We developed a polymerase chain reaction (PCR)-based molecular method for sexing and identification using sexual dimorphism between the Zinc Finger-X and -Y (ZFX-ZFY) gene and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) for mitochondrial DNA (mtDNA) cytochrome B (CYTB) gene in meat pieces and commercial sausages from animals of different origins. Sexual dimorphism based on the presence or absence of SINE-like sequence between ZFX and ZFY genes showed distinguishable band patterns between male and female DNA samples and were easily detected by PCR analyses. Male DNA had two PCR products appearing as distinct two bands (ZFX and ZFY), and female DNA had a single band (ZFX). Molecular identification was carried out using PCR-RFLP of CYTB gene, and showed clear species classification results. The results yielded identical information on the sexes and the species of the meat samples collected from providers without any records. The analyses for DNA isolated from commercial sausage showed that pig was the major source but several sausages originated from chicken and Atlantic cod. Applying this PCR-based molecular method was useful and yielded clear sex information and identified the species of various tissue samples originating from livestock.
Myoblast fusion depends on mitochondrial integrity and intracellular $Ca^{2+}$ signaling regulated by various ion channels. In this study, we investigated the ionic currents associated with $[Ca^{2+}]_i$ regulation in normal and mitochondrial DNA-depleted(${\rho}0$) L6 myoblasts. The ${\rho}0$ myoblasts showed impaired myotube formation. The inwardly rectifying $K^+$ current ($I_{Kir}$) was largely decreased with reduced expression of KIR2.1, whereas the voltage-operated $Ca^{2+}$ channel and $Ca^{2+}$-activated $K^+$ channel currents were intact. Sustained inhibition of mitochondrial electron transport by antimycin A treatment (24 h) also decreased the $I_{Kir}$. The ${\rho}0$ myoblasts showed depolarized resting membrane potential and higher basal $[Ca^{2+}]_i$. Our results demonstrated the specific downregulation of $I_{Kir}$ by dysfunctional mitochondria. The resultant depolarization and altered $Ca^{2+}$ signaling might be associated with impaired myoblast fusion in ${\rho}0$ myoblasts.
Park, Yong Hyun;Uzzaman, Md. Rasel;Park, Jeong-Woon;Kim, Sang-Wook;Lee, Jun Heon;Kim, Kwan-Suk
Food Science of Animal Resources
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제33권6호
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pp.696-700
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2013
A quick and reliable method for identifying meat origin is developed to ensure species origin of livestock products for consumers. The present study examined the identification of meat sources (duck, chicken, goat, deer, pig, cattle, sheep, and horse) using PCR by exploiting the mitochondrial 12S rRNA and mitochondrial cytochrome b genes. Species-specific primers were designed for some or all mitochondrial 12S rRNA nucleotide sequences to identify meat samples from duck, chicken, goat, and deer. Mitochondrial cytochrome b genes from pig, cattle, sheep, and horse were used to construct species-specific primers, which were used to amplify DNA from different meat samples. Primer sets developed in this study were found to be superior for detecting meat origin when compared to other available methods, for which the discrimination of meat origin was not equally applicable in some cases. Our new development of species-specific primer sets could be multiplexed in a single PCR reaction to significantly reduce the time and labor required for determining meat samples of unknown origin from the 8 species. Therefore, the technique developed in this study can be used efficiently to trace the meat origin in a commercial venture and help consumers to preserve their rights knowing origin of meat products for social, religious or health consciousness.
Tanaka’s snailfish, Liparis tanakae (Gilbert and Burke, 1912), is distributed throughout the coasts of Korea. To clarify the population structure of L. tanakae, we analyzed the morphological and genetic variation among individuals sampled from three localities surrounding the Korean peninsula: Boryeong in the Yellow Sea, Jinhae in the Korea Strait and Pohang in the East Sea. Principal component analysis based on 20 morphometric characteristics revealed two slightly distinct groups (Boryeong vs. Jinhae and Pohang). However, canonical discriminant analysis clearly revealed three groups, separated according to locality. Pairwise differentiation index (FST) comparisons based on 762-base pairs mitochondrial cytochrome b gene sequences showed that Boryeong significantly differed from Jinhae and Pohang, but Jinhae and Pohang did not significantly differ from each other. Our findings suggest that Korean L. tanakae comprise at least two groups. Further studies using more sensitive DNA markers, such as microsatellite DNA, are required.
Creeping ctenophores, Coeloplana species, were collected by SCUBA divers throughout the year (November 2006 to June 2010) from the branches and polyp masses of encrusting dendronephthyas at a depth of 20-32m off Munseom Island (Seogwipo-si, Jeju-do, Korea). A single individual of a newly recorded species in Korea, Coeloplana bocki Komai, 1920, was collected together with C. anthostella from the same location on 16 August 2009. A large number of individuals of each species were subsequently collected from the host Dendronephthya aff. dendritica on 20 June 2010. C. bocki can be distinguished from C. anthostella Song and Hwang, 2010 and C. komaii Utinomi, 1963 by its unique blue and orange colored stripes, and/or the branching and anastomosing milky-white stripes encircling the aboral sense organ towards the margin. The detailed morphology and molecular sequence information (nuclear 18S rDNA, internal transcribed spacer 1, and mitochondrial cox1 gene sequences) for C. bocki is provided, and C. bocki and C. anthostella are compared.
Kim, Jae-Hwan;Oh, Ju-Hyung;Song, Ji-Hoon;Jeon, Jin-Tae;Han, Sang-Hyun;Jung, Yong-Hwan;Oh, Moon-You
Molecules and Cells
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제20권3호
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pp.325-330
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2005
Ancient cattle bones were excavated from archaeological sites in Jeju, Korea. We used molecular genetic techniques to identify the species and establish its relationship to extant cattle breeds. Ancient DNA was extracted from four sources: a humerus (Gonae site, A.D. 700-800), two fragments of radius, and a tooth (Kwakji site, A.D. 0-900). The mitochondrial DNA (mtDNA) D-loop regions were cloned, sequenced, and compared with previously reported sequences of various cattle breeds (9 Asian, 8 European, and 3 African). The results revealed that these bones were of the breed, Bos taurus, and a phylogenetic tree indicated that the four cattle bones formed a monophyletic group with Jeju native black cattle. However, the patterns of sequence variation and reports from archaeological sites suggest that a few wild cattle, with a different maternal lineage, may have existed on Jeju Island. Our results will contribute to further studies of the origin of Jeju native cattle and the possible existence of local wild cattle.
Silver croaker (Pennahia argentata) is a turbulent species that is widely distributed worldwide and is mainly found in the bottom of the ocean. In the study, we characterized the cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene of the mitochondrial DNA (mtDNA) on P. argentata inhabiting Gwangyang Bay and analyzed the phylogenetic location of marine fish species. As a result of multiple arrangement of 605 bp COI sequences, high homology of mtDNA nucleotide sequences was confirmed in the silver croakers from Gwangyang Bay (98~100%). However, the nucleotide variation was different according to the catching points of the inland and the open seas of Gwangyang Bay. The nucleotide sequence variation in COI was high in P. argentata from the open seas of Gwangyang Bay (43.2~70.3%). Furthermore, the phylogenetic analysis of 13 fish showed that P. argentata from Gwangyang Bay were grouped into one clade with P. argentata reported in Taiwan, and the evolutionary distance was 0.036. In addition, it was identified that the evolutionary distance was close to that of fish belonging to the Mi-iuy croaker (Miichthys miiuy) and the Big-head pennah croaker (Pennahia Macrocephalus) (0.041~0.048). The result of these studies will be used as the key genetic information for fisheries resources monitoring and species diversity management according to the coastal environment.
Choi, Nu Ri;Seo, Dong Won;Jin, Seon Deok;Sultana, Hasina;Heo, Kang Nyeong;Lee, Jun Heon
Korean Journal of Poultry Science
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제41권4호
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pp.235-240
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2014
Recently, the consumption of duck meat has been gradually increased in Korea. However, most of the duck breeds in Korea were imported from overseas. Based on the large demands for the breeding stocks of native ducks, a new project for the commercial use of the Korean native ducks has been launched. For the initial investigation of the relationships between Korean native duck (KND) with other duck breeds, the sequences from D-loop control region in mitochondrial DNA (mtDNA) was used. The results from phylogenetic analysis indicated that both KND and White Commercial Duck (WCD) breeds were classified well with wild duck breeds. However, mallard duck was not discriminated well with KND. The haplotype analysis indicated that KND and WCD have eight different haplotypes with eleven SNPs. Three haplotypes (haplotype 1, 3, 4) were shared both in KND and WCD. On the other hand, haplotype 1 was appeared only KND and haplotype 5, 6, 7, 8 were identified only in WCD population. With further verifications, the results presented here can be used for the conservation and commercialization of the Korean native ducks.
Kim, Woo-Jin;Kim, Dae-Hee;Lee, Jun-Sang;Bang, In-Chul;Lee, Wan-Ok;Jung, Hyung-Taek
The Korean Journal of Malacology
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제26권4호
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pp.275-283
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2010
Many freshwater snail taxa are difficult to identify using morphological traits due to phenotypic plasticity. However, using of molecular DNA marker in combination with morphological traits can provide a reliable means for discriminating among freshwater snail taxa including cryptic species. To discriminate among Korean freshwater snail taxa and resolve their systematic relationships, wesequenced a fragment of mtDNA cytochrome oxidase I (COI) gene from 82 specimens collected from ten different sites distributed along the Korean peninsula. We identified more than seven freshwater snail taxa including cryptic species in Korea. Whereas traditional shell morphology of freshwater snails offers only weak discriminatory power for recognizing 'good' taxa, DNA sequence data provided positive and reliable identification. In addition, a major Semisulcospira clade was clearly separated from the remaining lineages observed including cryptic species. However, a phylogenetic tree inferred from the COI gene data did not fully resolve systematic relationships among pleurocerid taxa in Korea. Establishing more robust shell characteristics for identifying taxa unambiguously and hence improving traditional key shell morphology characters for freshwater snail species is an urgent requirement and will require more rigorous examination of all nominal taxa. While molecular data generated here will be useful for species identification and for describing the systematic relationships among Korean freshwater snails, further analysis will be required.
Kim, Keun-Yong;Ko, Myeong-Hun;Cho, Sung Jang;Kim, Woo-Jin;Son, Min Ho;Bang, In-Chul
Fisheries and Aquatic Sciences
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제18권1호
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pp.99-107
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2015
A natural hybrid of a probable intergeneric mating between the striped shiner Pungtungia herzi and the stone morocco Pseudorasbora parva (Cypriniformes: Cyprinidae) was captured in the Geumho River, a tributary of the Nakdong River basin in Korea. Morphological characters and DNA sequences were analyzed to verify its hybrid state and identify the parentage of its parent species. The hybrid exhibited a phenotypic intermediacy between the two parent species in the number of vertebrae and the mouth shape. Out of 1,488 base pair (bp) positions of the nuclear recombination activating gene 1 gene (rag1), which has a biparental mode of inheritance, 41-bp substitutions were detected between the two parent species, whereas an electropherogram of the hybrid displayed polymorphic double peaks at all of the base positions, along with one additional one, strongly indicating its hybrid state. Meanwhile, sequence comparison of the mitochondrial cytochrome b gene (mt-cyb) (1,140 bp), which has a maternal mode of inheritance, showed only 5-22-bp differences (97.6-99.5% identities) between the hybrid and Pu. herzi, but as many as 158-168-bp differences (85.2-86.1% identities) between the hybrid and Ps. parva, clearly indicating Pu. herzi as the maternal species. Thus, combined analyses of independent data sets (i.e., morphology and nuclear and mitochondrial DNA sequences) offered convincing evidence for the hybrid state of a naturally occurring hybrid resulting from intergeneric mating between a female Pu. herzi and a male Ps. parva.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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