Sasazaki, S.;Honda, T.;Fukushima, M.;Oyama, K.;Mannen, H.;Mukai, F.;Tsuji, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.17
no.10
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pp.1355-1359
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2004
Japanese Black cattle of Hyogo prefecture (Tajima strain) are famous for its ability to produce high-quality meat and have been maintained as a closed system for more than 80 years. In order to assess the usefulness of microsatellite markers in closed cattle populations, and evaluate the genetic structure of the Tajima strain, we analyzed representative dams of the Tajima strain comprised of the substrains Nakadoi and Kinosaki. Genetic variability analyses indicated low genetic diversity in the Tajima strain. In addition, a recent genetic bottleneck, which could be accounted for by the high level of inbreeding, was detected in both substrains. In phylogenetic analyses, relationship coefficients and genetic distances between individuals were calculated using pedigree and microsatellite information. Two phylogenetic trees were constructed from microsatellite and pedigree information using the UPGMA method. Both trees illustrated that most individuals were distinguished clearly on the basis of the two substrains, although in the microsatellite tree some individuals appeared in clusters of different substrains. Comparing the two phylogenetic trees revealed good consistency between the microsatellite analysis tree and the pedigree information. The correlation coefficient between genetic distances derived from microsatellite and pedigree information was 0.686 with a high significance level (p<0.001). These results indicated that microsatellite information may provide data substantially equivalent to pedigree information even in unusually inbred herds of cattle, and suggested that microsatellite markers may be useful in revealing genetic structure without accurate or complete pedigree nformation. Japanese Black cattle of Hyogo prefecture (Tajima strain) are famous for its ability to produce high-quality meat and have been maintained as a closed system for more than 80 years. In order to assess the usefulness of microsatellite markers in closed cattle populations, and evaluate the genetic structure of the Tajima strain, we analyzed representative dams of the Tajima strain comprised of the substrains Nakadoi and Kinosaki. Genetic variability analyses indicated low genetic diversity in the Tajima strain. In addition, a recent genetic bottleneck, which could be accounted for by the high level of inbreeding, was detected in both substrains. In phylogenetic analyses, relationship coefficients and genetic distances between individuals were calculated using pedigree and microsatellite information. Two phylogenetic trees were constructed from microsatellite and pedigree information using the UPGMA method. Both trees illustrated that most individuals were distinguished clearly on the basis of the two substrains, although in the microsatellite tree some individuals appeared in clusters of different substrains. Comparing the two phylogenetic trees revealed good consistency between the microsatellite analysis tree and the pedigree information. The correlation coefficient between genetic distances derived from microsatellite and pedigree information was 0.686 with a high significance level (p<0.001). These results indicated that microsatellite information may provide data substantially equivalent to pedigree information even in unusually inbred herds of cattle, and suggested that microsatellite markers may be useful in revealing genetic structure without accurate or complete pedigree information.
Purpose: Rectal cancers with high microsatellite-instable have clinical and pathological features that differentiate them from microsatellite-stable or low-frequency carcinomas, which was studied rarely in stage II rectal cancer, promoting the present investigation of the usefulness of microsatellite-instability status as a predictor of the benefit of adjuvant chemotherapy with fluorouracil in stage II rectal cancer. Patients and Methods: Data of 460 patients who underwent primary anterior resection with a double stapling technique for rectal carcinoma at a single institution from 2008 to 2012 were retrospectively collected. All patients experienced a total mesorectal excision (TME) operation. Survival analysis were analyzed using the Cox regression method. Results: Five-year rate of disease-free survival (DFS) was noted in 390 (84.8%) of 460 patients with stage II rectal cancer. Of 460 tissue specimens, 97 (21.1%) exhibited high-frequency microsatellite instability. Median age of the patients was 65 (50-71) and 185 (40.2%) were male. After univariate and multivariate analysis, microsatellite instability (p= 0.001), female sex (p<0.05) and fluorouracil-based adjuvant chemotherapy (p<0.001), the 3 factors were attributed to a favorable survival status independently. Among 201 patients who did not receive adjuvant chemotherapy, those cancers displaying high-frequency microsatellite instability had a better 5-year rate of DFS than tumors exhibiting microsatellite stability or low-frequency instability (HR, 13.61 [95% CI, 1.88 to 99.28]; p= 0.010), while in 259 patients who received adjuvant chemotherapy, there was no DFS difference between the two groups (p= 0.145). Furthermore, patients exhibiting microsatellite stability or low-frequency instability who received adjuvant chemotherapy had a better 5-year rate of DFS than patients did not (HR, 5.16 [95% CI, 2.90 to 9.18]; p<0.001), while patients exhibiting high-frequency microsatellite instability were not connected with increased DFS (p= 0.696). It was implied that female patients had better survival than male. Conclusion: Survival status after anterior resection of rectal carcinoma is related to the microsatellite instability status, adjuvant chemotherapy and gender. Fluorouracil-based adjuvant chemotherapy benefits patients of stage II rectal cancer with microsatellite-stable or low microsatellite-instable, but not those with high microsatellite-instable. Additionally, free of adjuvant chemotherapy, carcinomas with high microsatellite-instable have a better 5-year rate of DFS than those with microsatellite-stable or low microsatellite-instable, and female patients have a better survival as well.
The choice of molecular markers is the first step when selecting experimental plans in the field of population genetics. The popular molecular markers in population genetic studies are mainly allozyme, RAPD, RFLP, AFLP, microsatellite, SNP and ISSR. Among these, microsatellites are frequently found in nuclear, chloroplast and mitochondrial genome, showing a high level of polymorphism and nuclear microsatellites are codominant. Thus, it is a favorable molecular marker for population structure analyses and genetic diversity studies. Microsatellites are composed of tandem repeated 1~6 base pair nucleotide motifs and can be easily amplified by PCR reactions using locus specific primers. Because microsatellites have low cross-species transferability, however, they are only applicable between phylogenetically close species. In wild plants, the lack of genomic information and the high development cost of the microsatellite obstruct the wider use of microsatellites in plant population genetics research. In this review, we introduce the basis for microsatellite markers, the development process, and analytical methods as well as evolutionary models and their applications. In addition, possible genotyping errors which lead to erroneous conclusions are discussed.
Dong, Chun Mae;Lee, Mi-Nan;Kim, Eun-Mi;Park, Jung Youn;Kim, Gun-Do;Noh, Jae Koo
Journal of Life Science
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v.30
no.3
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pp.291-297
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2020
This study was conducted to develop microsatellite markers in Seriola quinqueradiata using next-generation sequencing. A total of 28,873,374 reads were generated on an Illumina Hiseq2500 system, yielding 7,247,216,874 bp sequences. The de novo assembly resulted in 466,359 contigs. A total of 132 contigs (0.43%), including 60 microsatellite loci, were derived from 30,729 contigs longer than 518 bp. A total of 60 primer sets were designed from the 132 microsatellite loci. A total of 15 polymorphic nuclear microsatellite loci were chosen to evaluate population genetic parameters in the parents and offspring. The mean number of effective alleles was 18.5, ranging from 11 to 30. The observed heterozygosity (HO) and expected heterozygosity (HE) ranged between 0.431 and 0.972 with an average of 0.812 and from 0.782 to 0.949 with an average of 0.896, respectively. No significant linkage disequilibrium was observed after Bonferroni revision in any loci. The results show that the 15 polymorphic nuclear microsatellite markers can be used to study the population and conservation genetics of S. quinqueradiata in Korea. To ensure the success of artificial seedling production technology, genetic variations between the parent and offspring populations should be monitored, and inbreeding should be controlled.
This study was conducted to develop microsatellite markers in Quercus variabilis using next generation sequencing. A total of 305,771 reads (384 bp on average) were generated on a Roche GS-FLX system, yielding 117 Mbp of sequences. The de novo assembly resulted in 7,346 contigs. A total of 606 contigs (20.75%) including 911 microsatellite loci were derived from the 2,921 contigs longer than 500 bp. A total of 180 primer sets were designed from the 911 microsatellite loci and screened in eight Q. variabilis individual trees sampled from a natural stand to obtain polymorphic loci. As a result, a total of thirteen polymorphic microsatellite loci were selected and used for estimating population genetic parameters in the 54 individual trees. The mean number of effective alleles was 4.996 ranging from 2.439 to 7.515. The observed heterozygosity and the expected heterozygosity ranged between 0.731 and 1.000 with an average of 0.873 and from 0.590 to 0.867 with an average of 0.766, respectively. Null alleles were not detected in all loci. No significant linkage disequilibrium was detected after Bonferroni correction in all loci. In the near future, these novel polymorphic microsatellite markers will be used to study population and conservation genetics of Q. variabilis of Korea in more detail.
Chun Mae Dong;Mi-Nan Lee;Jae Koo Noh;Jin Woo Park;Young-Ok Kim;Eun-Mi Kim
Journal of Life Science
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v.33
no.8
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pp.623-631
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2023
This study was conducted to develop microsatellite markers in Parapristipoma trilineatum using next-generation sequencing. A total of 402,244,934 reads were generated on the Illumina Hiseq X Ten System, yielding 60,738,985,034 bp of sequences. The de novo assembly resulted in 1,320,995 contigs. A total of 952,326 contigs (0.016%) including 151 microsatellite loci were derived from the 1,320,995 contigs longer than 640 bp. A total of 34 primer sets were designed from the 151 microsatellite loci. As a result, 15 microsatellite loci were chosen and used for assuming population genetic parameters in the wild and farmed populations. The mean number of effective alleles was 12, ranging from 6 to 25. The observed heterozygosity (HO) and the expected heterozygosity (HE) ranged between 0.530 and 0.873, with an average of 0.750, and from 0.647 to 0.895, with an average of 0.793, respectively. According to these results, the developed set of 15 microsatellite markers is expected to be useful for the analysis of genetic characteristics in the population of P. trilineatum in Korea. There are requirements now for further genetic information, fishery resource management, breeding guidelines, support with the selection of breeds and studies on the effects of release, all of which will improve species conservation, and through future research, we aim to offer genetic foundational data with that goal.
Microsatellit markers are considered to be very promising genetic markers for genetic linkage analysis. The majority of the markers are as informative as in Caucasians but there are significant ethnic differences in the genetic variations. In order to investigate the genetic variations in the Korean and Japanese populations and their ethnic differences, 51 microsatellite marker loci spanning the whole human chromosome 1 were arranged from a commercially available set (ABI PRISM Linkage Mapping Set-HD5, Applied Biosystems, Foster City, CA, USA), and then determined the allelic frequencies and heterozygosities for these marker loci in the 90 unrelated Korean subjects and 90 unrelated Japanese subjects. Of all 51 markers tested, significant differences were observed when microsatellite allele frequency pattern of Korean was compared with those of Caucasian, while this pattern was highly similar between Korean and Japanese populations. Our data indicate that an extensive verification of public microsatellite markers in a particular population study should be undertaken prior to their linkage studies. Moreover, this information should facilitate genetic linkage studies of various hereditary diseases, especially in the Koreans and Japanese.
The present study demonstrates a new approach that enables effective horse parentage testing using 22 ISAG microsatellite markers involving 6 heads of Thoroughbred horse(TB) and non-TB. In the comparison allele distribution between these horses, the alleles found in the TB were numerously detected in the non-TB. As results, we confirmed that these ISAG microsatellite markers might apply the pedigree registration of Korean native horse(Jeju horse).
Tu, Yunjie;Chen, K.W.;Zhang, S.J.;Tang, Q.P.;Gao, Y.S.;Yang, N.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.1
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pp.1-6
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2006
This experiment first cloned some microsatellite sequences for goose species by magnetic beads enriched method and studied the genetic structure research of 14 indigenous grey goose breeds using 19 developed and 12 searched microsatellite markers with middle polymorphism. According to the allele frequencies of 31 microsatellite sites, mean heterozygosity (H), polymorphism information content (PIC) and $D_A$ genetic distances were calculated for 31-microsatellite sites. The results showed that 25 of 31microsatellite sites were middle polymorphic, so the 25 microsatellite markers were effective markers for analysis of genetic relationship among goose breeds. The mean heterozygosity was between 0.4985 and 0.6916. The highest was in the Xupu (0.6916), and in the Yan was the lowest (0.4985) which was consistent with that of PIC. The phylogenetic tree was completed through analysis of UPGMA. Fencheng Grey, Shoutou, Yangjiang and Magang were grouped firstly, then Xongguo Grey, Wugang Tong, Changle and Youjiang were the second group; Gang, Yan Xupu and Yili were the third group; Yongkang Grey and Wuzeng were the fourth group. The results could provide basic molecular data for the research on the characteristics of local breeds in the eastern China, and a scientific basis for the conservation and utilization of those breeds.
Microsatellite markers were utilized to investigate genetic diversity among 70 Korean barley varieties (Hordeum vulgare). Ninety nine microsatellite primer pairs were screened for 9 varieties. Twenty primer pairs showed highly polymorphic. The relationship between markers genotypes and 70 varieties was analyzed. A total of 124 polymorphic amplified fragments were obtained by using 20 microsatellite markers. Two to nine SSR alleles were detected for each locus with an average of 6.2 alleles per locus. Average polymorphism information content (PIC) was 0.734, ranging from 0.498 to 0.882. A total of 124 marker loci were used to calculate Jaccard's distance coefficients for cluster analysis using UPGMA. Clustering group was divided 2 groups corresponding to 2-rowed and 6-rowed barley varieties. The phenogram was discriminated all varieties by markers genotypes. These markers may be used wide range of practical application in variety identification and genetic purity assessment of barley.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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