• Journal of Plant Biotechnology
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• 제36권2호
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• pp.174-178
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• 2009

Presently, we report a simple, reproducible and high frequency plant regeneration in Hibiscus syriacus L. using axillary buds. H. syriacus was regenerated from axillary buds directly or through a callus phase. Regenerated shoots were directly induced from young and fresh axillary buds cultured on Murashige and Skoog medium (MS) supplemented with 0.01 mg/L of the growth regulator thidiazuron (TDZ) after 2 weeks of culture. Directly induced shoots were transferred to hormone-free MS medium and root development was observed after 6 weeks. On the other hand, old and stale axillary buds were regenerated to shoots via callus induction on MS medium containing 0.01–2 mg/L TDZ after 4 weeks. A TDZ concentration of 0.01 mg/L was most effective in callus formation. Green callus was transferred to MS medium containing 0.01 mg/L α-naphthalene acetic acid (NAA) and 0.5 mg/L benzylaminopurine (BA). After 4 weeks, callus had developed into multiple shoots. Plantlets were formed from 10 week cultures of single shoots on hormone-free MS medium. Regenerated plantlets were cultured on MS medium for one month and then transferred to pots containing garden soil. Potted plants were acclimatized for one month and grown to maturity under greenhouse conditions. The present study has shown that various concentrations of plant growth regulator can be effective for in vitro plant regeneration of H. syriacus. The direct and indirect regeneration protocol presented here will be useful for understanding the manipulation and propagation of H. syriacus.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제34권2호
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• pp.161-166
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• 2007

In vitro shoot regeneration and multiple shoot induction has been obtained from the stolen node explants in Eremochloa ophiuroides (Munro) Hack. The highest number of shoots ($10.66{\pm}0.21$) was observed from initial explants after one month culture duration on Murashige and Skoog (MS) medium containing 6-benzyladenine (BA: 0.5 mg/l). First generation shoot was excised and sub-cultured on the same fresh media for further multiplication of shoots. An enhanced number of second round shoots ($15.33{\pm}0.21$) was obtained compared to the initial culture media containing BA (0.5 mg/l). The number of shoots/stolon node was higher among all the concentrations of BA than kinetin (KN). In vitro regenerated shoots were successfully rooted in the phytohormone free MS medium. Plantlets generated with roots were transferred to pots containing compound mixture of soil and kept in green house conditions. Acclimatized plants showed 100% survival rate with normal morphology in green house conditions. The present study demonstrates the effect of explant and different plant growth regulators towards in vitro response in E. ophiuroides. Moreover, the study reveals the effect of cytokinin on induction of shoot number per stolen node explant in E. ophiuroides.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권1호
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• pp.63-68
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• 1998

정단 및 마디조직을 이용한 지황의 기내증식방안을 마련하기 위하여 일련의 시험을 실시하였다. 재생된 신초의 정단을 재배양하였을 경우 BA 5.0 mg/L에서 7.8개의 신초가 형성되었으며 투명화된 묘의 발생은 Gelrite 보다는 Bacto-agar 첨가구에서 감소하였다. 광도와 한천의 농도가 증가할수록 신초형성수 및 생장은 억제되었고 생체중 : 건물중의 비율도 감소하였다. 광도가 2000 lx일 때는 Bacto-agar 0.6-1.2%, 3,000 lx에서는 한천 0.4-0.6%에서 건전한 신초를 10개 이상 생산할 수 있었다. 활성탄소 0.1-0.3%첨가는 신초의 생장촉진과 뿌리형성에 촉진적으로 작용하였으며 투명화 발생률도 감소시켰으나 신초형성수는 현저히 감소시켰다. MS배지내 첨가되는 다량원소의 농도를 0.8-1.0배 하였을때 신초형성수 및 생장이 촉진되었다. 기관형성에 미치는 오옥신의 종류 및 농도별 효과를 조사한 결과 NAA나 IBA 보다는 IAA 0.3mg/L 와 BA 5.0mg/L를 혼합처리 하였을 때 증식률이 16배에 달하였다.

• 식물조직배양학회지
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• 제27권1호
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• pp.1-6
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• 2000

참외 (Cucumis melo L.)의 자엽 절편체로부터 캘러스 형성, 발근 및 신초의 형성에 효과적인 생장조절물질의 영향을 조사하기 위하여 cytokinin류의 BA, kinetin및 zeatin의 농도를 각각 0.5, 1.0 1.5 2.0 mg/L그리고 auxin류의 IAA와 NAA 0.1 mg/L를 공시하여 참외의 재분화 효율성을 증가시키고자 하였다. 캘러스 분화는 BA 2.0 mg/L와 NAA 0.1 mg/L를 혼용 처리한 MS배지에서 절편체 당 2,437.0mg으로써 가장 효율이 높았으나, 대부분이 황백색의 연약하고 부스러지기 쉬운 non-embryogenic callus였다. 발근은 kinetin 0.5 mg/L와 NAA 0.1 mg/L를 혼용 처리한 배지에서 97.9%로 가장 효율이 좋은 결과를 보였으나 신초가 전혀 발생하지 않았다. 신초의 형성은 BA 0.5 mg/L와 IAA 0.1 mg/L를 혼용한 배지에서 98.0%로써 가장 높았는데, 자엽절편체 내 엽맥의 절단부위에서 주로 유도되었으며, 이들은 대부분 multiple shoot를 형성하였다. 한편 BA의 함량을 동일하게 하고 auxin류의 IAA와 NAA의 함량을 저 농도로 처리한 결과 신초의 발생율이 향상되지 않았다. BA 0.5 mg/L와 IAA 0.1 mg/L를 혼용 처리한 배지에 자엽 절편체를 치상한 결과. 캘러스는 1주일만에 유도되었으며, 신초는 3주만에 형성되기 시작하였다. 2주 간격으로 2회의 계대배양을 실시한 후 MS 기본배지에서 발근시켜 배양 10주만에 완전한 소식물체를 획득하였다.

• 식물조직배양학회지
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• 제26권2호
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• pp.93-97
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• 1999

당근의 기내 증식에 있어서 계대배양을 반복하더라도 분열능과 재분화능에 차이가 없고 변이가 생기지 않는 순 원기배양법을 확립코자 하였다. 엽 원기 2개가 붙은 경정조직을 BA 2.0 mg/L 와 NAA 0.2 mg/L 를 첨가한 MS 기본 액체배지에 치상하고 24시간 강한 광선 아래 2rpm으로 수직 회전배양하였을 때 순 원기가 유기되고 덩어리로 자라났다. 순 원기 유기는 공여친의 유전자형과 재배 계절 및 발육단계의 영향을 거의 받지 않는 것으로 판단되었다. 이 순 원기 덩어리는 사방 2~3 mm정도의 크기로 순 원기가 유기된 배지에 계대배양 하였을때 잘 증식되었는데 표면에 작은 신초를 가진 것과 그렇지 않은 것, 그리고 캘러스의 3가지 형태로 분화하였다. 표면에 작은 신초를 가진 것이 역시 표면에 작은 신초를 가진 순 원기 덩어리로 증식되었다. 이 표면에 작은 신초를 가진 것이 1/2MS 기본배지에 KN 0.2-1.0 mg/L 과 IAA 0.2~1.0 mg/L 를 첨가한 고체배지에서 주로 식물체로 잘 분화하였다. 일단 순 원기가 유기되어 덩어리를 형성한 후에는 1년 동안에 8.7$\times$$10^{12}$개의 비율로 증식될 수 있을 것으로 계산되었다. 그리고 13번의 계대배양 후에도 증식능에 차이가 없었으며 염색체상의 이상도 없었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제10권4호
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• pp.259-262
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• 2002

The efficiency of regeneration of callus and explants from leaf and stem disks of Epimedium koreanum was examined on the MS media containing 2,4-D, NAA, Kinetin, BA and TDZ. Calli were formed on the 2mg/l 2,4-D media at the rate of 32% from leaf discs and 52% from stems. No callus was produced on the media which are containing BA or TDZ alone. The combination of 2,4-D and BA showed the effect on the formation of callus. The combination of 2mg/l 2,4-D and 0.lmg/l BA in the MS media had produced the highest percentage of callus formation, 50% from leaf discs and 40% from stems, respectively. The combination of 2mg/l 2,4-D and 1mg/1 BA in the MS media had affected the formation of callus in the rate of 40% from leaf discs and 25% from stems. The combined plant growth regulators of 2,4-D and BA increased the formation of calli from leaf discs, but single treatment of 2,4-D showed the highest callus formation from stems. Multiple shoots from leaf discs were formed on the media containing NAA, BA, kinetin, and TDZ. The highest number of multiple shoots were obtained 0.1mg/l NAA combined with 1mg/l kinetin. As a result, leaf discs or stems can be used for the mass propagation of Epimedium koreanum, but stem elongation of shoots from calli was not easy.

• 식물조직배양학회지
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• 제28권1호
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• pp.25-32
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• 2001

우리나라 주요 과수류중 하나인 포도의 경정배양을 통하여 증식재료로 이용할 수 있는 다아체의 형성 및 이들의 신장에 미치는 생장조절물질의 영향에 관해 검토하였다. 경정배양 시 재료의 살균은 5월 초순에 생육이 왕성한 신초를 채취하여 NaOCl 1%용액에 10분간 살균한 것에 비해 Wilson액에 5분간 침지 살균했을 때 생존율이 높았다. 다아체의 증식은 3/4 MS 기본배지에 NAA 0.1 mg/L와 BA 3.0mg/L에서 양호하였다. 다아체로부터 신초의 신장은 3/4 MS배지에 AdSO$_4$80 mg/L, NAA 0.1 mg/L와 BA를 1.0~2.0 mg/L 혼합한 배지에서 양호하였으며 품종간 생장조절물질의 적정농도 차이는 거의 없었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제43권1호
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• pp.104-109
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• 2016

Rosa rugosa is a medicinal, ornamental, and edible plant native to Eastern Asian countries, including Korea, Japan, and China. The aim of this study was to establish a system for biomass production and secondary metabolite accumulation during in vitro culture and acclimatization of Rosa rugosa. The highest rate of multiple shoot proliferation was achieved with $8.8{\mu}M$ benzyladenine (BA) (83.3%). However, the number of shoots (14.4 per explant) at $4.4{\mu}M$ BA was higher than that at $8.8{\mu}M$ BA. Compared to BA, a combination of thidiazuron (TDZ) and indole butyric acid (IBA) exhibited significantly lower shoot induction, with only 50.0~79.2% and 4.2~16.7% relative shoot formation, respectively. During acclimatization, shoots were sampled every week and their total phenolic contents were analyzed. Among various growth factors, fresh weight showed the most dramatic increase from the 3rd week (88.0 mg/plant) to 4th week (132.7 mg/plant). Total phenolics and flavonoids contents were the highest at $1^{st}$ week of acclimatization. Depending on developmental stages, total phenolics and flavonoids contents were higher in 1-yr-old shoots grown ex vitro than in those of older field-grown or in vitro-grown plants. Amongst different ages of field grown plants, 6-year-old plants, the oldest in this study, showed the lowest content in total phenolics.

• 식물조직배양학회지
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• 제21권5호
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• pp.277-280
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• 1994

생장점배양하여 얻어진 소수의 식물체를 기내 재배양하여 건전 우량마늘을 대량으로 증식시킬 수 있었다. MS 기본배지에 서당 8%, NAA 0.1 mg.L 첨가된 배지에 지엽을 뚫고 나온 직후의 주아 생장점을 5월 중순에 치상하면 shoot의 형성 없이 기내인경이 직접 형성되어 배양 기간 및 노력을 절약할 수 있었다. 또한 총포 내의 미숙주아 및 receptacle을 6월 상순경에 0.1 mg/L NAA+2mg/L BA 혹은 1 mg/L NAA + 10 mg/L BA가 첨가된 MS 기본배지에 배양하면 multiple shoot가 유도되었다. 특히 여러 화기 재료중 receptacle에서 평균 5.8개의 shoot가 분화되어 1개의 총포 내에서 50개 이상 분화되었다. 따라서 총포배양에 의한 식물체 생산은 우량마늘의 대량번식 체계의 한 수단으로 이용할 수 있었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제49권3호
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• pp.213-221
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• 2022

Wild garlic (Allium victorialis var. platyphyllum, AVVP) is a nontimber forest product used as an edible and medicinal vegetable. AVVP is usually propagated form offspring bulbs but it takes a long time to harvest. Using tissue culture technology could overcome this problem. This study investigated the optimal conditions for shoot multiplication, root growth, and plant growth by scooping AVVP bulbs. AVVP bulbs harvested from Ulleung Island, Korea, the main producer of AVVP, were surface-sterilized and used for in vitro propagation. Shoot multiplication was performed by the scooping method. More than five multiple shoots were induced from scooped tissue in Quoirin and Lepoivre (QL) medium containing plant growth regulators (PGRs); the maximum number of multiple shoots were induced from scooped tissue in QL medium containing 0.45 μM thidiazuron (TDZ) after 16 weeks of culture. Roots were induced directly at the base of the shoots in all treatments. In vitro rooting depended on the type of PGRs, and the best root-inducing treatment was QL medium containing 9.84 μM indole-3-butyric acid (IBA). Plants with in vitro roots were transferred to pots containing artificial soil and successfully acclimatized for 4 weeks. The acclimatized plants showed a survival rate of 80% after 20 weeks and gradually promoted growth depending on the acclimatization period. The results of this study will be of great help to AVVP dissemination through sustainable mass propagation.