The fine structural characteristics of cardiac muscle cells and its myofibril organization in the orb web spider N. clavata were examined by transmission electron microscopy. Although myofibril striations are not remarkable as those of skeletal muscles, muscle fibers contain multiple myofibrils, abundant mitochondria, extensive sarcoplasmic reticulum and transverse tubules (T-tubules). Myofibrils are divided into distinct sarcomeres defined by Z-lines with average length of 2.0 ㎛, but the distinction between the A-band and the I-bands is not clear due to uniform striations over the length of the sarcomeres. Dyadic junction which consisted of a single T-tubule paired with a terminal cisterna of the sarcoplasmic reticulum is found mainly at the A-I level of sarcomere. Each cell is arranged to form multiple connections with neighboring cells through the intercalated discs. These specialized junctions include three types of intercellular junctions: gap junctions, fascia adherens and desmosomes for heart function. Our transmission electron microscopy (TEM) observations clearly show that spider's cardiac muscle contraction is controlled by neurogenic rather than myogenic mechanism since each cardiac muscle fiber is innervated by a branch of motor neuron through neuromuscular junctions.
생선회의 육질을 향상시키는 연구의 일환으로 어육에 있어서 전기자극에 의한 근수축의 증대원인을 밝히고자 전기자극처리가 근소포체의 특성에 미치는 영향을 살펴보았다. 넙치 근소포체의 $Ca^{2+}$-ATPase는 $50^{\circ}C$ 이상의 온도에서 실활되었으며, 전기자극시킨 경우 즉살한 것에 비하여 낮은 $Ca^{2+}$-ATPase활성을 나타내었다. 근육을 $5^{\circ}C$에 저장하였을때 시간이 길어질수록 근소포체의 $Ca^{2+}$-ATPase는 치사직후에 비하여 저하되는 경향을 보였으며, 전기자극 시간이 길어질수록 빠르게 저하되었고. 35초와 60초간 전기 자극시킨 것은 비슷한 저하속도를 나타내었다. SDS-PAGE 결과, 97kDa과 68kDa의 성분이 주된 구성단백질이었으며. 전기자극 시킨것은 즉살시킨 것에 비하여 97kDa의 성분이 감소되었고 전기자극 시간이 길어질수록 현저하였다. LSR은 $27\~32\%$ sucrose 농도에서, HSR은 $38\~45\%$의 농도에서 얻을 수 있었다. LSR의 $Ca^{2+}$-ATPase는 전기자극에 의하여 실활되었으며, HSR은 큰 영향을 받지 않았다 근원섬유의 $Mg^{2+}$-ATPase 활성은 전기자극처리에 의하여 증가되었으며 자극시간이 길어질수록 저장 중 $Mg^{2+}(+Ca^{2+}$)-ATPase 활성의 저하는 즉살한 것에 비하여 빠르게 진행되었다. $Mg^{2+}(-Ca^{2+}$)-ATPase 활성의 변화는 $Mg^{2+}(+Ca^{2+}$)-ATPase 활성과 비슷한 경향을 나타내었으며, 전기자극한 것은 저장 중 저하되었으나 즉살한 것은 치사 직후와 비교하여 큰 차이를 나타내지 않았다. 근원섬유의 $Ca^{2+}$-감수성은 즉살과 전기자극한 것 사이에 차이를 나타내지 않았으며, 저장 중에도 변화를 보이지 않았다.
근육의 수축 및 사후강직은 myosin 과 actin 그리고 ATP 와의 상호작용에 의한 것임은 널리 알려진 정설(定說)이다. 최근 myosin 과 actin 및 ATP 의 상호작용이 근조절단백질의 지배를 받고 Ca ion 이 관여하고 있다는 것이 알려졌다. 그런데 이들 조절단백질은 수용성단백질로써의 성질을 가지고 있음에도 불구하고 염용성단백질 구분에 들어 있다. 본 연구의 목적은 염용성단백질 구분에 들어 있는 이들 조절단백질의 새로운 분리정제방법을 연구하는 데 있었다. 이를 위하여 본 연구에서는 새로운 정제방법의 flow sheet 를 작성하였다. 이 제안된 새로운 정제방법은 근원섬유중의 조절단백질의 함량을 정량적으로 추적할 수 있는 장점을 가지고 있다는데 그 특색이 있다.
한류성 어류(연어, 명태)와 난류성 어류(상어, 조기)의 근원섬유 단백질의의 생화학적인 특성을 규명하기 위하여 각각으로부터 actomyosin과 myofibril을 조제하여 생물활성 및 SDS-polyacrylamide gel 전기영동상을 조사하였으며, 또한 어류의 환경온도에 대한 적응성을 알아보기 위하여 생물활성의 온도 의존성을 조사하였다. 각 어류의 myofibril의 SDS-polyacrylamide gel 전기영동상으로부터 SDS-PAGE pattern은 어종간에 차이를 보였으며 또한 myofibril과 actomyosin의 생물활성과 activity-ph curve도 어종간에 차이를 나타내었다. 한류성 어류인 명태의 근원섬유 단백질의 ATPase의 활성은 환경온도$(5^{\circ}C-10^{\circ}C)$ 부근에서 상어보다 높은 활성을 나타내었다.
Using the protein A-gold complex, the mvoabrillogenesis and actin localization of cultured myoblast were invastisated. In the superstructural changes of mvogenic cell during differentiation, pectoral myoblasts contained large nucleus and numerous ribosomes but no myofibrils during the first 24 hr of cultures. Mvoblast initiated to differentiate at 3-day of culture contained the primitive myofibrillar structure. At 96 hr of culture, the mvofibrillar structure showed reletively discernable Z band but pools defined A, H and M bands. The feature of sarcomeric structure showed more defined form at cultur 5 day. In the aspect of actin localization, actin wvas diffusely detected throughout the cytoplasm of myogenic cell and nucleus during the proliferating stage. At 72 hr of culture, with the appearantc oi primitive mvofibrils, gold particles were observed in surrounding of myofibrils but still presented in overall of cytoplasm, especially in the surface and lumen of endoplasmic reticulum. With the gradual increase of culture time, local distribution of actin was readily detected within cytoplasm. In the 5-day specimen of cultures, gold particles precisely indicate the sites of actin localifation within the sarcomere. These results indicate the time of onset of myofibrill appearance and the biosynthetic and incorporation pathway of actin molecules into sarcomeric structure during myofibrillogenesis. Thus, in the present study, the first mvoabrillar structure was detected at culture 3 day, and the initiation of assembly into a typical sarcmeric structure was observed at culture 5 day. It seems, however, that the course of events on myofibrillogenesis of cultured myoblasts can be changed with great dependence of culture conditions including the number and groluth rate of mononucleated mvoblasts after seeding although the fundamental process shows identical appearances.
넙치를 즉살하여 저장하는 경우에 저장 온도가 육의 파괴강도의 변화에 영향을 미치는 원인을 규명하기 위하여, 근원섬유의 형태학적인 변화 그리고 근육의 조직학적인 변화에 대하여 검토한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 육의 파괴강도 변화는 $0^{\circ}C$ 저장에서는 저장초기에 서서히 증가하여 저장 10시간후에 최대값을 나타내었으며, 그 후 저하 속도가 급하였다. 한편, $10^{\circ}C$ 저장에서는 저장 기간을 통하여 육의 파괴강도의 증가는 거의 관찰되지 않았고, 저하 속도도 완만하였다. 2. 근원섬유의 형태학적인 변화는 즉살 직후에는 근절내의 A대, H대, I대 그리고 Z선이 확실히 구별되었다. $0^{\circ}C$ 저장에서는 10시간후에 A대 중앙부의 H대의 구별이 확실하지 않았고, I대 간격이 좁아졌음이 관찰되었다. 한편 $10^{\circ}C$ 저장에서는 15시간까지 H대의 흔적이 관찰되었다. 3. 근육의 조직학적인 변화는, 즉살 직후에는 세포와 세포사이의 간격이 전혀 관찰되지 않았으나, $0^{\circ}C$ 저장에서는 15시간후에 전체의 세포 사이의 간격이 관찰되었다. 한편, $0^{\circ}C$ 저장에서는 24시간 후에 전체의 세포 사이의 간격이 관찰되었다. 이상의 결과로 부터, 즉살 넙치를 $0^{\circ}C$의 저온에 저장시에 저장 초기에 육의 파괴강도가 증가하는 것은 myosin과 actin의 결합의 촉진에 의한 actomyosin toughness의 상승에 기인하며, 그 후 파괴강도의 저하는 세포와 세포를 연결시키는 collagen matrix의 취약화 때문으로 해석된다.단계에 이르렀고 찐어묵은 $4^{\circ}C$에서 20일, $15^{\circ}C$에서는 5일까지 저장성이 있었다.yptoxanthin의 함유비가 높은 반면, lutein의 함유비가 낮은 경향을 보여 서로 차이를 나타내었다. 2) 미꾸리 표피의 총 carotenoid함량은 천연산 $4.00mg\%$인데 비하여 양식산 $2.99mg\%$로서 미꾸라지에서와 같이 천연산이 양식산보다 함량이 높았다. Carotenoid조성은 천연산에서 lutein $32.9\%$, ${\beta}$-cryptoxanthin $18.8\%$, cynthiaxanthin $17.0\%$, ${\beta}$-carotene $15.1\%$로서 주성분을 이루고, 그 외 zeaxanthin $6.5\%$, tunaxanthin $6.0\%$, a-cryptoxanthin $1.5\%$의 순으로 함유되었으며, 양식산에는 lutein $51.8\%$, cynthiaxanthin $19.9\%$, ${\beta}$-cryptoxanthin $10.8\%$로서 주성분을 이루고, 그 외 ${\beta}$-carotene $5.0\%$, zeaxanthin $4.8\%$, tunaxanthin $4.5\%$, a-cryptoxanthin $0.2\%$의 순으로 함유되어,
The microwave fixator has recently been introduced in morphological research. The present study was carried out to investigate the ultrastructural effects of microwave fixation of rat brain. kidney, liver and skeletal muscle tissues. The results are as follows: In the case of microwave fixed cerebrum. the cytoplasmic processes of neurons and the various membranous organelles such as nuclear envelope, mitochondria, rough endoplasmic reticulum and Golgi apparatus were well preserved, The myelin sheath wrapping neuronal axon was prominent. Microwave fixed hepatocytes showed the microvilli on the free surface of bile canaliculus, the evident nucleolar components, and typical organelles. In nephron, ultrastructures of glomerulus and Bowman's capsule were preserved, and also tubular wall were structurally observed. Among the skeletal muscle cells, plentiful collagen fibers were appeared, myofibrils and mitochondria were typically observed. In conclusion, the microwave fixation procedures result in an good preservation of the tissues and would be time- and reagent-saving.
0.05 M 중탄산 나트륨 및 0.04 M 인산염 완충용액 (pH 8.3)으로 처리한 노계육 가슴살 및 다리살 시료의 경우 근섬유 단백의 불안정화를 시사하는 열변성 온도의 저하가 관찰되었다. 이러한 현상을 근섬유 단백중 95 Kdalton 및 55 Kdalton protein의 추출과 관련 가능성이 있는 것으로 판단되었으며 처리 시료의 근섬유구조 변화(Z-line의 파괴)와도 관련 가능성이 있는 것으로 판단되었다.
Purified myofibrils were prepared from ante-mortem stress and control lots of Taiwan country chicken breast and thigh muscles at death and afler storage at $4^{\circ}C$ for 0, 1, 2, 3, and 7 days post-mortem. Sodium dodecyl sulfate polycrylamide gel electrophoresis (3.2%) and densitometer were used to examine the effect of ante-mortem stress and control storage of muscle on titin and nebulin. Results indicated that titin and nebulin were more rapidly degraded in the control and the ante-mortem stress light muscles than in the control and ante-mortem dark muscles of Taiwan country chicken. In contrast, nebulin was shown to be more resistance to degradation in the ante-mortem stress dark muscle than in the control light muscle.
Undifferentiated leiomyosarcomas were encountered in two dogs, and an ultrastructural study was carried out. The results of this study were summarized as follows; 1. The nuclei of mosts tumor cells showed bilobate appearance. 2. Most cells of the tumors had not a distinct basement membrane. 3. Most cells of the tumors had a degenerative rough endoplasmic reticulum. 4. Intercellular matrix contained some amounts of collagen. 5. Attachment areas between tumor cells were not apparent, but a few tight junction were clearly seen. 6. Myofibrils were present in bipolor end area.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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