe. M canis were genetically distinct from the other reference strains of Microsporum spp, but M distortum, M equinum, and M. ferrugineum were genetically very close to M canis. M gypseum from a cluster in the phylogenetic tree with M canis as an outgroup. The molecular analysis of ITS 1 genes provided the useful information for the identification of these microsporum species and the understanding of their relationship.
Babesia bovis rap-1 and B equi ema-1 intergenic(IG) nucleotides were analyzed and compared for identifying putative promoter sites using computer programs. The reason to initiate this research was to determine if IG nucleotides of Babesia genes that are predicted to be involved in erythrocyte invasion have functions regulating gene transcription and translation, which can be applied to functional gene knockout. Four IG sequences used included BbIG5(B bovis rap-1 5' IG), BblG3(B bovis rap-1 3' IG), BeIG5(B equi ema-1 5' IG) and BeIG3(B equi ema-1 3' IG). BbIG5 contained a putative promoter at nucleotide 197-246 with a predicted TATA-box and a transcription start site. BbIG3 had a putative promoter at nucleotide 270-320 with two predicted TATA-boxes and a transcription start site. BeIG3 had a putative promoter at nucleotide 155-205 with a predicted TATA-box and a transcription start site. Putative promoter sites in these three sequences mentioned above were identified with score cutoff 0.8, which means detection of about 40% recognized promoters with 0.1-0.4% false positives. In contrast, BeIG5 had a putative promoter at nucleotide 163-213 with score cutoff 0.8, but neither TATA-box nor transcription start site were recognized. However, BeIG5 had a putative promoter at nucleotide 388-438 with a predicted TATA-box and a transcription start site when score cutoff was decreased to 0.18, which means detection of about 70% recognized promoters with 2.2-5.3% false positives. These sequences with putative promoters can be tested if they have functions regulating gene transcription and translation.
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2012.05a
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pp.913-915
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2012
RNA polymerase beta subunit gene (rpoB) mutation of rifampin-resistant Mycobacteria was analyzed using nucleotide sequence of rpoB DNA (351 bp) containing rifampin resistant region, $rif^r$. For this purpose, we collected rifampin-resistant Mycobacteria that were identified by conventional culture method from Masan National Hospital and The Korean Institute of Tuberculosis and performed analysis of nucleotide sequence of rpoB of them. We found various mutations of rpoB linked rifampin resistant gene from rifampin-resistant Mycobacteria. From this study, we identified mutations of different codons from codons that have been reported recently.
Synonymous sites are generally considered to be functionally neutral. However, there are recent contradictory findings suggesting that synonymous alleles might have functional roles in various molecular aspects. For instance, a recent study demonstrated that synonymous single nucleotide polymorphisms have a similar effect size as nonsynonymous single nucleotide polymorphisms in human disease association studies. Researchers have recognized synonymous codon usage bias (SCUB) in the genomes of almost all species and have investigated whether SCUB is due to random nucleotide compositional bias or to natural selection of any functional exposure generated by synonymous mutations. One of the most prominent observations on the non-neutrality of synonymous codons is the correlation between SCUB and levels of gene expression, such that highly expressed genes tend to have a higher preference toward so-called optimal codons than lowly expressed genes. In relation, it is known that amounts of cognate tRNAs that bind to optimal codons are significantly higher than the amounts of cognate tRNAs that bind to non-optimal codons in genomes. In the present paper, we review various functions that synonymous codons might have other than regulating expression levels.
The nucleotide sequence of the estI gene encoding acetylxylan esterase I of Bacillus stearothermophilus was determined and analyzed. The estI gene was found to consist of a 810 base pair open reading frame coding for a polypeptide of 270 amino acids with a deduced molecular weight of 30 kDa. This was in well agreement with the molecular weight (29 kDa) estimated by SDS-PAGE of the purified esterase. The coding sequence was preceded by a putative ribo some binding site 10 bp upsteam of the ATG codon. Further 53 bp upstream, the transcription initiation signals were identified. The putative $_{-}$10 sequence (TCCAAT) and $_{-}$35 seqence (TTGAAT) corresponded closely to the respective consensus sequences for the Bacillus subtiis major RNA polymerase. The G+C content of the coding region of the estI was 51% whereas that of the third position of codone was 60.2%. The N-terminal amino acid sequence of the EstI deduced from the nucleotide sequence perfectly matched the corresponding region of the purified esterase described previously. Comparison with the amino acid sequence of other esterases and lipases reported so far allowed us to identify a sequence, GLSMG at positions 123 to 127 of the EstI which was reported to be the highly conserved active site sequence for those enzymes. The nucleotide sequence of the estI revealed 55.7% homology to that of the xylC coding for the acetylxylan esterase of Caldocellum saccharolyticum.
The RNA nucleotide sequences of the 3/-noncoding regions (3'-NCRs) of two Korean strains of turnip mosaic virus (TuMV), Ca and cqs, have been determined from their cDNA clones that encompassed the 3'-terminal regions of the viral genomic RNAs. The 3'-NCRs of both strains were 209 nucleotides long, terminated with GAC residues and poly (A) tails. The potential polyadenylational signal motif, UAUGU, was located 140 nucleotides upstream from the poly (A) tail in each of the virus. A highly conserved hexanucleotide sequence [A G U G A/U G/C], which was common in the 3'-NCRs of the potyvirus RNAs, was also found at the regions of 119 bases upstream from the 3'-end. Comparison of the 3'-NCRs of the two Korean isolates with those of four strains from Canada, China and Japan showed significantly identical genotypes (94.3∼99.5%). The secondary structure of three loops with long stems was found within the 3'-NCRs by sequence analysis. The substituted bases in the region among the six TuMV strains did not alter their secondary structures. Length of the 3'-NCRs of the know 11 potyviral RNAs and TuMV RNAs was different from one another and their nucleotide sequences showed 55.7% to 24.0% of homology. The 3'-NCR, therefore, is considered to be useful for phylogenetic studies in potyviruses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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