This study was conducted to determine the optimal dose of gamma-ray on the growth and nucleus DNA damage for mutation breeding in licorice. Gamma-rays irradiated to dry seeds with various doses (0 to 1000 Gy). Significant decreases in germination rate (%), survival rate (%) and growth characteristics (plant height, number of leaves, root length and fresh weight) were observed by dose of increased. $LD_{50}$ (lethal dose) was approximately 400 Gy to 500 Gy. Also, reduction doses ($RD_{50}$) of plant height, number of leaves, root length and flash weight were 428 Gy, 760 Gy, 363 Gy and 334 Gy, respectively. It is supplest that the optimal dose of gamma irradiation for licorice mutation induction might be about 400 Gy in this study. We also conducted comet assay to observe nucleus DNA damage due to gamma irradiation. In comet assay, a clear difference was identified over 300 Gy treatments. With increasing doses of gamma-ray in the range of 100 to 1000 Gy, the rate of head DNA was decreased significantly from 92.88% to 73.09%. Tail length(${\mu}m$) was increased as the dose of increased over 300 Gy. Growth characteristics (Germination rate, Survival rate, plant height, number of leaves, root length and fresh weight) were highly negatively ($P{\leq}0.01$) correlated with dose. While the tail length was highly positively ($P{\leq}0.01$) correlated with dose.
To facilitate their spread, plant viruses have developed several methods for dispersal including insect and seed transmission. While insect transmission requires virus stability against insect digestion, seed-transmitted viruses have to overcome barriers to entry into embryos. Bean pod mottle virus (BPMV) is transmitted through seed at levels typically below 0.1%, but co-infection with Soybean mosaic virus (SMV) enhanced the seed transmission rate of BPMV in one experiment. In contrast, the rate of SMV seed transmission was not affected by BPMV co-infection. In a second preliminary study, the rate of SMV transmission was lower in an isoline of Williams 82 that contained a null mutation for the Kunitz trypsin inhibitor gene than in Williams 82. In this preliminary study, we observed that factors such as protease inhibitor expression and dual infection may affect the frequency of seed transmission of BPMV and SMV.
Ozturk, Mehmet;Gurel, Ekrem;Watmough, Nicholas J.;Mandaci, Sevnur
BMB Reports
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v.40
no.5
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pp.697-707
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2007
Cytochrome $cbb_3$ oxidase is a member of the heme-copper oxidase superfamily that catalyses the reduction of molecular oxygen to the water and conserves the liberated energy in the form of a proton gradient. Comparison of the amino acid sequences of subunit I from different classes of heme-copper oxidases showed that transmembrane helix VIII and the loop between transmembrane helices IX and X contain five highly conserved polar residues; Ser333, Ser340, Thr350, Asn390 and Thr394. To determine the relationship between these conserved amino acids and the activity and assembly of the $cbb_3$ oxidase in Rhodobacter capsulatus, each of these five conserved amino acids was substituted for alanine by site-directed mutagenesis. The effects of these mutations on catalytic activity were determined using a NADI plate assay and by measurements of the rate of oxygen consumption. The consequence of these mutations for the structural integrity of the $cbb_3$ oxidase was determined by SDS-PAGE analysis of chromatophore membranes followed by TMBZ staining. The results indicate that the Asn390Ala mutation led to a complete loss of enzyme activity and that the Ser333Ala mutation decreased the activity significantly. The remaining mutants cause a partial loss of catalytic activity. All of the mutant enzymes, except Asn390Ala, were apparently correctly assembled and stable in the membrane of the R. capsulatus.
Egg production traits are economically important both for egg-laying and broiler lines of chicken. In sheep, the Q249R mutation in BMPR-IB is associated with ovulation rate. The present study cloned a partial chicken BMPR-IB fragment which contained the corresponding ovine Q249R mutation, including partial exon 6 and exon 7 and full-length intron 6. Five nucleotide changes were identified by alignment of the fragment amplified from Jining Bairi and Zang chickens. Among these nucleotide substitutions, the C/T transition at the base position of 35 and the A/G transition at the base position of 287 were found to be highly polymorphic, and named as SNPs C35T and A287G, respectively. For the SNP C35T, 331 hens of a synthetic broiler line were genotyped by a PCR-SSCP approach and allele C was found to be dominant. For the SNP A287G, 604 birds from the synthetic broiler line, a commercial egg-laying line, as well as three Chinese indigenous chicken breeds were genotyped by a PCR-RFLP technique. The associations of these two SNPs with egg production traits in the broiler line were analyzed. The results indicated that both the C35T and the A287G SNPs were not associated with egg production at 33wks and from 33wks to 42 wks (p>0.1), whereas the SNP A287G was associated with egg production from 47 to 56 wks (p<0.05). The dominance genetic effects on this latter trait and on egg production from 33 to 42 wks were significant (p<0.05).
Shirazy, Najmeh Hadizadeh;Ranjbar, Bijan;Hosseinkhani, Saman;Khalifeh, Khosrow;Madvar, Ali Riahi;Naderi-Manesh, Hossein
BMB Reports
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v.40
no.4
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pp.453-458
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2007
Bacterial luciferase is a heterodimeric enzyme, which catalyzes the light emission reaction, utilizing reduced FMN (FMNH2), a long chain aliphatic aldehyde and $O_2$, to produce green-blue light. This enzyme can be readily classed as slow or fast decay based on their rate of luminescence decay in a single turnover. Mutation of Glu175 in $\alpha$ subunit to Gly converted slow decay Xenorhabdus Luminescence luciferase to fast decay one. The following studies revealed that changing the luciferase flexibility and lake of Glu-flavin interactions are responsible for the unusual kinetic properties of mutant enzyme. Optical and thermodynamics studies have caused a decrease in free energy and anisotropy of mutant enzyme. Moreover, the role of Glu175 in transition state of folding pathway by use of stopped-flow fluorescence technique has been studied which suggesting that Glu175 is not involved in transition state of folding and appears as surface residue of the nucleus or as a member of one of a few alternative folding nuclei. These results suggest that mutation of Glu175 to Gly extended the structure of Xenorhabdus Luminescence luciferase, locally.
Studies on the antimutagenicity of Lactobacillus spp. and Bifidobactrium spp. against 2-nitrofluorene have been conducted utilyzing Salmonella typhimurium TA 98 in order to characterize the activity by the starter and non-starter strains. The average antimutagenic activity of Lactobacillus spp. and Bifidobactrium spp. against 2-nitrofluorene was 20.29% and L. plantarum CU 722 revealed the greatest mutation inhibition activity of 50.34%. An intensive antimutagenicity was found in the cell wall and cytoplasm fraction of L. plantarum CU 722 in skim milk culture showing inhibition rate of 34.9% and 24.5% respectively and very low activity remained in cell free broth and in lactic acid. The optimum cultivation time for Lactobacillus spp. and Bifidobacterium spp. to inhibit mutation was 24 hours and the optimum preincubation time of the reaction mixture containing the mutagen, lactic culture and indicator strain was 60 minutes, and the optimum incubation time for the test plates was 48 hours.
Kwon, Oh-Sik;Kang, Jung-Soon;Park, Hyun-Jin;Yoo, Min
Biomedical Science Letters
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v.10
no.1
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pp.55-63
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2004
Bovine leukemia virus (BLV) is a causative agent for lymphoma disease in cattle including cows worldwide. BLV shares similar virion structure and characteristics with other retroviruses. The pol gene of the BLV genome produced reverse transcriptase (RT) and integrase (IN) for important roles for BLV genome integration into host cell chromosomes that is known to be coded in the 3' side of the BLV pol gene (one third portion). In this study, we have sequenced 978 bp in the 3' side of the BLV pol gene from BLV 10C3 in order to determine the BLV IN region of it. And we compared it to the nucleotide sequences of an Australian BLV isolate. As a result, nucleotide sequences of the IN region of the Korean-type BLV pol gene were mutated at a rate of 3.7%. We can confirm that the typical mutations are such as Arg (AGG) $\rightarrow$ Lys (AAG), Thr (ACG) $\rightarrow$ Met (ATG), Ile (ATT) $\rightarrow$ Val (GTT), Asn (ACC) $\rightarrow$ His (CAC), Phe (TTT) $\rightarrow$ Leu (TTG) and Asn (ACC) $\rightarrow$ Asp (GAC). From the analysis of the sequencing data, we were able to determine the zinc-finger-like "HHCC" motif in the amino terminus of BLV IN, that was H-$X_3$-H-$X_{25}-C-X_2$-C. It was also found the DD35E motif in the IN catalytic domain as D-$X_{56}$-D-$X_{35}$-E. It fits very well to the consensus sequences of retroviral IN as well as HHCC motif.
Inducing genetic and morphological variation through conventional method is very difficult. Therefore, mutation induction through in vitro technology brings numerous advantages over the conventional breeding. Thus, the individual shoots (1 ~ 2 cm) were irradiated with gamma rays (10 ~ 70 Gy). The result revealed that the explants treated with higher doses (40, 50, 60, and 70 Gy) showed deleterious effects of ionizing radiation. The highest survival rate among ${\gamma}$ treated explants recorded was 71% in 10 Gy treatments while the lowest survivality was 15% in 70 Gy. Lethal dose 50% ($LD_{50}$) dose was found to be 33 Gy. In the in vitro condition, rooting reponse showed that increase in gamma irradiation dose resulted in the inhibition of root growth. Meanwhile, non-treated explants had the best rooting ability with the maximum number of root per explant (20) within a short period of time (6 days), with the highest root length of (15.1 cm). The longer period in rooting (12 days) and lowest number of root per explant (8) with shortest root length (10.1 cm) were recorded at 30 Gy treatment. The highest shoot length (13.6 cm) was observed at control treatment and the shortest shoot length (10.4 cm) was observed at 30 Gy. In the nursery, lowest leaf number (5) was observed at 30 Gy compared with other treatments. The highest chlorophyll content (49.8) was recorded at 10 Gy treated seedling. Irradiated explants with 10 Gy found to be superior over the control treatment and had positive effects in main growth parameters such as chlorophyll content.
Purpose: To investigate clinicopathological features in patients with recurrent colorectal cancer within 1 year and more than 1 year after curative resection. Materials and Methods: We retrospectively evaluated 103 patients with disease recurrence before versus after 1 year of resection. Thirty-two patients (31%) were diagnosed with recurrence less than 1 year after curative resection for colorectal cancer (early recurrence) and 71 (69%) after more than 1 year (non-early recurrence). Results: The early recurrence group displayed a significantly lower overall survival rate for both colon cancer (p=0, 01) and rectal cancer (p<0.001). Inadequate lymph node dissection was a significant predictor for early relapse. There were no statistically significant differences in clinicopathological variables such as age, sex, primary tumor localization, stage, depth of invasion, lymphovascular invasion and perineural invasion between the early and non-early recurrence groups. However, a K-ras mutation subgroup was significantly associated with early recurrence (p<0.001). Conclusions: Poor survival is associated with early recurrence for patients undergoing resection for non-metastatic colorectal cancer, as well as K-ras mutation.
Purpose: Neurofibromatosis 1 (NF1) is an autosomal dominant condition caused by an NF1 gene mutation. NF1 is also a multisystem disorder that primarily affects the skin and nervous system. The goal of this study was to delineate the phenotypic characterization and assess the NF1 mutational spectrum in patients with NF1. Methods: A total of 42 patients, 14 females and 28 males, were enrolled in this study. Clinical manifestations and results of the genetic study were retrospectively reviewed. Results: Age of the patients at the time of NF1 diagnosis was $15.8{\pm}14.6$ years (range, 1-62 years). Twelve patients (28.6%) had a family history of NF1. Among the 42 patients, $Caf\acute{e}$-au-lait spots were shown in 42 (100%), neurofibroma in 31 (73.8%), freckling in 22 (52.4%), and Lisch nodules in seven (16.7%). The most common abnormal finding in the brain was hamartoma (20%). Mental retardation was observed in five patients (11.9%), seizures in one patient (2.4%), and plexiform neurofibromas (PNFs) in four patients (9.5%). One patient with PNFs died due to a malignant peripheral nerve sheath tumor in the chest cavity. Genetic analysis of seven patients identified six single base substitutions (three missense and three nonsense) and one small deletion. Among these mutations, five (71.4%) were novel (two missense mutations: p.Leu1773Pro, p.His1170Leu; two nonsense mutations: $p.Arg2517^*$, $p.Cys2371^*$; one small deletion: $p.Leu1944Phefs^*6$). Conclusion: The clinical characteristics of 42 Korean patients with NF1 were extremely variable and the mutations of the NF1 gene were genetically heterogeneous with a high mutation-detection rate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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