본 연구는 포자체 배양을 통하여 참쇠고비의 효율적인 번식방법을 구하고자 수행되었다. 배양절편의 기원(근경, 엽병, 엽신)과 절편의 균질화가 신초 계생에 미치는 영향을 조사한 결과, 오직 근경 조직에서만 기관발생능력이 관찰되었고, 식물체 재생은 배양재료를 균질화함으로써 더욱 촉진되었다. MS배지의 무기물 농도를 2배로 첨가한 배지에서 신초의 증식과 생장이 활발히 이루어졌다. 신초 재생에 적합한 배지의 질소함량은 MS배지의 1/2배 수준 이었고, 적정 sucrose농도는 1%였다. 또한 배지에 $NaH_2PO_4$를 첨가함으로써 재생된 식물체의 생육이 전반적으로 촉진되었다. 근경절편의 기관형성능력은 kinetin과 IBA를 혼용 처리함으로써 촉진되었으며, $0.1\sim0.2%$의 활성탄과 생장조절물질을 혼용 처리한 결과, 다수의 싹이 뭉친 듯이 보이는 primordia 형태의 발달이 억제되었고, 포자체의 정상적인 형태형성이 향상되었다.
생장점배양하여 얻어진 소수의 식물체를 기내 재배양하여 건전 우량마늘을 대량으로 증식시킬 수 있었다. MS 기본배지에 서당 8%, NAA 0.1 mg.L 첨가된 배지에 지엽을 뚫고 나온 직후의 주아 생장점을 5월 중순에 치상하면 shoot의 형성 없이 기내인경이 직접 형성되어 배양 기간 및 노력을 절약할 수 있었다. 또한 총포 내의 미숙주아 및 receptacle을 6월 상순경에 0.1 mg/L NAA+2mg/L BA 혹은 1 mg/L NAA + 10 mg/L BA가 첨가된 MS 기본배지에 배양하면 multiple shoot가 유도되었다. 특히 여러 화기 재료중 receptacle에서 평균 5.8개의 shoot가 분화되어 1개의 총포 내에서 50개 이상 분화되었다. 따라서 총포배양에 의한 식물체 생산은 우량마늘의 대량번식 체계의 한 수단으로 이용할 수 있었다.
This study was conducted to examine effects of plant growth regulators and light resources on the formation of multiple shoot and plant regeneration of Hovenia dulcis var. koreana Nakai. Stem and shoot tip were cultured on MS medium or WPM supplemented with various plant growth regulators. At the single treatment, the highest shoot formation was obtained when stem explants were cultured on WPM supplemented with kinetin $1.0mg{\cdot}L^{-1}$. MS medium containing NAA 0.1 and TDZ $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ gave the best results for shoot induction rate and shoot growth in combination treatments. Of the BAP and kinetin tested, BAP $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ on WPM was found to be more effective for shoot growth from shoot tip. Under white fluorescent light treatment, shoot growth was much higher than blue, red LED treatments. Root induction from in vitro growth of plantlet was the best on WPM supplemented with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA. The results suggest that selection of plant growth regulators and light resources could be important factor to achieve an efficient in vitro growth.
잡종 사기나무의 기내 대량증식을 목적으로 줄기절간 유래의 기내 및 기외시료를 이용하여 다경줄기 유도에 관여하는 식물생장 조절물질의 효과에 대하여 조사하였다. 기외시료의 측아를 제거한 다음 20에서 30$\mu$M 의 zeatin이 함유된 WPM 배지에 6주간 배양하였을때 각각 11개와 13개의 다경줄기가 유도되었다. 그러나 기외시료의 측아가 붙어있는 상태에서 기내배양하여 2주후에 측아를 제거하고 동일 배지에 배양하였을 경우에는 BA가 1.0에서 2.0 $\mu$M 함유된 배지에서도 13개와 15개의 다경줄기를 유도할 수 있었으며, 특히 이때 생산된 줄기의 상태는 아주 건전한 것으로 나타났다. 기내줄기를 사용하였을때는 20 $\mu$M의 zeatin을 처리하였을때 가장 많은 줄기를 생산할 수 있었으며, 생산된 조직배양묘는 일정기간 순화를 시킨 후 온실이나 포지에 식재가 가능하였다.
쇠무릎(A. japonica) 다량증식 방법의 일환으로 액아를 이용한 multiple shoot유도를 위한 최적 조건을 조사하였다. 기내에서 증식하고 있는 식물체로부터 액아를 적출하여 NAA, 2,4-D 및 BA가 여러 농도로. 첨가된 MS 배지(3% sucrose, 0.2% gelrite)에서 6주 간 배양한 결과, shoot의 발생은 1mg/L NAA와 2mg/L BA가 첨가된 처리구에서 액아 당 평균 25.8개로 가장 많았다. 신초의 발생 빈도는 조금 낮지만 발생된 신초가 완전한 식물체로 되기 위한 크기를 고려할 때의 조합은 0.5 mg/L NAA와 1 mg/L BA가 첨가된 처리구에서 액아 당 19.7개의 신초가 발생하여 가장 좋은 결과를 얻었다. 한편 발생된 신초는 절취하여 0.1mg/L IBA가 첨가된 1/2 MS 배지에서 배양했을 때 뿌리의 발생과 신장이 가장 양호하였으며, 식물체의 생육도 왕성하였다. 발근된 식물체를 기외로 이식 후 활착시켜 쇠무릎의 액아 배양을 통한 다량증식의 가능성을 확인하였다.
기관배양을 통한 대량증식 방법의 일환으로 액아배양을 이용한 multiple shoot 유도 조건을 조사하였다. 기내 배양 중인 식물체로부터 액아를 절취하여 TDZ와 BA를 각각 농도 별로 첨가한 MS배지와 1/2 MS배지에서 6주간 배양한 결과, MS기본배지에 $0.005\;mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ가 첨가된 처리구에서 효과가 가장 양호하였다. 한편 발생된 신초를 $1\;mg{\cdot}L^{-1}\;GA_3$와 $0.5\;mg{\cdot}L^{-1}$ IBA가 첨가된 1/2 MS배지에 배양했을 때 뿌리의 발생과 신장이 가장 양호하였다. 발근된 식물체를 포트에서 순화시켜 온실로 이식하였을 때 90%에 가까운 생존율을 보였으며 형태적인 변이 없이 생장하였다. 이상의 결과는 액아유도를 통한 대량번식의 가능성을 제시한다.
An efficient protocol for in vitro multiple shoot bud induction and plant regeneration from mature green cotyledon derived callus tissues of Acacia sinuata has been developed. Callus formation occurs at all the concentrations of thidiazuron (TDZ) in Murashige and Skoog's (MS) medium, but 0.6 ${\mu}M$ proved to be the best with maximum callus formation frequency. Supplementation of TDZ in combination with indole-acetic acid (IAA) in MS media accelerates shoot bud organogenesis in differentiating callus tissues with 60-70% conversion of shoot buds into shoot Most efficient shoot organogenesis was recorded when TDZ induced calli were subcultured at different concentrations of 6-benzyla-denine (BA). Optimum shoot bud induction and plant regeneration from callus was achieved when 0.6 ${\mu}M$ (TDZ) induced calli were subcultured at 3.0 ${\mu}M$ (BA) where $16.6{\pm}0.74$ shoots/unit callus on obtained. Rooting in in vitro differentiated shoots was achieved when transferred to medium containing different concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in full & half strength MS medium. The well rooted plantlets were hardened and transferred to net house with 90% survival rate.
콩에서의 조직배양 가능성을 알아보고자 콩 유묘를 기내에서 배양시킨 뒤, 여러 부위를 채취하여 각기 다른 배지 치상한 결과는 다음과 같다. 1. 줄기정단조직 배양에서는 대부분 shoot가 분화되어 완전한 식물체를 얻을 수 있었다. 2. 자엽절 조직배양에서는 multiple shoots가 나타나 대량증식에 유용했으나 배지에 따른 영향이 컸다. 3. 배축 및 상배축 조직배양에서는 callus만 분화되엇다. 4. 엽조직배양에서는 callus 분화 후 계대배양했을 때 shoot가 분화되었으나 완전한 식물체를 얻기는 힘들었다.
Leaf explants of the cucumber (Cucumis sativus L.) were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with various concentrations of $\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP). Direct shoot orgnogenesis as well as callus formation with somatic embryos and multiple shoots was observed from leaf explants of cvs. Shinhukjinju and Chungjang. The highest frequency of shoot formation 80% was observed on MS medium supplemented with NAA/BAP (5.0 ${\mu}{\textrm}{m}$/2.5 ${\mu}{\textrm}{m}$), with explants forming 3-7 shoots. Shoots formation occured within 3 to 4 weeks. Only one subculture of calli was required for plant regeneration on normal growth regulator-free medium. Plantlets transferred to soil developed into plants of normal appearance, which flowered and set fruits.
Kim Chang-Kil;Oh Jung-Youl;Jee Sun-Ok;Chung Jae-Dong
Journal of Plant Biotechnology
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제5권2호
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pp.115-119
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2003
To determine the appropriate concentrations of nutrients and growth regulators for shoot proliferation and root initiation, several rose hybrid tea cultivars were cultured. Cultured shoot tips and lateral buds from different cultivars proliferated multiple shoots on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0 to 4 mg/L BA and 0 to 0.05 mg/L NAA. The ability of the explants to proliferate shoots and initiate roots was affected by genotype, the nodal position of explant, the strength of MS basal medium and growth regulators used. The buds nearest the apex exhibited the slowest rate of development. Most cultivars had the highest shoot proliferation when cultured on MS medium with 2 mg/L BA and 0.01 mg/L NAA, but the degree varied by cultivars. Root development was enhanced by lowering the concentration of MS salts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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