• 한국동물학회지
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• 제39권1호
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• pp.12-20
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• 1996

K562 적혈구암 세포는 phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)에 의해서 대핵세포로 분화되고 gpIlla의 증가, megakaryocyte와 유사한 형태학적 변화로 특징지워진다. 또한 K562 세포는 dimethy1 sulfoxide(DMSO)나 butyrate와 같은 화학적 유도원에 의해 적혈구로 분화가 유도되고 동시에 헤모글로빈이 축척된다. 본 연구에서는 K562 세포에 대한 단일클론 항체를 생성하고 이를 이용하고 61 KDa의 표면항원을 동정하였다. 단클론항체 EK-2에 의해 인지되는 61 KDa의 표면항원은 sialic acide가 풍부해 당단백질로 사료되고, 그 epitope는 neuraminidase 절단과 peroxidase oxidation에 민감하며, 열처리에는 안정하다. K562 세포의 대핵세포로 분화시에는 61 KDa 표면항원의 발현은 증가하며, 적혈구로 분회시에는 그 발현이 감소한다. EK-2 단클론항체는 조혈세포의 분화 및 암화과정의 분자적 수준을 연구하기 위한 면역학적 probe로 이용 가능할 것으로 기대된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제37권1호
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• pp.33-41
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• 2009

알래스카산 낙엽진흙버섯[Porodaedalea pini (Brot.) Murrill] (syn. Phellinus pini)의 자실체 조분쇄물로부터 $100^{\circ}C$에서 4시간 추출하여 건량 수율 20.5%의 건조 분말 열수추출물을 제조하여, HeLa 세포에서 CVB3에 대한 항바이러스 활성을 조사한 결과 plaque 형성을 현저히 억제하였다. 또한, 다른 여러 가지 버섯 추출물에 비해 neuraminidase 활성 저해능이 가장 높았다. 열수 추출물로부터 75% 에탄올 침전으로 건량 수율 28.3%의 저분자 상등액 건조물(ES)과 수율 43.3%의 고분자 침전물 건조물(EP)을 얻었다. 상등액인 ES에서는 항바이러스 활성이 없었지만, 침전물인 EP는 HeLa 세포에서 CVB3바이러스에 대해 농도 의존적으로 plaque 형성을 현저히 억제하였고, $EC_{50}$은 0.45 mg/mL 이었으며, HeLa 세포에 대한 세포독성 $CC_{50}$은 2.25mg/mL 이었다. 또한, EP는 neureminidase 활성을 농도 의존적으로 저해하였으며, 1.7mg/mL에서 약 75%의 효소활성 억제효과를 보였다. 이러한 결과는 낙엽진흙버섯 자실체의 별수추출물로부터 얻어진 에탄을 침전물 EP가 CVB3 뿐만 아니라, influenza virus(Flu)등에 대해서도 광범위하게 항바이러스 활성을 나타낼 가능성을 보여 주었다. EP는 다당류로서 glucose의 함량이 79.8%로 가장 높았고 galactose, xylose, mannose와 fucose를 소량 포함한 수용성 heteroglycan의 일종으로, 소량(12.7%, w/w)의 단백질 또는 작은 펩타이드를 함유한 당단백의 일종일 것으로 사료된다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제7권1호
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• pp.83-93
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• 2000

목 적 : Urabe AM-9 볼거리 백신주는 무균성 뇌막염의 발생 빈도가 높은 것으로 알려져 있다. 백신 접종 후 무균성 뇌막염을 일으키는 경우 Urabe AM-9 백신주의 hemagglutinin-neuraminidase(HN) 유전자의 염기서열 1081번의 G가 A로 치환되어 335번째 아미노산이 glutamic acid에서 lysine으로 바뀌게 됨에 따라 야생형의 mumps 바이러스와 동일한 작용을 나타내는 것으로 알려져 있다. 이에 국내에서 사용중인 Urabe AM-9 백신주의 안전성 여부를 조사하기 위해 일부 백신주와 야생 분리주의 HN 유전자의 염기서열 분석을 실시하였다. 방 법 : 국내에서 사용되고있는 Urabe AM-9주 백신 2종류와 1998~1999년에 볼거리 환자로부터 분리된 야생 분리주를 이용하여 RT-PCR 방법에 의해 HN 유전자를 증폭시킨 후 염기 및 아미노산 서열 분석을 실시하였다. 결 과 : 백신주와 야생 분리주 모두 HN 343, 1476, 1570번 위치에서의 염기 변이는 없었으나 1081번 위치 염기는 모두 야생주와 같은 Lysine/AAA form으로 나타났으며 변이주인 Glutamic acid/GAA와의 혼합 양상은 관찰되지 않았다. HN 1470번 위치의 염기는 백신주 중 계대 배양시 C에서 A로 치환되었으며, HN 1727번 위치 염기는 모두 A에서 G로 치환된 것으로 나타났다. 결 론 : 국내에서 사용중인 2종류의 Urabe AM-9 백신주와 야생 분리주 모두 1081번 위치의 염기가 야생주와 같은 무균성 뇌막염을 일으킬 생물학적 가능성이 있는 것으로 나타났으며, 국내에서도 상기 백신주를 사용한 후 무균성 뇌막염이 발생하고 있을 개연성이 매우 크다고 사료되며 직접적인 연관성에 대한 보완 연구를 위하여 정확하고 믿을만한 자료에 의한 실제 부작용 실태를 파악하여야 한다.

• 대한수의사회지
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• 제17권2호
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• pp.33-41
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• 1981

뉴캣슬병 바이러스가 발견된지 50여년이 지난 오늘에도 그 발생은 전 세계적으로 광범위하다. NDV가 분리됨으로 백신개발이 이루어져 1930년대말부터 완전하지는 못했으나 그런대로 방역을 맡았으며 그후 개량발전된 백신으로 각국에서 예방접종하고 있으나 여전히 발생하고 있다. NDV는 Paramyxovirus로서 RNA를 가지고 있으며 크기는 $100\~600{\mu}m$ 범위의 크기와 lipoprotein envelope로 쌓여 있다. 분리동정에 이용되는 혈구응집소, neuraminidase의 작용, 용혈성 등 모두 envelope와 관련이 있으며 이와 관련된 연구가 많이 진행되고 있다. NDV가 세포에 침투하는 과정에서 특이한 receptor에 부착하여 envelope의 용해 및 nucleocapsid의 세포속에 침투 등이 밝혀지고 있으며 NDV의 Virion은 RNA의존 RNA 복합체를 가지고 있고 보족 RNA는 바이러스 단백질 및 RNA를 산생하기 위해서 숙주에 의하여 전환을 한다. 1 일령추의 뇌내접종, 정맥내 접종 및 계태 아치사시간 등의 방법으로 Velogenic, Mesogenic Lentogenic type으로 분류하고 감염력에 따라 Virulent 또는 avirulent로 구분된다. 국내에서 분리된 NDV는 현재 Velogenic형으로 분류되고 있으나 앞으로 지역별, 계절별, 감염된 숙주별로 광범위하게 분리하여 국내에서 유행하고 있는 NDV의 성상조사와 특성을 파악 할 필요성이 요청된다.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제3권2호
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• pp.227-231
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• 1999

Hemolytic uremic syndrome is a clinical syndrome with various etiology and pathogenesis. And pneumococcal neuraminidase has been known to play a pathogenetic role in some cases with this syndrome. We experienced two children with hemolytic uremic syndrome complicated by pneumococcal infection. One was 21-month-old girl with pneumococcal pneumonia, and the other was 7-month-old girl with pneumococcal meningitis and sepsis. Both of them showed typical clinical manifestations of hemolytic uremic syndrome with prolonged anuria during the course of pneumococcal infection. The renal functions of both cases did not recovered after resolution of acute hemolytic episode and chronic renal failure developed.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권2호
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• pp.345-348
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• 2002

A rapid spectrophotometric method for detecting the mucinase complex was developed. Bovine submaxillary mucin is cleaved by commercial mucinase between the oligosaccharide chain and the side chain of peptide linkage, thereby liberating the N-acetyl neuraminic acid (NANA). The release of NANA resulted in an increase of absorbance at 280 nm. The susceptibility to NANA by the new method was found to be at least 10-fold more sensitive than the thiobarbituric acid method. Moreover, the quantification of NANA released from mucin by commercial neuraminidase and partially purified Vibrio parahaemolyticus mucinase showed a good linear correlation in proportion to the concentration of the enzyme used. These results demonstrate that the rapid identification of mucin degradation can be determined by a spectrophotometric assay, thereby providing a new, fast, and sensitive method for assaying the bacterial mucinase complex.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제3권1호
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• pp.104-108
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• 1999

Atypical hemolytic uremic syndrome associated with neuraminidase-producing Streptococcus pneumoniae usually associated with invasive infection such as fulminant pneumonia, sepsis, and meningitis and may occur earlier in lift and has a higher mortality rate than typical hemolytic uremic syndrome. We have experienced a 22-month-old female patient with hemolytic uremic syndrome associated with S. pneumoniae pneumonia and empyema. The patient was treated with ceftriaxone and washed red blood cell transfusion. As the disese course could be aggravated by the use of blood products containing anti-Tomsen-Friedenreich antigen, early recognition and sensible use of blood products such as washed RBC might lead to the improved outcome.

• 한국토양동물학회지
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• 제5권1호
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• pp.39-46
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• 2000

The distribution and some properties of alkaline phosphatase (ALP) were investigated in the midgut of the earthworm, Eisenia andrei. The ALP activity appeared to be highly polarized toward the luminal side of epithelium, with minor ALP activity in chloragogue tissue. The epithelial and chloragogeneous tissues contained approximately 85 and 15% of total intestinal ALP activity, respectively. The optimal temperature was approximately 37$^{circ}C$ and isoelectricpoint was estimated to be 4. The treatment of neuraminidase and PtdIns-PLC failed to change the migration rate of ALPs. Also, these ALPs appeared to have a wide range of substrate specificity. The relationship between the properties and physiological significances of the midgut ALPs in Eisenia andrei was discussed.

• Molecules and Cells
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• 제41권4호
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• pp.271-281
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• 2018

IFIT1 (also known as ISG56) is a member of the interferon-inducible protein with tetratricopeptide repeats (IFITs) family. IFITs are strongly induced by type I interferon (IFN), double-stranded RNA and virus infection. Here, we investigated IFIT1 expression in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and in human bronchus epithelial cells (BEAS-2Bs) induced by the H9N2 virus and inactivated viral particle at different time points. We also investigated the effect of H9N2 virus and viral particle infection on $IFN-{\alpha}/{\beta}$ production, and assessed whether hemagglutinin or neuraminidase protein induced IFIT1 expression. Results showed that both H9N2 virus infection and viral particle inoculation induced the expression of IFIT1 at mRNA and protein levels in the two cell lines. Hemagglutinin or neuraminidase protein binding alone is not sufficient to induce IFIT1 expression. Surprisingly, the expression patterns of IFIT1 in response to H9N2 virus and viral particles in the two cell lines were opposite, and production kinetics of $IFN-{\alpha}/{\beta}$ also differed. An additional finding was that induction of IFIT1 in response to H9N2 virus infection or viral particle inoculation was more sensitive in HUVECs than in BEAS-2Bs. Our data offers new insight into the innate immune response of endothelial cells to H9N2 virus infection.

• 대한수의학회지
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• 제29권4호
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• pp.445-455
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• 1989

The proteins of the ruminant erythrocyte membranes were analysed by polyacrylamide gel electrophoresis in sodium dodecyl sulfate, and their relations to the slow erythrocyte sedimentation rate(ESR) of the ruminants were investigated by treating the erythrocytes with proteinases such as trypsin, chymotrypsin and pronase, and glycosidases such as neuraminidase and galactosidase. Protein content in the erythrocyte membrane was $2.85{\pm}0.28$ in human, $3.60{\pm}0.41$ in Korean cattle, $3.71{\pm}0.36$ in Holstein, $4.13{\pm}0.83$ in Korean native goat and $3.94{\pm}0.56mg/ml$ in sheep, showing higher in ruminant animals than in human(p<0.01). Although the general protein profiles of the ruminant erythrocyte membranes were almost similar to that of human, all the ruminant erythrocyte membranes showed one additional protein band, called band-Q in the previous report on proteins of bovine erythrocyte membrane, which migrated electrophoretically to the mid position between band-2 and band-3 in human erythrocyte membranes. The glycoprotein profiles of ruminant erythrocyte membranes revealed by periodic acid Schiff(PAS) stain showed a marked difference from that of human. The PAS-1(glycophorin) and PAS-2(sialoglycogrotein) present in human erythrocyte membranes were almost absent from the ruminant animals. Instead, a strong PAS-positive band near the origin of the electrophorograms, which was named as PAS-B in the previous report on proteins of bovine erythrocyte membranes, was shown in the ruminant animals except sheep. In addition, the erythrocyte membranes of Korean native goat and sheep showed a moderate PAS-negative band near the tracking dye of the electrophorograms, which was named as PAS-G in this study. In the erythrocyte treated with the enzymes, the migration of each protein fracture of erythrocyte membranes in response to each enzyme was diverse according to different species or breed of ruminant animals. Among others, band-Q present in ruminants was slightly or moderately decreased by trypsin-, chymotrypsin-, and pronase- treatments of the erythrocytes, but not only in sheep. It was particularly noticeable that PAS-B, a fraction of glycoprotein, present in ruminants except sheep, was better digested by proteinases than by glycosidases, showing remarkable increase(p<0.01) of the ESR in accord with complete digestion(disappearance) of the PAS-B band by pronase, trypsin or chymotrypsin treatment of erythrocytes. In sheep, there was almost no any response to the various enzymes in general protein and glycoprotein profiles of the erythrocyte membranes except PAS-G, which was markedly decreased by pronase treatment of the erythrocytes. Nevertheless, the ESRs were accelerated in erythrocytes treated with pronase, trypsin, chymotrypsin and neuraminidase. Erythrocyte osmotic fragility was increased in erythrocytes treated with only pronase among five enzymes in all the human and ruminant animals used in this study.