Wu, Jinhua;Liu, Ronghui;Li, Hua;Yu, Hui;Yang, Yalan
Animal Bioscience
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v.34
no.11
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pp.1757-1765
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2021
Objective: The swine leukocyte antigen (SLA) gene group, which is closely linked and highly polymorphic, has important biomedical significance in the protection and utilization of germplasm resources. However, genetic polymorphism analyses of SLA microsatellite markers in Chinese miniature pigs are limited. Methods: Eighteen pairs of microsatellite primers were used to amplify the SLA regions of seven miniature pig breeds and three wild boar breeds (n = 346) from different regions of China. The indexes of genetic polymorphism, including expected heterozygosity (He), polymorphic information content (PIC), and haplotype, were analyzed. The genetic differentiation coefficient (Fst) and neighbor-joining methods were used for cluster analysis of the breeds. Results: In miniature pigs, the SLA I region had the highest numbers of polymorphisms, followed by the SLA II and SLA III regions; the region near the centromere had the lowest number of polymorphisms. Among the seven miniature pig breeds, Diannan small-ear pigs had the highest genetic diversity (PIC value = 0.6396), whereas the genetic diversity of the Hebao pig was the lowest (PIC value = 0.4330). The Fst values in the Mingguang small-ear, Diannan small-ear, and Yunnan wild boars were less than 0.05. According to phylogenetic cluster analysis, the South-China-type miniature pigs clustered into one group, among which Mingguang small-ear pigs clustered with Diannan small-ear pigs. Haplotype analysis revealed that the SLA I, II, and III regions could be constructed into 13, 7, and 11 common haplotypes, respectively. Conclusion: This study validates the high genetic diversity of the Chinese miniature pig. Mingguang small-ear pigs have close kinship with Diannan small-ear pigs, implying that they may have similar genetic backgrounds and originate from the same population. This study also provides a foundation for genetic breeding, genetic resource protection, and classification of Chinese miniature pigs.
The porcine major histocompatibility complex (MHC) is called swine leukocyte antigen (SLA), which controls immune responses and transplantation reactions. The SLA is mapped on pig chromosome 7 (SSC7) near the centromere. In this study, 3 class I (SLA-1, SLA-3, and SLA-2) and 3 class II (DRB1, DQB1, and DQA) genes were used for investigation of SLA haplotypes in Yucatan miniature pigs in Korea. This pig breed is a well-known model organism for biomedical research worldwide. The current study indicated that Korean Yucatan pig population had 3 Class I haplotypes (Lr-4.0, Lr-6.0, and Lr-25.0) and 3 class II haplotypes (Lr-0.5, Lr-0.7, and Lr-0.25). The combinations of SLA class I and II haplotype together, 2 homozygous (Lr-4.5/4.5 and Lr-6.7/6.7) and 3 heterozygous (Lr-4.5/6.7, Lr-4.5/25.25, and Lr-6.7/25.25) haplotypes were identified, including previously unidentified new heterozygous haplotypes (Lr-4.5/4.7). In addition, a new SLA allele typing method using Agilent 2100 bioanalyzer was developed that permitted more rapid identification of SLA haplotypes. These results will facilitate the breeding of SLA homozygous Yucatan pigs and will expedite the possible use of these pigs for the biomedical research, especially xenotransplantation research.
The purpose of this study was to establish blood reference values for miniature pigs from various growth ages before pre-puberty. 12 miniature pigs from two swine farms were sampled by jugular venipuncture. Routine hematological and biochemical determinations were performed using whole blood and serum. For the variables examined in each age group the means and the standard deviations were calculated. In hematological values, there are significant changes (p<0.05) in RBC, hematocrit and platelet values in each group. In RBC and hematocrit values, 4-week group shows the lowest level, whereas in platelet values, 4-week group shows the highest level. In biochemical values, there are significant chnges (p<0.05) in glucose and GGT in each group, and in other biochemical values there are no significant changes during growing periods. The values presented here may be useful for knowing the normal values for miniature pigs and also screening the normal pigs in the early days of their life and during the developemental stages.
The purpose of this study was undertaken to compare ability of frozen-thawed sperm characteristics between two strains (miniature pig and Duroc). The semen was collected by gloved-hand method into a pre-warmed ($37^{\circ}C$) thermos bottle. The semen was diluted with same volume extender and added to LEY solution for freezing. The diluted semen was placed in 0.5 ml straws, and freezing was initiated by exposing the straws to liquid nitrogen ($LN_2$) vapours for 10 min before placing them into $LN_2$ for cryopreservation. The frozen-semen straw were thawed at 20, 37 and $50^{\circ}C$ for 1 min, 45 sec and 10 sec within water-bath. The semen sample were evaluated at 0, 3, 6, 9, and 12 h after incubation at $37^{\circ}C$ for analysis of sperm ability. Abnormality of spermatozoa in miniature pig was significantly (p<0.05) higher than that in Duroc at 0, 9 and 12 h of post-thawing incubation after frozen-thawing. The percentage of F-patterned spermatozoa in miniature pig was significantly (p<0.05) lower, while the percentage of AR (acrosome reacted spermatozoa) pattern was higher in the miniature than in the Duroc. On the other hand, there was no significant difference in the viability of spermatozoa thawed at different temperature ($20^{\circ}C\;and\;37^{\circ}C$) between two species, but the viability in miniature pig was higher (p<0.05) than in Duroc when sperm was thawed at $50^{\circ}C$. In conclusion, this study suggest that suitable freezing method for miniature pig semen is required for increasing post-thawing viability and fertilization capacity.
Yeom, Su-Cheong;Koo, Ok Jae;Park, Chung-Gyu;Lee, Byeong-Chun;Lee, Wang-Jae
Reproductive and Developmental Biology
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v.37
no.1
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pp.1-8
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2013
In order to investigate genetic stability and gene expression profile after cloning procedure, two groups of cloned pigs were used for swine leukocyte antigen (SLA) gene nucleotide alteration and microarray analyses. Each group was consist of cloned pigs derived from same cell line (n=3 and 4, respectively). Six SLA loci were analyzed for cDNA sequences and protein translations. In total, 16 SLA alleles were identified and there were no evidence of SLA nucleotide alteration. All SLA sequences and protein translations were identical among the each pig in the same group. On the other hand, microarray assay was performed for profiling gene expression of the cloned pigs. In total, 43,603 genes were analyzed and 2,150~4,300 reliably hybridized spots on the each chip were selected for further analysis. Even though the cloned pigs in the same group had identical genetic background, 18.6~47.3% of analyzed genes were differentially expressed in between each cloned pigs. Furthermore, on gene clustering analysis, some cloned pigs showed abnormal physiological phenotypes such as inflammation, cancer or cardiomyopathy. We assumed that individual environmental adaption, sociality and rank in the pen might have induced these different phenotypes. In conclusion, the results of the present study indicate that SLA locus genes appear to be stable following SCNT. However, gene expressions and phenotypes between cloned pigs derived from the same cell line were not identical even under the same rearing conditions.
Blood pressure (BP) measurement plays a pivotal role in veterinary medicine for diagnosing cardiovascular disorders and monitoring anesthesia of animals. Although indirect BP measurement has been widely applied to monitor BP because of its convenience and non-invasiveness, it is still unclear whether indirect BP measurement is compatible with direct BP measurement in minipigs. In addition, the effect of animal posture during BP measurement is not well understood in minipigs despite its importance to cardiovascular performance. Therefore, both systolic and diastolic arterial BPs in minipigs were measured via femoral artery catheterization for direct BP measurement and using a compressive cuff as an indirect BP measurement under the dorsal or right lateral recumbent postures. Numerical values were processed by the Bland-Altman method to calculate the bias ${\pm}$ SD and the limits of agreement (LOA). In accordance with the American College of Veterinary Internal Medicine guidelines, the results between direct and indirect BP measurements were determined as apparent disagreements in both systolic and diastolic arterial BPs under all postures because of large bias ${\pm}$ SD and wide LOA. The results of the present will help prevent misinterpretation of the anesthetized patient's condition during monitoring of BP by indirect measurement.
Ji Hwa Hong;Sang Hoon Kim;Hyun Gyung Kim;Jun Ho Jang;Ryeo Gang Son;Seung Pil Pack;Young-Ho Park;Philyong Kang;Kang-Jin Jeong;Ji-Su Kim;Hanbyeul Choi;Sun-Uk Kim;Yong Woo Jung
IMMUNE NETWORK
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v.21
no.3
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pp.24.1-24.13
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2021
Due to the inconsistent fluctuation of blood supply for transfusion, much attention has been paid to the development of artificial blood using other animals. Although mini-pigs are candidate animals, contamination of mini-pig T cells in artificial blood may cause a major safety concern. Therefore, it is important to analyze the cross-reactivity of IL-7, the major survival factor for T lymphocytes, between human, mouse, and mini-pig. Thus, we compared the protein sequences of IL-7 and found that porcine IL-7 was evolutionarily different from human IL-7. We also observed that when porcine T cells were cultured with either human or mouse IL-7, these cells did not increase the survival or proliferation compared to negative controls. These results suggest that porcine T cells do not recognize human or mouse IL-7 as their survival factor.
Objective: Microminipig (MMP) is a miniature pig with an extra small body size for experimental use. In the present study, the occurrence of stillbirths and their genetic association with swine leukocyte antigen (SLA) class II haplotypes were evaluated in a population of MMPs. Methods: The occurrences of stillbirth and genetic association with SLA class II haplotypes using 483 stillborn and 2,246 live piglets, and their parents were compared among the three groups of newborn piglet litters; an all stillborn (AS) group consisting of only stillborn piglet litters, a partial stillborn (PS) group consisting of stillborn and live piglet litters, and an all alive (AA) group consisting of only live piglet litters. Results: The incidence of stillborn piglets was 483/2,729 (17.7%). Distributions of litter sizes, numbers of stillborn piglets in a litter, parities, and gestation periods were distinct among the three groups. The frequencies of low resolution haplotype (Lr)-0.7 or Lr-0.23 were higher in the AS group than in the PS or AA groups. In sires, the frequency of Lr-0.7 associated with the AS group was significantly higher in the AS group than with the AA group. In dams, the frequency of Lr-0.23 was significantly higher in the AS group than in the PS or AA groups, whereas the frequency of Lr-0.7 was not significantly different. Conclusion: The incidence of stillborn piglets in MMPs appears to be higher than those in other pig breeds. Several traits related with stillbirths such as the number of stillborn piglets and parities of the AS group were different from those of the PS and AA groups. Specific SLA class II haplotypes were associated significantly with a high incidence of stillbirths and could be used as genetic markers to adopt breeding strategies to lower the rate of stillbirth in MMPs.
Steroid hormones and their receptors play an important role in reproductive process. Estrogen is intimately involved with pregnancy and its function is mediated through the estrogen receptor which has been chosen as a candidate gene to study litter size in pigs. In this study, we report that two estrogen receptor variants, designated pER-1 and pER-2 were co-expressed in the uteri of normal cycling Lan-Yu pig (Sus vittatus; a small-ear miniature in Taiwan) with the pER-1 expression level appeared to be several times higher than that of pER-2. These receptor variants were isolated using reverse transcription-PCR from the pig uteri and their sequences were determined. The pER-1 and pER-2 sequences, which are homologous to those found in other mammalian estrogen receptors, encode putative proteins consisting of 574 and 486 amino acids, respectively. A deletion in exon I was identified in both sequences, with deletion lengths of 63 bp in pER-1 and 327 bp in pER-2. The deletion in pER-1 is internal to that in pER-2 and both deletions resulted in a truncation of the B domain, which confers the transactivating activity of estrogen receptor protein. This result describes the existence of estrogen receptor variants with a deletion in exon I and implies the possibility that physiological functioning of an estrogen receptor may not require the presence of an intact B domain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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