본 연구에서 Pleurotus ostreatus No.42는 이전에 보고된 새로운 유형의 회전식 통풍관 생물반응기(RTB)를 사용하여 포도당-펩톤-효모-밀기울(GPYW) 배지에서 배양하였다. 이 배지에서 7일 동안 펠렛형 균사체 배양 후, 리그닌 분해효소인 다목적 과산화 효소(VP)를 분리 및 정제하였다. 다목적 과산화 효소의 정제 과정은 한외여과, DEAE-Sepharose CL-6B 컬럼, Mono Q 컬럼을 순차적으로 적용하여 정제하였다. 그 결과, SDS-PAGE상에서 분자량(MW)은 36.4 KDa, 등전점 (IEF)은 3.65로 나타났으며, 아미노산 조성은 VTCATGQTT로 확인되었다. 정제된 다목적 과산화 효소는 Mn 이온을 산화시킬 뿐만 아니라 비페놀성 화합물인 베라트릴 알코올을 분해하는 특성을 갖는 것으로 나타났다.
An advanced anaerobic expanded granular sludge bed (AnaEG) and an internal circulation (IC) reactor, which were adopted to treat starch processing wastewater (SPW) and ethanol processing wastewater (EPW), were comprehensively analyzed to determine the key factors that affected the granules and microbial communities in the bioreactors. The granule size of $900{\mu}m$ in the AnaEG reactor was smaller than that in the IC reactor, and the internal and external morphological structures of the granular sludge were also significantly different between the two types of reactors. The biodiversity, which was higher in the AnaEG reactor, was mainly affected by reactor type. However, the specific microbial community structure was determined by the type of wastewater. Furthermore, the dominant methanogens of EPW were mainly Methanosaeta and Methanobacterium, but only Methanosaeta was a major constituent in SPW. Compared with the IC reactor, characteristics common to the AnaEG reactor were smaller granules, higher biodiversity and larger proportion of unknown species. The comparison of characteristics between these two reactors not only aids in understanding the novel AnaEG reactor type, but also elucidates the effects of reactor type and wastewater type on the microbial community and sludge structure. This information would be helpful in the application of the novel AnaEG reactor.
Marine sponges are a rich source of highly diversified bioactive compounds. These medicinally valuable molecules represent extreme physiological and ecological functions in sponges, more presumably involving in the resistance to the feeding by other marine organisms like fish and fouling by barnacles, bacteria, fungi, etc. This feature of attaining resistance made sponges as successful poriferans that possess an impressive array of biological properties ranging from antimicrobial to anticancerous activities. The diversified bioactive principle of sponges might be due to their spacio-temporal distribution and although, the gateway for exploiting the sponges for isolating these distinct, potential molecules is open, suitable technical and methodological approaches are yet to be implemented in order to bring the sponges as successful pharmaceutical leads in the field of marine biotechnology. Despite of the identified difficulties of marine sponge research from past few decades, one should concentrate not only on the basic and applied technical/methodological considerations, but also on the novel strategies like in vitro sponge cell, fragment and whole sponge culture; sponge symbiont cell culture; in situ and ex situ sponge cultivation; and sponge bioreactors and metagenomic approaches, for the successful exploitation of marine sponges towards the novelty in sponge biotechnology. The present review narrates the pros and cons of the nowadays-marine sponge research by focusing on the suggestive ecobiotechnological approaches, based on the latest studies for feasible ecological exploitation and biotechnological application of sponges from the sea.
Phenol is frequently present as the hazardous pollutant in petrochemical and pesticide industry wastewater. Because of its high toxicity and carcinogenic potential, a proper treatment is needed to reduce the hazards of phenol carrying effluent before being discharged into the environment. Phenol biodegradation with microbial consortium offers a very promising approach now a day's. This study focused on the formulation of phenol degrading bacterial consortium with three bacterial isolates. The bacterial strains Bacillus cereus strain VCRC B540, Bacillus cereus strain BRL02-43 and Oxalobacteraceae strain CC11D were isolated from detergent contaminated soil by soil enrichment technique and was identified by 16s rDNA sequence analysis. Individual cultures were degrade 100 μl phenol in 72 hrs. The formulated bacterial consortium was very effective in degrading 250 μl of phenol at a pH 7 with in 48 hrs. The study further focused on the analysis of the products of biodegradation with Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FT/IR) and Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS). The analysis showed the complete degradation of phenol and the production of Benzene di-carboxylic acid mono (2-ethylhexyl) ester and Ethane 1,2- Diethoxy- as metabolic intermediates. Biodegradation with the aid of microorganisms is a potential approach in terms of cost-effectiveness and elimination of secondary pollutions. The present study established the efficiency of bacterial consortium to degrade phenol. Optimization of biodegradation conditions and construction of a bioreactor can be further exploited for large scale industrial applications.
The present work presents a novel approach for the dynamic quantification of respiration rates on a small scale by using lysine-producing Corynebacterium glutamicum ATCC 21253. Cells sampeld from batch cultures at different times were incubated ina 12-ml scale bioreactor equipped with a membrane mass spectrometer. Under dynamic conditions, gas exchange across the gas-liquid phase, specific respiration rates, and RQ values were precisely measured. For this purpose, suitable mass balances were formulated. The transport coefficients for $O_2$ and $CO_2$, crucial for calculating the respiration activity, were determined as $k_La_{O2}=9.18h^{-1}$ and $k_La_{CO2}=5.10h^{-1}$ at 400 rpm. The application of the proposed method to batch cultures of C. glutamicum ATCC 21253 revealed the maximum specific respiration rates of $q_{O2}=8.4\;mmol\;g^{-1}h^{-1}\;and\;q_{CO2}=8.7\;mmol\;g^{-1}h^{-1}$ in the middle of the exponential growth phase after 5 h of cultivation. When the cells changed from growth to lysine production due to the depletion of the essential amino acids theonine, methionine, and leucine, $q_{O2}\;and\;q_{CO2}$ decreased significantly and RQ increased. The respiration data exhibited an excellent agreement with previous cultivations of the strain [13]. This confirms the potential of the developed approach to realistically reflect the metabolic activities of cells at their point of sampling. The short-term influence of added threonine, methionine, and leucine was highest during the shift from growth to lysine production, where $q_{O2}\;and\;q_{CO2}$ increased 50% within one minute after the pulse addition of these compounds. Non-growing, yet lysine-producing cells taken from the end of the batch cultivation revealed no metabolic stimulation with the addition of threonine, methionine, and leucine.
형질전환 가금의 생산은 생체반응기(Bioreactor)가금에 의한 고부가가치의 생의약 물질을 저비용, 고효율로 생산할 수 있으며, 배 발달과정 및 유전자 조절기작 규명을 통한 학문적 이용성 등 다양한 분야에 응용될 수 있다. 형질전환 가금을 생산하기 위한 방법 중 닭의 배 발생 초기에 발생하는 성세포(정자 혹은 난자)의 전구세포인 원시생식세포를 이용한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 그러나 이를 검증할 원시생식세포 특이적 마커의 부재로 많은 어려움을 겪고 있다. 따라서 본 연구는 원시생식세포의 특성 분석을 위해 PAS(Periodic acid-Schiff) 염색 및 특이항체 (SSEA-1,3,4 & Integrins $\alpha$6, $\beta$l) 그리고 lectins (STA, DBA, ConA, WGA)를 이용하였다. 이번 연구결과를 통한 닭 원시생식세포의 특이적 마커의 개발은 원시생식세포를 이용한 가금의 형질전환 연구에 기여할 것이다.
Xu, Zhaoxian;Cao, Changhong;Sun, Zhuzhen;Li, Sha;Xu, Zheng;Feng, Xiaohai;Xu, Hong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권11호
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pp.1819-1826
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2015
Poly(ε-ʟ-lysine) (ε-PL) is a novel bioactive polymer secreted by filamentous bacteria. Owing to lack of a genetic system for most ε-PL-producing strains, very little research on enhancing ε-PL biosynthesis by genetic manipulation has been reported. In this study, an effective genetic system was established via intergeneric conjugal transfer for Streptomyces albulus PD-1, a famous ε-PL-producing strain. Using the established genetic system, the Vitreoscilla hemoglobin (VHb) gene was integrated into the chromosome of S. albulus PD-1 to alleviate oxygen limitation and to enhance the biosynthesis of ε-PL in submerged fermentation. Ultimately, the production of ε-PL increased from 22.7 g/l to 34.2 g/l after fed-batch culture in a 5 L bioreactor. Determination of the oxygen uptake rate, transcriptional level of ε-PL synthetase gene, and ATP level unveiled that the expression of VHb in S. albulus PD-1 enhanced ε-PL biosynthesis by improving respiration and ATP supply. To the best of our knowledge, this is the first report on enhancing ε-PL production by chromosomal integration of the VHb gene in an ε-PL-producing strain, and it will open a new avenue for ε-PL production.
Glucoamylase is an important industrial enzyme. Glucoamylase production by industrial Aspergillus niger strain featured with two major problems: (i) empirical substrate feeding methods deteriorating the fermentation performance; and (ii) the high raw materials cost limiting the economics of the glucoamylase product with delegated specification. In this study, we first proposed a novel three-stage varied-rate substrate feeding strategy for efficient glucoamylase production in a 5 L bioreactor using the standard feeding medium, by comparing the changing patterns of the important physiological parameters such as DO, OUR, RQ, etc., when using different substrate feeding strategies. With this strategy, the glucoamylase activity and productivity reached higher levels of 11,000 U/ml and 84.6 U/ml/h, respectively. The performance enhancement in this case was beneficial from the following results: DO and OUR could be controlled at the higher levels (30%, 43.83 mmol/l/h), while RQ was maintained at a stable/lower level of 0.60 simultaneously throughout the fed-batch phase. Based on this three-stage varied-rate substrate feeding strategy, we further evaluated the economics of using alternative carbon sources, attempting to reduce the raw materials cost. The results revealed that cornstarch hydrolysate could be considered as the best carbon source to replace the standard and expensive feeding medium. In this case, the production cost of the glucoamylase with delegated specification (5,000 U/ml) could be saved by more than 61% while the product quality be ensured simultaneously. The proposed strategy showed application potential in improving the economics of industrial glucoamylase production.
본 연구는 산기관(diffuser) 형태로 운전되는 중공사막 생물반응기(Hollow Fiber Membrane Diffuser) 시스템을 복합오염물질(benzene, toluene, p-xylene, BTX)처리에 적용해 보고, 생물반응기에 의한 각 물질의 생분해 특성을 평가하기 위하여 수행되었다. 우선 toluene을 단일오염물질로 적용한 예비 실험기간 동안에 75%수준의 안정적인 처리 효율을 확인할 수 있었다. 이후 BTX 복합오염물질을 적용한 본 실험기간 동안에도 별도의 적응기간 및 악영향 없이 70%수준의 처리효율을 얻어낼 수 있었다. 이를 통하여 toluene분해 미생물의 benzene, p-xylene의 분해 능력을 확인하였으며, toluene의 경우 복합오염물질 적용 시 다른 두 물질에 의해 소폭의 분해 저해가 발생하는 것을 알 수 있었다. 또한 분해능 실험에서 측정한 생물반응기의 BTX 분해능은 약 360 $g/m^3/hr$이었으며, 이는 기존의 생물여과공법에 제시된 최대분해능보다 높은 우수한 분해능이었다. 따라서 산기관 형태의 중공사막 생물반응기는 복합오염물질 처리에도 안정적인 운전특성을 나타내었으며, 기존의 VOCs 저감기술을 대체할 수 있는 친환경적인 기술이라고 판단된다.
Kim Myung Kyum;Im Wan Taek;Ohta Hiroyuki;Lee Myung Jin;Lee Sung Taik
Journal of Microbiology
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제43권2호
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pp.152-157
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2005
Strain Kw07$^T$, a Gram-negative, non-spore-forming, rod-shaped bacterium, was isolated from granules in an Up-flow Anaerobic Sludge Blanket (UASB) bioreactor used in the treatment of brewery wastewater. 16S rRNA gene sequence analysis revealed that strain Kw07T belongs to the a-4 subclass of the Proteobacteria, and the highest degree of sequence similarity was determined to be to Sphingopyxis macrogoltabida IFO 15033T (97.8%). Chemotaxonomic data revealed that strain Kw07T possesses a quinone system with the predominant compound Q-I0, the predominant fatty acid C,s:, OJ7c, and sphingolipids, aU of which corroborated our assignment ofthe strain to the Sphingopyxis genus. The results of DNA-DNA hybridization and physiological and biochemical tests clearly demonstrated that strain Kw07T represents a distinct species. Based on these data, Kw07T (= KCTC 12209T = NBRC 100800T) should be classified as the type strain for a novel Sphingopyxis species, for which the name Sphingopyxis granuli sp. novo has been proposed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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