Anticarcinogenic activity of astaxanthin-contatining egg yolk(designate AEY) was investigated for mouse ascites carcinogenesis induced by mouse Sarcoma-180(S-180) cells. Female ICR mice(8mice/treatment, 7∼8weeks of age, 25±1g) were injected, i.p. with S-180 cells(1×107cell/ml PBS). Two days later, each mouse was given 0.1ml PBS containing AEY(10, 25 or 50ug/g body weight) or control egg yolk (CEY; 50ug/g body weight) every other day for 7 times. Control mice were only given 0.1ml S-180 cells and 0.1ml PBS. Mice treated with 25ug/g body weight of AEY showed 24.8 days of life, which was equivalent to 138% of control mice's life(180.0 dyas). Based on dose-dependant experiment of AFY, mice treated with 10ug/g body weight showed slightly longer life(19.4 days) relative to mice treated with control mice, and mice treated with 50ug/g body weight exhibited 21.9 days of life. Mice treated with any dose of AEY exhibited longer life than mice with CEY 50ug/g body weight. Body weight of mice treated with AEY was reduced relative to that of control mice CEY-treated mice. These results suggest than AEY inhibits the carcinogenesis of mouse ascites induced by S-180 cells.
Anticarcinogenic activity of astaxanthin-containing egg yolks (designate AEY) was investigated for 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA)-induced two stage mouse epidermal carcinogenesis. Female ICR mouse (6-7 weeks of age) were house in a humidity-and-temperature-controlled facility and subjected to feed and water ad libitum. AEY (10 mg/0.2 ml acetone) was painted on the back of mice 7 days, 3 days and 5 min before DMBA treatment (50 nmole/0.2 ml acetone). One week later after DMBA treatment, 6 ${\mu}g$ tetradecanoyl 12-phorbol 13-O-acetate (TPA) dissolved in 0.2 ml acetone was applied on the mouse twice weekly over a period of 22 weeks. No sample was given to control mice. Control egg yolk (CEY) and astaxanthin-containing oil (designate AO) from Phaffia rhodozyma were used as positive controls. Mouse treated with AEY exhibited 10 tumors per mouse whereas control mouse exhibited 15 tumors per mouse, the fact that 33% reduction of tumor per mouse by AEY treatment. Tumor incidence was also reduced to 15% by AEY treatment when compared to that of control group. Such effects were also seen in CEY and AO treatment groups, but leaser extent. AO gave reduction of food intake and body weights relative to those of AEY and CEY, indicating toxicity of AO. These results suggest that AEY exhibits anticarcinogenic activity for DMBA-induced mouse epidermal carcinogenesis.
Benzo[a]pyrene (BP)으로 유발한 mouse의 전위암 형성에 대한 astaxanthin 함유 난황 (astaxanthin-containing egg yolk : AEY)의 영향을 연구하였다. Female ICR mouse (6-7 주령, 5 mice/cage, 20 mice/treatment)에게 물과 사료를 자유로이 공급하면서 일주일간 적응시킨 후 다음과 같이 처리를 하였다. BP (2 mg/0.2 ml corn oil)를 각 mouse에 경구투여하기 4 일과 2 일 전에 50 mg AEY, 100 mg AEY, 150 mg AEY, 또는 150 mg control egg yolk (CEY)을 함유하는 phosphate-buffered saline (PBS) 0.2 ml를 경구투여하였다. Control mouse는 0.2 ml PBS와 BP 만 경구투여하였다. 이 과정을 4회 반복하였다. BP를 경구투여 한 일주일 후부터 몸무게와 사료섭취량을 매주 기록하였으며 24주 후에 생존한 모든 mouse에 대해 전위암 생성을 조사하였다. AEY를 처리한 mouse에서는 control mouse나 CEY 처리 mouse에 비해 mouse 당 암의 수가 1/3 정도로 감소되었다. 이와 같은 AEY의 항암효과는 AEY의 처리량에 비례하였다. AEY 처리에 따른 암발생율은 control이나 CEY 처리에 비해 감소되었으나 150 mg AEY 처리에서만 유의성이 있는 감소를 보였다. AEY 처리에 따른 몸무게나 사료 소비량의 감소현상은 볼 수 없었다. 따라서 이 결과는 AEY가 BP로 유발한 mouse의 전위암 발생을 억제함을 암시한다.
Kim, Ik-Hyun;Kim, Yang-Mi;Haan, Jae-Hee;Park, Choon-Ok;Hong, Seong-Geun
The Korean Journal of Physiology
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제27권1호
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pp.93-105
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1993
The present study was performed to investigate the properties of ionic currents elicited by voltage pulses in the unfertilized eggs of mouse and hamster by using the whole cell voltage clamp techniques and to find out if there are any differences in properties between eggs of the two rodents. In addition, the modulatory effect of G proteins and protein kinase C (PKC) on the ionic channels were observed. The inward current in hamster eggs was shown to be due to $Ca^{2+}\;current\;(i_{ca})$). The current voltage relations of these currents in hamster egg were analogous to those in mouse eggs. The amplitude of $i_{ca}$ in the hamster egg was larger than that in the mouse egg ($-3.12{\pm}1.07\;nA\;vs.\;-1.71{\pm}0.71\;nA,\;mean{\pm}\;SD$). These results suggest that the $Ca^{2+}$ channels in both kinds of eggs have similar channel properties but their density, and/or conduct ance per unit area is higher in hamster eggs than in mouse eggs. Outward currents in eggs of both mouse and hamster were carried by $K^+$. In hamster eggs, they appeared to comprise at least two components; a transient outward component ($i_{to}$) and a steady state component ($i_{\infty}.$ The $i_{to}$ was found to be dependent on intracellular $Ca^{2+}$ concentration; whereas on the other hand $i_{\infty}\;was\;Ca^{2+}$-independent. $Ca^{2+}$ currents were increased in eggs treated with GTP (or $GTP{\gamma}S$) or fluoroaluminate ($AIF_4^-$). In the hamster egg these increments were antagonized by GDP (or $GDP{\beta}S$) application. In contrast to the enhancement of $i_{ca},\;i_k$ was reduced following GTP (or $GTP{\gamma}S$) perfusion in mouse eggs. The transient component ($i_{to}$) in hamster eggs was increased by adding GTP but decreased by phorbol ester, TPA or dioctanoyl glycerol (DOG). Simultaneous application of $GTP{\gamma}S$ and DOG suppressed $i_{to}$ more effectively than a single application or DOG or TPA. From the above results, we have shown that ionic currents elicited by voltage pulses existed in the unfertilized eggs of mouse and hamster. There are at least two types of currents, $i_{ca}\;and\;i_k$ in mouse eggs, while three types, $i_{ca},\;Ca^{2+}$-dependent $i_k$ and $Ca^{2+}$-independent $i_k$ exist in hamster eggs. ionic channels in these eggs may be regulated either directly by GTP and PKC or indirectly by the substances linked with GTP and PKC.
In order to manifest the presence of Na-K pump and its property on the unfertilized egg membranes of mouse, membrane potential was recorded under the physiological condition (at $37^{\circ}C$ and 4mM $Ca^{2+}$). After an induction of superovulation, the fresh eggs with zona pellucida were collected from mouse oviduct. Transient hyperpolarization as pump action was recorded after the switch into the high potassium perfusate (15mM $K^+$) from K-free perfusate, and the difference between membrane potential observed just before the perfusion of high potassium solution and the maximal membrane potenlial during the perfusion of high potassium solution was regard as pump activities. The results observed were as follows, 1. Resting mombrane potential was depolarized under the treatment of $10^{-5}M$ ouabain. 2. Pump activities of the unfertilized mouse eggs were $-3.38{\pm}0.61mV$ ($Mean{\pm}SD$, n=6), recorded as transient hyperpolarization due to the electrogenic property. 3. Pump activities were blocked by both treatment of $10^{-5}M$ ouabain and perfusion of Nafree solution, while increased by high $Na^+$ (300mM) perfusion ($-7.45{\pm}0.75mV$, n =2). 4. Hyperpolarization due to pump activity was not altered by $Mn^{2+}$. 5. Above results confirm the presence of ouabain-sensitive Na-K pump, which affected the membrane potential directly, on the unfertilized egg membranes of mouse.
AEY의 acetone 추출물이 mouse liver microsome의 산화에 미치는 영향을 조사하였다. Mouse liver microsome에 함유된 단백질 AEY 처리가 CEY 처리구에 비해 상대적으로 7~48%정도가 증가하였다. 지방산 분석 결과, CEY 처리에 비해 AEY 처리구에서 stearic acid를 포함하는 포화지방산의 함량비가 상대적으로 높았으며, oleic acid, linoleic acid 등을 함유하는 불포화지방산의 함량비가 현저히 감소하였다. AEY 처리구는 F $e^{2+}$가 관여하는 Asc/F $e^{2+}$, NADPH/F $e^{+2}$ 를 산화유도물질로 사용한 경우에 TC와 비슷하거나 보다 강력한 항산화 효과를 보였다. ABIN이나 CuOOH가 산화유도물질로 작용할 시에는 AEY처리에 의해 유의성있는 항산화 효과가 나타나지 않았다.
In order to study the sperm-egg interaction during fertilization process in mouse, the effects of sperm concentration, the duration of capacitation and insemination, the stages of maturation and development of eggs, and sperm extracts and BSA on sperm binding to egg were examined. Sperm-egg binding was increased depending on sperm concentration within the range of $10^3-10^6$ sperm/ml. It showed the most numbers of sperm-egg binding at 60min from the beginning of preincubation(capacitation) and insemination, respectively. During sperm capacitation, sperm-egg binding inhibitor was released from sperm into the incubation medium. Sperm extracts containing trypsin-like enzyme which is secreted through the acrosome reaction increased the binding. BSA in the culture medium showed a positive effect on the binding. It is suggested that physicochemical alterations of zona pellucida in the process of maturation and fertilization of eggs leaded to inhibition of sperm-egg binding.
Kim, Ki-Sun;Hwang, Kyung-A;Kim, Hyoung-Chin;Nam, Ki-Hoan;Choi, Kyung-Chul
한국수정란이식학회지
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제26권4호
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pp.287-296
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2011
Mammalian fertilization is a complex cascade process consisting of sperm migration through the female reproductive tract, physiological changes to sperm such as sperm capacitation and acrosome reaction, and sperm-egg interaction in the oviduct in vivo. On the other hand, in vitro fertilization (IVF) is a process by which egg cells are fertilized by sperm outside the body: in vitro. IVF has been used for a variety of purposes in reproductive biotechnology for human and animals. The discovery of sperm capacitation in 1951 promoted the development of IVF technology. In the initial stage of IVF, sperm capacitation in preincubation medium was shown to be essential to fuse with eggs. Besides, sperms should detour some of the in vivo regulations for IVF. This review introduces a general mammalian fertilization process, including sperm capacitation, removal of cumulus matrix, acrosome reaction, and sperm-egg fusion and focuses on the roles of key biochemical molecules, signal mechanisms, and genes involved during IVF and novel results of sperm-oocyte interaction elucidated in various gene-knockout mice models.
압란유의 항암활성 및 면역 반응조절자로서의 기능을 알아본 실험 결과, 마우스 비장세포의 증식반응은 항진시켰으나 YAC-1 세포주의 증식능은 억제시켰다. CD4$^{+}$T세포 및 CD8$^{+}$T세포의 비율이 정상대조군 마우스의 그것에 비하여 증가하였으나 CD4$^{+}$/CD8$^{+}$ 비는 차이가 없었으며 비장세포에서 IL-2수용체의 발현이 항진되었다. 또한, 복강대식세포로부터의 nitric oxide와 TNF-$\alpha$ 생산을 항진시켰으며, 복강 대식세포는 탐식능이 현저하게 항진되었고 B16F10 흑생종의 폐전이가 억제됨을 알 수 있었다. 따라서, 압란유의 항암제 및 면역반응 조절자로서의 개발 가능성이 있음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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