Initial subcellular responses in susceptible (PI 274420) and resistant (cv. Hartwig) soybeans infected with the soybean cyst nematode (SCN) were examined 2 and 4 days after inoculation (DAI). Subcellular features common to both soybeans at 2 DAI included hypertrophied initial syncytial cells (ISCs) and syncytium-component cells (SCs) with a dense cytoplasm containing proliferated rough and smooth endoplasmic reticulum (RER and SER), a hypertrophied nucleolus, and reduced vacuoles, suggesting that the nematode-infected cells were dedifferentiated. In the resistant soybean, a striking initial subcellular difference from the susceptible soybean was the dilation of the RER, indicating ER dysfunction and leading to cell death. This disturbed nematode feeding, as evidenced by disrupted feeding tubes. In PI 274420, the ISC cytoplasm was depleted, with the exception of ER membranes, at 4 DAI, while the SC cytoplasm was dense with proliferation of starch-containing plastids around multiple nuclei that might be derived from the congregation of nuclei in the neighboring SCs and in part by nuclear division without cytokinesis. In cv. Hartwig, syncytia were necrotized with secondary cell wall thickening outside the plasma membrane and an extremely dense cytoplasm containing a nucleus with an electron-lucent nucleolus, accompanied by the proliferation of closely stacked parallel RER and ribosomes. These results suggest that syncytia develop continuously in PI 274420 to produce and store nutritional substances in SCs, providing for the nematode through ISC until maturation, but in cv. Hartwig, syncytia degenerate early due to excessive metabolism, blocking nematode feeding and cytoplasmic connections with adjacent intact cells.
Lee Sang-Bae;Kim Hyun-Kyung;Oh Ho-Kyun;Hong Yong-Kil;Joe Young-Ae
Biomolecules & Therapeutics
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제14권1호
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pp.30-35
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2006
Tissue-type plasminogen activator (t-PA) is a multidomain serine protease containing two kringle domains, TK1-2. Previously, Pichia-derived recombinant human TK1-2 has been reported as an angiogenesis inhibitor although t-PA plays an important role in endothelial and tumor cell invasion. In this work, in order to improve in vivo efficacy of TK1-2 through elimination of immune reactivity, we mutated wild type TK1-2 into non-glycosylated form (NE-TK1-2) and examined whether it retains anti-angiogenic activity. The plasmid expressing NE-TK1-2 was constructed by replacing $Asn^{l17}\;and\;Asn^{184}$ with glutamic acid residues. After expression in Pichia pastoris, the secreted protein was purified from the culture broth using S-sepharose and UNO S1-FPLC column. The mass spectrum of NE-TK1-2 showed closely neighboring two peaks, 19631.87 and 19,835.44 Da, and it migrated as one band in SDS-PAGE. The patterns of CD-spectra of these two proteins were almost identical. Functionally, purified NE-TK1-2 was shown to inhibit endothelial cell migration in response to bFGF stimulation at the almost same level as wild type TK1-2. Therefore, the results suggest that non-glycosylated NETK1-2 can be developed as an effective anti-angiogenic and anti-tumor agent devoid of immune reactivity.
The intestinal histopathology and in situ postures of Gymnophalloides seoi (Digenea: Gymnophallidae) were studied using C3H/HeN and C57BL/6 mice as experimental hosts; the effects of immunosuppression were also observed. The metacercariae isolated from naturally infected oysters, 300 or 1,000 in number, were infected orally to each mouse, and the mice were killed at days 3-21 post-infection (PI). In immunocompetent (IC) mice, only a small number of flukes were found in the mucosa of the duodenum and jejunum during days 3-7 PI, with their large oral suckers pinching and sucking the root of villi. The intestinal mucosa showed mild villous atrophy crypt hyperplasia, and inflammations in the villous stroma and crypt, with remarkable goblet cell hyperplasia. These mucosal changes were almost restored after days 14-21 PI. In immunosuppressed (IS) mice. displacement as well as complete loss of villi adjacent to the flukes was frequently encountered, otherwise the histopathology was generally mild, with minimal goblet cell hyperplasia. In these mice, numerous flukes were found, and it seemed that they were actively moving and rotating in situ. Several flukes were found to have invaded into the submucosa, almost facing the serosa. These results indicate that in IC mice the intestinal histopathology caused by G. seoi is generally mild, and the flukes do not penetrate beyond the mucosa, however, in IS mice. the flukes can cause severe destruction of neighboring villi. and some of them invade into the submucosa.
본 연구에서는 유동저항이론을 기초로 하여 연속다공체, 분리단열망 및 연속다공체-분리단열망 공존암반과 같은 3가지 암반을 대상으로 암반 특성에 따른 지하수 유동저항 개념 모델링 및 관계식을 제안하였다. 정상상태조건에서 밀도변동은 고려하지 않았으며 유한 체적법을 이용하였다. 각종 물성치는 블록 중심에서 정의되고, flux는 블록면에서 정의되는 staggered 격자 체계하에서 모든 블록에 대해 Darcy 법칙이 적용되었다. 접촉면에서의 투수계수는 인접면 중심에서 정의된 물성치의 조화평균값을 사용하였다. 유동저항개념을 이용하여 인접한 블록간의 상대압력차와 flux의 관계를 표현하였다. 개개의 단열에서의 유동은 다공암반에서 이용된 방정식과 동일한 형태의 2차원 방정식으로 모사되었다. 본 논문에서 제안된 모델은 추후 다양한 암반 특성별 유동 모사 기법을 개발하는데 많은 기여를 할 것으로 기대된다.
Cell-cell direct communication through channel-forming molecules, connexin (Cx), is essential for a tissue to exchange signaling molecules between neighboring cells and establish unique functional characteristics during postnatal development. The corpus epididymis is a well-known androgen-responsive tissue and involves in proper sperm maturation. In the present research, it was attempted to determine if expression of Cx isoforms in the corpus epididymis in the adult is modulated by exposure to estrogenic or anti-androgenic compound during the early postnatal period. The neonatal male rats at 7 days of age were subcutaneously injected by estradiol benzoate (EB) at low-dose ($0.015{\mu}g/kg$ body weight) or high-dose ($1.5{\mu}g/kg$ body weight) or flutamide (Flu) at low-dose ($500{\mu}g/kg$ body weight) or high-dose (50 mg/kg body weight). The corpus epididymis collected at 4 months of age was subjected to evaluate expressional changes of Cx isoforms by quantitative real-time PCR. Treatment of low-dose EB resulted in increases of Cx32, Cx37, and Cx45 transcript levels, while exposure to high-dose EB decreased expression of Cx26, Cx30.3, Cx31, Cx31.1, Cx32, Cx40, Cx43, and Cx45. Treatments of Flu caused significant decreases of expression of all examined Cx isoforms, except Cx37 and Cx43 shown no expressional change with high-dose Flu treatment. These findings imply that expression of most Cx isoforms present in the corpus epididymis would be transcriptionally regulated by actions of androgen and/or estrogen during postnatal period.
Civi, Soner;Durdag, Emre;Aytar, Murat Hamit;Kardes, Ozgur;Kaymaz, Figen;Aykol, Sukru
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제60권4호
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pp.417-423
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2017
Objective : Repair of sensorial nerve defect is an important issue on peripheric nerve surgery. The aim of the present study was to determine the effects of sensory-motor nerve bridging on the denervated dermatomal area, in rats with sensory nerve defects, using a neural cell adhesion molecule (NCAM). Methods : We compared the efficacy of end-to-side (ETS) coaptation of the tibial nerve for sural nerve defect repair, in 32 Sprague-Dawley rats. Rats were assigned to 1 of 4 groups : group A was the sham operated group, group B rats had sural nerves sectioned and buried in neighboring muscles, group C experienced nerve sectioning and end-to-end (ETE) anastomosis, and group D had sural nerves sectioned and ETS anastomosis was performed using atibial nerve bridge. Neurological evaluation included the skin pinch test and histological evaluation was performed by assessing NCAM expression in nerve terminals. Results : Rats in the denervated group yielded negative results for the skin pinch tests, while animals in the surgical intervention groups (group C and D) demonstrated positive results. As predicted, there were no positively stained skin specimens in the denervated group (group B); however, the surgery groups demonstrated significant staining. NCAM expression was also significantly higher in the surgery groups. However, the mean NCAM values were not significantly different between group C and group D. Conclusion : Previous research indicates that ETE nerve repair is the gold standard for peripheral nerve defect repair. However, ETS repair is an effective alternative method in cases of sensorial nerve defect when ETE repair is not possible.
Patterns of amylase secretion in mouse pancreatic fragments were studied over a period of time after the tissue was stimulated by acetyicholine and MNNG. MNNG is known to activate guanylate cyclase and thus increase the cGMP concentration in the pancreatic acinar cell. These amylase secretion patterns were studied to investigate the role of cGMP in reaction cascade during secretion response of the tissues stimulated by acetyicholine. Cellular response of amylase secretion in the pancreas by acetyicholine was divided into two phases. During the first phase, zymogen granules which had existed in the cells were secreted by the action of $Ca^2$+ and calmodulin immediately after secretagogue administration, this being known as the initial response. When the tissue was stimulated by acetylcholine in a $Ca^2$+-deficient medium or one containing trifluoperazine as a calmodulin antagonist, this initial response was reduced. In the second phase, newly formed zymogen granules were secreted as sustained response after protein synthesis was triggered by secretagogue. This response was provoked by an activation of protein kinase C. When either cycloheximide as a protein synthesis inhibitor or dibucaine as a protein kinase C inhibitor were added to the incubation medium, this sustained response was remarkablely depressed in the pancreatic fragments stimulated with acetylcholine. In the pancreatic acinar cell, phosphatidylinositol turnover plays an important role in the secretion response and hexachlorocyclohexane inhibits this phosphatidylinositol turnover. The pancreatic tissue treated with the hexachlorocyclohexane exhibited inhibition on both initial and sustained responses of amylase secretion by acetylcholine. MNNG also accelerated amylase secretion from the tissue gradually along incubation time. The 22 minutes fraction of the pancratic secretion after administration of both acetylcholine and MNNG showed higher amylase activity than the neighboring fractions. Guanylate cyclase potentiated the sustained response. Even if it is experimented with an indirect method, guanylate cyclase was found responsible for activation of the sustained response of a step prior to the action of protein kinase C. As conclusion, it was considered that amylase secretion in mouse pancreatic fragments stimulated by acetylcholine is a three phasic response.
A scanning electron microscopic study on the glochidium and glochidial encystment of Anodonta arcaeformis on the host fish Carassius auratus was conducted. The shape of the glochidium was apparently subtriangular and its average size was $270\;{\mu}m\;\times\;260\;{\mu}m\;\times\;145\;{\mu}m$. The glochidial shell valves were of the same size, kept together by a ligament that is 50.4 ${\mu}m$ in length and 5.5 ${\mu}m$ in width. Each of the glochidial shell valve had a long hook studded with many spines on the superior face. A large area of at the apex of the valve surrounding the base of the hook was provided with numerous small spines which became progressively smaller toward the periphery of the area. The glochidial shell valve consisted of two layers. The mantle cells line the glochidial shell valves and some of hair cells were observed. A larval thread was 2.3 ${\mu}m$ in diameter. In the artificial infection of the glochidia to one of the natural hosts, Carassius auratus, it took about three to four hours to encyst the glochidia with epithelial cells of the fish fins. The encystment method was the cell migration from the neighboring epithelial cells.
Direct communication between neighboring cells via gap junction in tissue is important for maintenance and regulation of its physiological functions. Each epididymal region has different composition of cell types. It is well recognized that the epididymis is a steroid hormone-responsive tissue. The present study was designed to determine the effect of estradiol benzoate (EB) or flutamide exposured at the early postnatal age on the expression of connexin (Cx) isoforms in the caudal epididymis. The EB or flutamide was subcutaneously administrated to male Spragure Dawley rat at 7 days of age, and expressional changes of Cx isoforms in the adult corpus epididymis were determined by quantitative real-time PCR. The treatment of low-dose EB resulted in decreases of Cx30.3, Cx31.1, Cx37, and Cx45 expression but caused an increase of Cx32 expression. Exposure to high-dose EB led into expressional increases of Cx31, Cx31.1, Cx32, Cx40, and Cx43, even though a decrease of Cx37 expression was found with a high-dose EB treatment. A low-dose flutamide induced increases of Cx31, Cx31.1, Cx32, and Cx43 expression but a decrease of Cx37 expression. Expression of most Cx genes were significantly increased by a high-dose flutamide, while no expressional change of Cx26 and Cx40 was detected by a high-dose flutamide. These results indicate that expression of Cx isoforms in the caudal epididymis is altered by exposure to steroidal compounds at the prepubertal age. It is suggested that a contact with environmental exogenous materials during the early postnatal period would lead to alteration of epididymal functions at the adult.
Direct communication between neighboring cells through connexin (Cx)-based gap junction is a crucial biological manner to regulate functions of a tissue consisting of multi-cell types. The present research evaluated expressional changes of Cx isoforms in the caput epididymis of adult rat exposed to estradiol benzoate (EB) or flutamide (Flu) at the early postnatal age. A single subcutaneous administration of EB at a low-dose [$0.015{\mu}g/kg$ body weight (BW)] or a high-dose ($1.5{\mu}g/kg\;BW$) or Flu at a low-dose ($500{\mu}g/kg\;BW$) or a high-dose (5 mg/kg BW) was performed to an animal at 1 week of age. Quantitative real-time PCR analysis was employed to determine expressional changes of Cx isoforms. The transcript levels of Cxs30.3 and 37 were decreased by a low-dose EB treatment, while decreases of Cxs31, 31.1, 32, 40, and 45 transcript levels were observed with a low-dose EB treatment. The treatment of a high-dose EB resulted in expressional reduction of Cxs30.3, 31, 31.1, 37, 40, 43, and 45. The Flu treatment at a low dose caused increases of Cxs26, 37, and 40 transcript levels but decreases of Cxs31.1, 43, and 45 transcript levels. Increases of Cxs30.3, 31, 37, and 40 mRNA amounts were induced by a high-dose Flu treatment. However, exposure to a high-dose Flu produced expressional decreases of Cxs31.1, 32, and 43 in the adult caput epididymis. These observations suggest that exposure to EB or Flu at the neonatal period could lead to aberrant expression of Cx isoforms in the adult caput epididymis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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