Single-cell research has provided a breakthrough in biology to understand heterogeneous cell groups, such as tissues and organs, in development and disease. Molecular barcoding and subsequent sequencing technology insert a single-cell barcode into isolated single cells, allowing separation cell by cell. Given that multimodal information from a cell defines precise cellular states, recent technical advances in methods focus on simultaneously extracting multimodal data recorded in different biological materials (DNA, RNA, protein, etc.). This review summarizes recently developed single-cell multiomics approaches regarding genome, epigenome, and protein profiles with the transcriptome. In particular, we focus on how to anchor or tag molecules from a cell, improve throughputs with sample multiplexing, and record lineages, and we further discuss the future developments of the technology.
Darus Sa'adah Johanis Paransa;Kurniati Kemer;Rene Charles Kepel;Desy Helena Maria Mantiri;Beivy Jonathan Kolondam
Fisheries and Aquatic Sciences
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제27권7호
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pp.411-420
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2024
The objective of this research was to identify the morphology and molecular profile of crab caught from the coast of Tambala Village, Tombariri District, Minahasa Regency, North Sulawesi. Crabs were collected from the intertidal zone at night during the lowest tide. Crabs were morphological identified by description of shape, color and size of the carapace. Molecular identification was done through DNA barcoding including DNA extraction, amplification of the cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene and electrophoresis. Morphological and genetic analysis identified the crab species as Metopograpsus oceanicus.
Tracking the fate of individual cells and their progeny through lineage tracing has been widely used to investigate various biological processes including embryonic development, homeostatic tissue turnover, and stem cell function in regeneration and disease. Conventional lineage tracing involves the marking of cells either with dyes or nucleoside analogues or genetic marking with fluorescent and/or colorimetric protein reporters. Both are imaging-based approaches that have played a crucial role in the field of developmental biology as well as adult stem cell biology. However, imaging-based lineage tracing approaches are limited by their scalability and the lack of molecular information underlying fate transitions. Recently, computational biology approaches have been combined with diverse tracing methods to overcome these limitations and so provide high-order scalability and a wealth of molecular information. In this review, we will introduce such novel computational methods, starting from single-cell RNA sequencing-based lineage analysis to DNA barcoding or genetic scar analysis. These novel approaches are complementary to conventional imaging-based approaches and enable us to study the lineage relationships of numerous cell types during vertebrate, and in particular human, development and disease.
In this study, cytochrome c oxidase subunit I(COI) sequences of 17 individuals from six Korean diogenid species(i.e., 2 Areopaguristes japonicus, 4 A. nigroapiculus, 3 Paguristes digitalis, 4 P. ortmanni, 3 Diogenes edwardsii, and 1 Ciliopagurus kempfi) were determined and analyzed. The DNA barcoding results of this study were consistent with the morphological identification of these six species. Interspecific variations of COI sequences within six Korean diogenid species exceeded the minimum interspecific variation of diogenid hermit crabs in previous studies. Little intraspecific variation exists except for P. digitalis. This study should facilitate further molecular taxonomy of East Asian diogenids.
DNA barcoding is becoming a widely applied tool to accurately discriminate red algae. We tested the effectiveness of DNA barcoding for identification and discovery of Champia species in Korea and clarified the phylogenetic relationships using the plastid rbcL gene. As results, we described four species of Champia such as C. inkyua sp. nov., C. recta Noda, C. bifida Okamura, and C. expansa Yendo. A new species, C. inkyua, is characterized by entangled thallus, terete and irregular branches, hooked apices, and longitudinal filaments running throughout the frond periphery only. Longitudinal filaments were composed of a complete cell with two half cells between diaphragms in the cavity. C. recta and C. bifida were reinstated with previously used names of C. parvula and C. compressa, respectively. C. recta is the first recorded species from Korea and is characterized by an erect thallus, terete and irregular branches, and straight apices. C. bifida is characterized by compressed thallus, pinnate or alternate branches, and bifid apices. C. expansa is characterized by flabellate thallus and dichotomous branches. Molecular analyses of COI and rbcL genes revealed sufficient sequence divergence to warrant species recognition in the genus Champia.
Kim, Dae-Won;Yoo, Won-Gi;Park, Hyun-Chul;Yoo, Hye-Sook;Kang, Dong-Won;Jin, Seon-Deok;Min, Hong-Ki;Paek, Woon-Kee;Lim, Jeong-Heui
Genomics & Informatics
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제10권3호
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pp.206-211
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2012
DNA barcoding has been widely used in species identification and biodiversity research. A short fragment of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I (COI) sequence serves as a DNA bio-barcode. We collected DNA barcodes, based on COI sequences from 156 species (529 sequences) of fish, insects, and shellfish. We present results on phylogenetic relationships to assess biodiversity the in the Korean peninsula. Average GC% contents of the 68 fish species (46.9%), the 59 shellfish species (38.0%), and the 29 insect species (33.2%) are reported. Using the Kimura 2 parameter in all possible pairwise comparisons, the average interspecific distances were compared with the average intraspecific distances in fish (3.22 vs. 0.41), insects (2.06 vs. 0.25), and shellfish (3.58 vs. 0.14). Our results confirm that distance-based DNA barcoding provides sufficient information to identify and delineate fish, insect, and shellfish species by means of all possible pairwise comparisons. These results also confirm that the development of an effective molecular barcode identification system is possible. All DNA barcode sequences collected from our study will be useful for the interpretation of species-level identification and community-level patterns in fish, insects, and shellfish in Korea, although at the species level, the rate of correct identification in a diversified environment might be low.
Global climate change, followed by an increase in anthropogenic activities in aquatic ecosystems, and species invasions, has resulted in a decline in aquatic organism biodiversity. The Batanghari River, Sumatra's longest river, is polluted by mercury-containing illegal gold mining waste (PETI), industrial pollution, and domestic waste. Several studies have provided evidence suggesting a decline in fish biodiversity within the Batanghari River. However, a comprehensive evaluation of the present status of biodiversity in this river is currently lacking. The species under investigation were identified through various molecular-based identification methods, as well as morphological identification, which involved the use of neighbor-joining (NJ) trees. All collected specimens were initially identified using morphological techniques and subsequently confirmed with molecular barcoding analysis. Morphological and DNA barcoding identification categorized all specimens (1,692) into 36 species, 30 genera and 16 families, representing five orders. A total of 36 DNA barcodes were generated from 30 genera using a 650-bp-long fragment of the mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (COI) gene. Based on the Kimura two-parameter model (K2P), The minimum and maximum genetic divergences based on K2P distance were 0.003 and 0.331, respectively, and the average genetic divergence within genera, families, and orders was 0.05, 0.12, 0.16 respectively. In addition, the average interspecific distance was approximately 2.17 times higher than the mean intraspecific distance. Our results showed that the COI barcode enabled accurate fish species identification in the Batanghari River. Furthermore, the present work will establish a comprehensive DNA barcode library for freshwater fishes along Batanghari River and be significantly useful in future efforts to monitor, conserve, and manage fisheries in Indonesia.
Han, Sang-Kuk;Jo, Jong Won;Kim, Chang Sun;Kwag, Young-Nam;Sung, Gi-Ho
한국균학회소식:학술대회논문집
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한국균학회 2014년도 춘계학술대회 및 임시총회
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pp.17-17
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2014
Over five thousand higher fungal specimens were collected from 32 forest areas of Chungcheong and Gyeongsang province from 2012 to 2013. We obtained 513 strains and 3,120 ITS sequences. Mushrooms were first identified with macro- and micro-scopic characters, and their identification was confirmed on the basis of ITS sequences. Voucher specimens were designated for each species found in Korea. Construction of DNA barcoding Database is currently underway with sequences of 409 species. During the development of the database, some new species were recognized, along with several Korean new records. When the system has been completed, it will provide essential molecular information for metagenomic and phylogenetic researches for higher fungi.
In April 2019, a single Peristediidae juvenile (14.1 mm SL) was collected from the waters off of Jeju-do Island, Korea. DNA barcoding identified the juvenile as Peristedion liorhynchus, an unrecorded species in Korea. P. liorhynchus has eight dorsal fin spines, 22 dorsal and 19 anal fin rays, and a long third pectoral fin ray that passes through the middle of the tail at the juvenile stage. Juvenile also have large heads, extensive head spination, and serrated edges on the ocular and parietal spines. This is the first record of P. liorhynchus in Korea; therefore, we propose the new Korean name, "Nam-bang-hwang-seong-dae".
Three specimens (33.6-44.8 mm in standard length) of the family Bregmacerotidae, collected from the waters off south-western Jeju-do Island in October 2016, were identified as Bregmaceros nectabanus on the basis of morphological and molecular methods (DNA barcoding). This species is characterized by having 50-52 2nd dorsal fin rays, 52-53 anal fin rays, 13 principal caudal fin rays, an unpigmented abdomen, irregularly distributed dorsal chromatophores, and the origin of a dorsal fin slightly behind the anal fin. This is the first reliable record of B. nectabanus in Korea. According to Yoo et al. (1992), we propose a Korean name "Tae-Pyeong-Yang-Nal-Gae-Myeol" for this species. Also, we suggest key to species of these eight bregmacerotids from the northwestern Pacific.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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