• 동의생리병리학회지
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• 제38권1호
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• pp.32-37
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• 2024

The aim of this study was to investigate the role of Daesiho-tang (Da Chai Hu-Tang) water extract (DSTE) in regulating chronic stress-induced cancer progression, focusing on its activity in modulating tumor-associated macrophages (TAMs). Different stimuli can polarize TAMs into immune-stimulating M1 macrophages or immunosuppressive M2 macrophages. During cancer progression, M2 phenotype increases and supports tumor growth, angiogenesis and metastasis. Notably, chronic stress-induced catecholamines promote M2 macrophage polarization. In this study, we investigated whether DSTE regulates norepinephrine (NE)-induced M2 macrophage polarization in RAW 264.7 mouse macrophage cells. Even though NE itself did not increase the expression of M2 markers, the conditioned media of NE-treated 4T1 mouse breast cancer cells (NE CM) significantly up-regulated M2 markers in RAW 264.7 cells, suggesting that NE-regulated cancer cell secretome stimulated M2 polarization. However, such increase was abrogated by DSTE. NE CM also induced phosphorylation of signal transducer and activator of transcription 6 (STAT6) in RAW 264.7 cells, which was clearly reversed by pretreatment with DSTE, demonstrating that DSTE inhibited M2 polarization by inactivating STAT6. Finally, M2-polarized RAW264.7 cells by NE CM markedly increased the migration of 4T1 cells. However, such increase was completely reversed by co-treating RAW264.7 cells with NE CM and DSTE, indicating that DSTE attenuated cancer cell migration by blocking M2 polarization. Taken together, our results suggest a probable use of DSTE for cancer patients under chronic stress by regulating M2 macrophage polarization.

• 대한본초학회지
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• 제21권2호
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• pp.165-173
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• 2006

Objectives : Coptidis Rhizoma has been known traditional medicine with antimicrobial activities. We investigated inhibitory effects of Coptidis Rhizoma extract on lipopolysaccharide(LPS)-induced nitric oxide production from mouse macrophages. Methods : After Coptidis Rhizoma extract was pretreated in BV2, mouse brain macrophages and RAW264.7 mouse macrophages, cells were activated with LPS. To investigate cytotoxicity Coptidis Rhizoma extract, cell viability was measured by MTT assay. The production of nitric oxide(NO) and inducible nitric oxide synthase(iNOS) was determined in each culture supernatant and mRNA by Griess reaction and RT-PCR. The production of $TNF-{\alpha}$ from cells was measured by ELISA. Results : Coptidis Rhizoma extract significantly inhibited LPS-induced NO production in BV2 and RAW264.7 cells. Coptidis Rhizoma extract also greatly suppressed mRNA expression of iNOS in BV2 and RAW264.7 cells activated by LPS. Conclusion : These data suggests that Coptidis Rhizoma extract may have an anti-inflammatory effect through the inhibition of NO production.

• 대한본초학회지
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• 제37권5호
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• pp.53-61
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• 2022

Objectives : The aim of this study was to investigate the effect of Baicalein (BA) on the production of hydrogen peroxide in lipoteichoic acid-stimulated RAW 264.7 mouse macrophages. Methods : Lipoteichoic acid-stressed RAW 264.7 mouse macrophages were incubated with baicalein at concentrations of 50 and 100 µM. Incubation time is 30 minutes, 2 h, 12 h, and 18 h. After incubation, The production of hydrogen peroxide in RAW 264.7 mouse macrophages was measured with dihydrorhodamine 123 assay. Streptococcus aureus lipoteichoic acid and Streptococcus pyogenes lipoteichoic acid were used as cell-stimulating lipoteichoic acid. Cell viabilities were measured with a modified MTT assay. Berberine, indomethacin, and gallic acid were incubated for the same time as the comparative materials. Results : BA at the concentration of 50 and 100 µM did not show cytotoxicity on RAW 264.7 mouse macrophages for 24 h incubation. For 30 minutes, 2 h, 12 h, and 18 h incubation, BA at the concentration of 50 and 100 µM significantly inhibited the production of hydrogen peroxide in RAW 264.7 mouse macrophages stimulated by Streptococcus aureus lipoteichoic acid (p < 0.05); also, BA at the concentration of 50 and 100 µM also inhibited the productions of hydrogen peroxide in RAW 264.7 mouse macrophages stimulated by Streptococcus pyogenes lipoteichoic acid significantly (p < 0.05). Conclusions : BA might have anti-bacterial activity related to its inhibition of hydrogen peroxide production in lipoteichoic acid-stimulated RAW 264.7 mouse macrophages.

• 디지털융복합연구
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• 제16권11호
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• pp.613-620
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• 2018

상엽 추출물의 항염 효능을 연구하고자 하였다. 상엽을 열수 추출하여 제조한 시료를 대상으로 RAW 264.7 macrophage cells를 24시간 배양하여 세포생존율과 LPS로 유발된 RAW 264.7 macrophage cells의 일산화질소(NO) 생성증가, $IL-1{\alpha}$, IL-6 그리고 IL-10 등의 사이토카인 생성증가에 미치는 영향을 측정하였다. 상엽 추출물의 MTT assay를 수행한 결과 상엽 추출물은 대식세포의 생존율에는 크게 영향을 주지 않았다. LPS로 활성화된 대식세포의 일산화질소(NO)의 생성증가를 $25{\mu}g/mL$ 이상의 농도에서 농도 의존적으로 유의하게 억제시켰다. 또한 LPS로 유발된 대식세포에 염증과 연관된 사이토카인인 $IL-1{\alpha}$, IL-6의 생성증가를 $50{\mu}g/mL$ 이상의 농도에서 농도 의존적으로 유의하게 억제하는 등 항염효과를 가지고 있는 것으로 나타났다. 본 연구 결과는 상엽이 건강 친화적인 기능성 소재로 활용도가 높을 것으로 기대된다. 또한 향후 지속적인 연구를 통한 대식세포를 항염증과 관련된 신호전달경로를 확인하는 추가 실험이 필요하다고 사료된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권1호
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• pp.5-14
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• 2003

Objective: Present study was aimed to verify the effect of granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) in the preimplantation development of mouse embryos and the involvement of the mitogen activated protein kiase (MAPK) in the GM-CSF signaling. Methods: Two-cell embryos were cultured for 96 h in the presence or absence of GM-CSF (0, 0.4, 2, 10 ng/ml) and PD98059, a MEK inhibitor (10 ${\mu}M$). Morphological development, cell number per blastocyst, and apoptotic nuclei, were eamined. MAPK activity of embryonic immunoprecipitate by MAPK (ERK1/2) antibody was measured by in vitro phosphorylation of myelin basic protein. Results: At post hCG 122 h the embryonic development among the experimental groups was significantly different (p=0.018). The rate of blastocyst development and cell number per embryo were the highest in 2 ng/ml GM-CSF treatment group. The percent of apoptotic cells of the GM-CSF-treated embryos was the lowest among the group. In blastocysts, GM-CSF treatment transiently increased MAPK activity. PD098059 attenuated the effect of GM-CSF on the morphological development, increase in cell number per blastocyst, down regulation of apoptosis, and upregulation of MAPK activity, suggesting that activation of MAPK cascade possibly mediated the embryotropic effect of GM-CSF. Conclusion: This result suggested that GM-CSF potentiated the development of preimplantation mouse embryos by activation of MAPK.

• 대한화장품학회지
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• 제20권1호
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• pp.25-36
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• 1994

Gram 음성균의 세포벽 성분인 lipopolysaccharide는 각종 세포에서의 prostaglandin 합성을 증진 시키며 이는 cyclooxygenase-2의 선택적 발현에 기인한다는 사실이 이미 보고된 바 있다. 본 연구에서는 mouse peritoneal marophage를 대상으로 하여 LPS의 prostaglandin 합성 증진 작용에 대한 특성으로 검토함으로써, COX-2에 대한 선택적 저해제 검색에 이용될 수 있는지 그 가능성을 확인코자 하였다. LPS는 peritoneal macrophage에 처리시 약 8시간 정도의 lag time을 보인 후 prostaglandin 합성을 현저히 증진 시켰으며, 이는 주로 COX 활성의 증가에 기인하는 것으로 추정되었다. 또한 LPS의 작용은 항염증제인 dexamethasone에 의해서 강하게 억제 되었으며 metabolic labeling 결과 이는 COX-2의 생합성을 억제하는데 기인하는 것으로 확인되었다. 따라서 mouse peritoneal macrophage에서의 LPS에 의한 prostaglandin 합성 증진 작용은 rat alveolar macrophage와 정성적으로 동일함을 확인할 수 있었으며, 본 실험 조건은 COX-2에 대한 선택적 저해제 검색에 응용될 수 있음을 확인 하였다. 본 실험 조건하에서 비스테로이드성 항염제인 ketoprofen의 작용을 검토한 결과 ketoprofen은 COX-1에 비교적 선택적인 저해 작용을 보이는 것으로 추정 되었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제47권4호
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• pp.451-459
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• 1999

배 경 : 패혈증에서 과도한 활성산소종의 생성은 급성 폐손상의 병리 기전에 중요한 역할을 한다. Catalase 및 MnSOD 등의 항산화 단백은 패혈증 환자의 혈청내 증가하며 급성호흡곤란증후군의 발생 예측 인자 및 패혈증의 예후 인자로 알려져 있다. Peroxiredoxin(Prx) 는 최근 독특하고 중요한 세포내 항산화 단백으로 알려져 있다. 본 연구는 대식세포인 mouse monocyte-macrophages(RAW 264.7) 세포에 산화 스트레스 및 내독소 처리후 Prx I 및 Prx II의 발현 평가하고 패혈증 동물 모델에서 복강세척액 및 기관지폐포세척액내 Prx I, Prx II 및 Trx의 양을 측정하였다. 방 법 : Prx I, Prx II 및 Trx에 대한 특이 항체를 이용하여 immunoblot 분석으로 호중구, 대식세포 및 적혈구에 이들의 분포를 평가하였다. Mouse monocyte-macrophages 세포에 $5\;{\mu}M$ menadione 및 1 mg/ml lipopolysaccharide(LPS) 을 처치하여 Prx I 및 Prx II의 발현을 평가하였으며 6 mg/Kg LPS를 복강내 투여하여 유발한 복강내 패혈증 동물의 복강세척액내 Prx I, Prx II 및 Trx의 양을 측정하였으며 복강내 패혈증 동물 및 5 mg/Kg LPS를 정맥내 투여하여 유발한 정맥내 패혈증 동물에서 기관지폐포세척액내 Prx I, Prx II 및 Trx을 측정하였으며 폐장의 염증 정도와 비교하였다. 결 과 : Prx I 및 Prx II의 분포는 호중구, 폐포대식세포 및 적혈구에서 서로 다른 양상을 보였다. Mouse monocyte-macrophages 세포에 $5\;{\mu}M$ menadione 및 $1\;{\mu}g/ml$ lipopolysaccharide을 처치하였을 때 Prx I 발현은 증가하였으나 Prx II 발현은 변화하지 않았다. 복강내 패혈증 동물에서 복강세척액내 Prx I, Prx II 및 Trx의 양은 증가하였으나 복강내 패혈증 및 정맥내 패혈증 동물에서 기관지폐포세척액내 폐장 염증 정도와 관계없이 Prx I, Prx II 및 Trx의 양은 증가하지 않았다. 결 론 : 세포내 항산화 단백으로서 mouse monocyte-macrophages 세포에서 Prx I의 발현은 산화 스트레스 및 내독소 처치후 증가한다. Prx I, Prx II 및 Trx양은 패혈증 동물 모델에서 국소 염증 부위에서 증가하나 손상된 폐장에서는 증가하지 않는다.

• 대한영양사협회학술지
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• 제12권1호
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• pp.82-88
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• 2006

This study was performed to evaluate the effect of Sorghum bicolor L. Moench(Sorghum, su-su) extracts on mouse immune cell activation. As ex vivo experiment, different concentrations(0, 50, 500mg/kg B.W.) of Sorghum bicolor L. Moench water extracts were orally administrated into mouse every other day for four weeks. The proliferation of mouse splenocytes, the number of plaque forming cells(PFC) and the cytokine IL-1β production by activated macrophage were used as indices for immunocompetence. Splenocyte proliferation was enhanced in mouse orally administrated with 50mg/kg B.W./day concentration compared to that of control group. Especially, the highest proliferation of spleoncyte was seen in the mouse orally administrated at the concentration of 50mg/kg B.W./day. The number of plaque forming cells(PFC) to SRBC were significantly enhanced when compared with control group. Also, the mouse of Sorghum bicolor L. Moench water extracts 50mg/kg B.W./day supplementation group with LPS stimulation enhanced level of IL-1$\beta$ cytokine production. This study suggest that supplementation of Sorghum bicolor L. Moench water extracts may enhance the immune function by regulating the splenocytes proliferation, increasing the number of PFC and enhancing the cytokine production by activated macrophage.

• 대한한의학방제학회지
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• 제5권1호
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• pp.169-178
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• 1997

동의학(東醫學)에서는 질병의 발생에 대하여 정기(正氣)의 강약(强弱)에 그 관건(關鍵)이 있다하였다. 그리하여 모든 질병의 치료에 있어서도 정기(正氣)의 회복에 중점을 두는 부정법(扶正法)이나 거사법(祛邪法)을 사용하면서도 정기(正氣)에 손상(損傷)을 입히지 않도록 많은 관심을 기우리고 있다. 암(癌)의 치료 또한 정기(正氣)가 얼마만큼 보충되는가에 따라 항병능력(抗病能力)이 항진(亢進)된다할 수 있을 것이다. 현재 국내외적(國內外的)으로 악성종양(惡性腫瘍)을 치료하기 위하여 다방면으로 연구를 하고 있으며, 또한 실제로 사용하고 있는 치료방법들로는 수술요법(手術療法) 방사선요법(放射線療法) 면역료법(免疫療法) 화학요법(化學療法)등이 있지만 아직까지는 미흡한 상태라 할 수 있을 것이다. 현재 일반적으로 항암제(抗癌劑)를 이용한 화학요법(化學療法) 등이 사용되고 있고, 면역료법(免疫療法)을 위한 많은 방법들이 연구되고 있어 본 저자(著者)들은 천문동(天門冬)이 면역세포(免疫細胞)의 증식(增殖)을 촉진시켜주면서 항암작용(抗癌作用)이 있을 것으로 사료(思料)되는 바 피부암세포(皮膚癌細胞)인 A431 cell line과 골수암세포(骨髓癌細胞)인 KHOS-NP cell line에 천문동(天門冬)을 투여(投與)하여 암세포(癌細胞)의 증식(增殖)을 살펴보고, 면역세포(免疫細胞)인 T cell과 B cell의 증식(增殖)을 살펴보았다. 또한 복강내(腹腔內) macrophage에서 분비되는 NO의 양(量)을 In vitro와 In vivo실험(實驗)을 통하여 살펴보았고, T cell의 apoptosis 및 subpopulation의 양(量)을 관찰하였다. 이 결과(結果) 천문동(天門冬)은 A431 cell 및 KHOS-NP cell에 항암작용(抗癌作用)을 보였고, T-cell의 증식(增殖)을 촉진시켰으며, 마우스 복강내(腹腔內) macrophage에서 분비(分泌)되는 NO의 양(量)을 감소시켜고, T cell의 apoptosis에 있어서는 대조군(對照群)에 비하여 유의성(有意性)있게 증가(增加)시켰으며, subpopulation에서는 $T_H$ cell을 증가(增加)시켰다. 그리하여 천문동(天門冬)은 항암작용(抗癌作用) 뿐만아니라 면역세포(免疫細胞)의 증식(增殖)에도 관여하는 약물(藥物)로 인정(認定)할 수 있을 것으로 사료(思料)된다.

• 동의생리병리학회지
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• 제16권5호
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• pp.914-920
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• 2002

This experiment is carried out for test whether the addition temperament drugs of Danchisoyo-san have an anti-inflammatory effect and have suppression effect on immunocyte in the state of inflammation which induced by carageenan and zymosan. The freezing lyophilization powder which were extracted from Danchisoyo-san divided low dose group(200mg/kg-DSL) and high dose group(500mg/kg-DSH) and after melting in water, it was orally administered to the mouse. Compared with inflammation induced group which were induced by triggering-inflammation reagent carageenan and zymosan and normal contrast group, we measured the edema decrement effect, macrophage and spleen cell activation. 1. Danchisoyo-san has suppress inflammatory reaction induced by carrageenan. 2. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage cell in the carrageenan induced inflammation. 3. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of spleen cell in the carrageenan induced inflammation. 4. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage in the zymosan induced inflammation. 5. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of spleen cell in the zymosan induced inflammation. Based on the above result, Danchisoyo-san was improved its suppression effect to the inflammatory reaction through the suppression of spleen cell and macrophage activation. So we concluded that Danchisoyo-san is prospected as a anti-inflammatory agent to cure inflammation.