Avascular necrosis of the femoral head (ANFH) is commonly observed in patients treated with excessive glucocorticoid (GC). Single administration of lipopolysaccharide (LPS) has shown to induce immune stimulatory factors. However, the effect of repeated administration of LPS on GC-induced ANFH has not been studied. Thus, the purpose of this study was (i) to examine the cytokine profile induced by repeated LPS administrations and (ii) to test the effect of repeated LPS treatments on GC-induced ANFH. A mouse necrosis model of ANFH was designed by chronic GC administration with co-treatment of LPS. Mice body weights in the LPS/prednisolone (PDN) co-treated group were lower than that of the untreated control group, but spleen weights were greater than the control group. The levels of IL-6, $TNF{\alpha}$, and IL-33 in the liver and spleen of the LPS/PDN group were lower than the untreated control group, whereas $TNF{\alpha}$ level in the femoral head of the LPS/PDN group increased. Collectively, the effect of repeated LPS on the pathogenesis of GC-induced ANFH was associated with the $TNF{\alpha}$ level in the femoral head, but the pathogenesis did not correspond to cytokine levels in immune tissues.
In order to compare the suppressive effect of galangin on the genotoxicity by N-methyl-N-nitrosourea (MNU) or benzo[a]pyrene B(a)P, in vivo micronycleus test using mouse peripheral blood and in vitro sister chromatid exchange(SCE) test using mouse spleen lymphocytes were performed. MNU or B(a)P-induced micronucleated reticulocytes in vivo was decreased by the simultaneous treatment of galangin. MNU or B(a)P-induced SCEs in vitro was also decreased by the simultaneous treatment of galangin. On the other hand, the determinations of [$^3$H]MNU-induced total DNA binding and methylated DNA were performed to find out the mechanism of action. [$^3$H]MNU-induced total DNA binding was inhibited by the treatment of galangin in calf thymus DNA. HPLC analysis of DNA hydrolysates showed that galangin caused a decrease of 7-methyl guanine and $O^{6}$-methyl guanine in calf thymus DNA. To elucidate the action mechanism of galangin against B(a)P, alteration of B(a)P metabolism was studied. Galangin inhibited B(a)P metabolism in the presence of S-9 mix and decreased B(a)P-DNA binding in calf thymus DNA with S-9 mix.
Kim, In-Hae;Hyun, Jin-Won;Lee, Sang-Hyun;Ha, Jong-Myung;Ha, Bae-Jin;Lee, Jae-Hwa
Environmental Mutagens and Carcinogens
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v.26
no.3
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pp.89-92
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2006
To enhance our understanding of immunological stimulating effects through the pathway by which nitric oxide (NO) activity and alkaline phosphatase(ALP) enzyme activity from the marine algae, Ulva lactuca, we have investigated NO activity by using mouse RAW264.7 cell line. And ALP enzyme activity performed by spleen of ICR mouse. The results showed that NO activity of the $H_2O$ fraction is the most effective than activities of other solvent fractions.
Avian infectious bronchitis virus(IBV) was propagated in SPF eggs and purified by sucrose density gradient centrifugation in order to prepare the antigen. Several fusions were made between mouse myeloma cells and spleen cells from BALB/c mouse immunized with IBV antigen and two hybridoma clones producing specific monoclonal antibody(MCA) against the IBV were established. The MCAs were classified as IgG type and revealed no neutralizing and hemagglutination inhibition activity. Using the MCA IBV antigen was detected by IFA method in tracheal smears made from chickens infected with IBV during the experimental period of 10 days.
Ki, Byeong Seong;Park, Miree;Woo, Yunmi;Lee, Woo Sik;Ko, Jung Jae;Choi, Youngsok
Reproductive and Developmental Biology
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v.39
no.2
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pp.43-47
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2015
Sirtuin proteins are evolutionary conserved Sir2-related $NAD^+$-dependent deacetylases and regulate many of cellular processes such as metabolism, inflammation, transcription, and aging. Sirtuin contains activity of either ADP-ribosyltransferase or deacetyltranfease and their activity is dependent on the localization in cells. However, the expression pattern of Sirtuins has not been well studied. To examine the expression levels of Sirtuins, RT-PCR was performed using total RNAs from various tissues including liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Sirtuins were highly expressed in most of tissues including the testis. Immunostaining assay showed that Sirt1 and Sirt6 were mainly located in the nucleus of germ cells, spermatocytes, and spermatids in the seminiferous tubules, whereas Sirt2 and Sirt5 were exclusively present in the cytoplasm of germ cells and spermatocytes. Our results indicate that Sirtuins may function as regulators of spermatogenesis and their activities might be dependent on their location in the seminiferous tubules.
Kim, Min;Ki, Byeong Seong;Hong, Kwonho;Park, Se-pill;Ko, Jung-Jae;Choi, Youngsok
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.29
no.7
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pp.944-951
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2016
Tdrd12 is one of tudor domain containing (Tdrd) family members. However, the expression pattern of Tdrd12 has not been well studied. To compare the expression levels of Tdrd12 in various tissues, real time-polymerase chain reaction was performed using total RNAs from liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Tdrd12 mRNA was highly expressed in testis. Antibody against mouse TDRD12 were generated using amino acid residues SQRPNEKPLRLTEKKDC of TDRD12 to investigate TDRD12 localization in testis. Immunostaining assay shows that TDRD12 is mainly localized at the spermatid in the seminiferous tubules of adult testes. During postnatal development, TDRD12 is differentially expressed. TDRD12 was detected in early spermatocytes at 2 weeks and TDRD12 was localized at acrosome of the round spermatids. TDRD12 expression was not co-localized with TDRD1 which is an important component of piRNA pathway in germ cells. Our results indicate that TDRD12 may play an important role in spermatids and function as a regulator of spermatogenesis in dependent of TDRD1.
Background: Oral tolerance is defined by the inhibition of immune responsiveness to a protein previously exposed via the oral route. Protein antigens exposed via the oral route can be absorbed through the mucosal surfaces of the gastrointestinal tract and can make physical contact with immune cells residing in the intestinal lamina propria (LP). However, the mechanisms of oral tolerance and immune regulation in the intestines currently remain to be clearly elucidated. Methods: In order to determine the effect of oral protein antigen intake (ovalbumin, OVA) on the intestinal LP, we assessed the expression profile of the T cell receptor and the co-receptors on the cells from the intestines of the tolerant and immune mouse groups. Results: We determined that the proportion of OVA-specific B cells and ${\gamma}{\delta}$ T cells had decreased, but the CD8${\alpha}{\beta}$ and D8${\alpha}{\alpha}$ T cells were increased in the LP from the tolerant group. The proportion of CD8+ T cells in the spleen did not evidence any significant differences between treatment groups. Conclusion: These results indicate that CD8+ T cells in the intestinal LP may perform a regulatory role following antigen challenge via the oral route.
Centrobin/Nip2 was initially identified as a centrosome protein that is critical for centrosome duplication and spindle assembly. In the present study, we determined the expression and subcellular localization of centrobin in selected mouse tissues. Immunoblot analysis revealed that the centrobin-specific band of 100 kDa was detected in all tissues tested but most abundantly in the thymus, spleen and testis. In the testis, centrobin was localized at the centrosomes of spermatocytes and early round spermatids, but no specific signal was detected in late round spermatids and elongated spermatids. Our results also revealed that the centrosome duplication occurs at interphase of the second meiotic division of the mouse male germ cells. The centrobin protein was more abundant in the mitotically active ovarian follicular cells and thymic cortex cells than in non-proliferating corpus luteal cells and thymic medullary cells. The expression pattern of centrobin suggests that the biological functions of centrobin are related to cell proliferation. Consistent with the proposal, we observed reduction of the centrobin levels when NIH3T3 became quiescent in the serum-starved culture conditions. However, a residual amount of centrobin was also detected at the centrosomes of the resting cells, suggesting its role for maintaining integrity of the centrosome, especially of the daughter centriole in the cells.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2000.05a
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pp.446-446
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2000
Specific polyclonal and/or monoclonal antibodies (MAbs) to immunoglobulins (Igs) and their subunits have proved to be valuable tools in immunological research and in immunological assays. In this study, we developed and characterized MAbs against flounder serum Igs. To obtain the pure flounder serum Igs, mouse IgG (mIgG) was immunized to flounder. Flounder Igs were purified by using mIgG-agarose affinity column chromatography. The structure of purified flounder Ig was observed, on denatured SDS-PAGE, to be composed of two heavy chains (77 and 72 kd) and two light chains (28 and 26 kd). MAbs were produced by fusion of myeloma cells (SP2/0) with Balb/c mouse spleen cells previously primed with the flounder Igs. Finally, three hybridoma clones, FIM 511, FIM 519 and FIM 562 were established to recognize both 2 heavy chains, 26 kd of light chain and 28 kd of light chain, respectively. On the other hand, the flounder immune sera collected on the weekly basis were tested on ELISA and immunoblot analysis whether boosting effect is present in flounder humoral immune system. As a result, the secondary immune response in flounder was ascertained on ELISA, but not on immunoblot analysis. Further, we observed an alteration of serum protein levels following immunization. Our MAbs and basic information on flounder humoral immune system obtained in this study will be helpful to control and monitor the efficiency of fish vaccines and therapeutic process of flounder diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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