• Journal of Plant Biotechnology
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• 제30권1호
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• pp.59-63
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• 2003

본 실험은 경정에서 다아체 형성을 통하여 Zantedeschia의 기내 대량번식 체계를 확립하기 위하여 실시하였다. Z. 'Best Gold'의 경정에서 다아체 형성률은 BA 2.0∼5.0 mg/L 및 TDZ 0.1∼l.0mg/L가 첨가된 배지에서 63% 이상으로 높았으며, BA 2.0 mg/L가 첨가된 배지에서는 75%로 가장 높았다. BA와 NAA의 혼용첨가는 BA 단용첨가배지와 비교하여 Z. 'Best Gold'의 신초경정에서 다아체의 형성 및 신초분화를 촉진하지 않았다. Z. 'Best Gold'의 형성된 다아체 절편체 (0.7∼1.0 cm)에서 다아체의 증식은 BA 2.0mg/L를 첨가한 배지가 효과적이었다. 형성된 다아체 절편체 (0.7∼l.0 cm)에서 신초의 생육 및 발근은 IBA 1.0∼2.0 mg/L가 첨가된 배지가 적합하였다. Z. 'Childsiana'는 TDZ 0.5 mg/L가 첨가된 배지에서, Z. 'Golden Affair'는 BA 3.0 mg/L 첨가배지가, Z. 'Pacific Pink'는 BA 5.0∼10.0 mg/L가 첨가된 배지에서 신초증식이 양호하였다.

• 식물조직배양학회지
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• 제24권6호
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• pp.351-355
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• 1997

3년생 유럽낙엽송의 실생묘로부터 형성층조직을 분리하여 부정아를 유기하였다. BLG배지에 4.5$\mu$M의 BA가 첨가된 배지에서 형성층 절편체 당 약 25개의 부정아가 형성되어 시험된 여러 가지 BA와 NAA농도 중 최고의 발생율을 보였다. 유기된 부정아는 1/2 GD배지와 LMG배지에서 10주 후 약 2.5cm의 신장을 보였다. GD배지에서는 이보다 낮은 약 1,8cm의 신장을 나타내었다. 발근은 NAA가 $0.54\;\mu\textrm{M}$ 함유된 1/2 GD배지에 2주간 배양하였을때 20% 정도 나타났다. 발근된 shoot들은 NAA가 함유되지 않은 1/2 GD 배지에서 뿌리를 신장시킨 후 온실로 옮겨져 순화되었다. 본 실험의 결과 그동안 낙엽송의 조직배양시료로 사용되지 않았던 형성층 조직의 뛰어난 형태형성능을 보여줌으로써 기내 급속대량증식 뿐 아니라 향후 낙엽송의 체세포 변이주선발이나 형질전환 및 그와 관련된 연구분야에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제31권2호
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• pp.121-126
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• 2004

금낭화 (Dicentra spectabilis L.)는 개발가치가 있는 국내 자생화 중의 하나로서 우수한 품종의 대량생산이 절실히 요구되는 실정이다. 본 연구는 현탁배양을 통한 배발생세포의 대량증식과 체세포배 발생 및 식물체재생의 적정조건을 구명하여 효율적인 기내묘목의 대량생산 체계를 확립하고자 시도되었다. 1.0mg/L 2,4-D SH고체배지에서 유도된 배발생캘러스를 현탁배지에서 증식시킨 결과, 1.0mg/L 2,4-D를 포함한 SH배지에서 MS배지에 비해 증식율이 높게 나타났으며, 체세포배 발생율은 1/2배 SH기본배지에서 가장 높게 나타났다. 250$m\ell$ 삼각플라스크에서 5,000개 이상의 고빈도로 체세포배가 생산되었다. 체세포배로부터 발아유도시에 GA$_3$는 정상적인 식물체로의 재생을 억제하는 효과를 나타내었으며, 정상적인 식물체 재생은 1/2희석 SH배지에서 양호하였다, 신초와 뿌리를 갖는 유식물체를 모래와 원예용상토(5:1, vol)가 혼합된 토양이 함유된 포트에 이식하여 1개월 후 58%의 생존율을 나타내었다. 이상의 결과를 활용하면 체세포배로부터 금낭화의 묘목을 대량생산 할 수 있을 것으로 생각된다.

• 식물조직배양학회지
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• 제24권6호
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• pp.357-360
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• 1997

쇠무릎(A. japonica) 다량증식 방법의 일환으로 액아를 이용한 multiple shoot유도를 위한 최적 조건을 조사하였다. 기내에서 증식하고 있는 식물체로부터 액아를 적출하여 NAA, 2,4-D 및 BA가 여러 농도로. 첨가된 MS 배지(3% sucrose, 0.2% gelrite)에서 6주 간 배양한 결과, shoot의 발생은 1mg/L NAA와 2mg/L BA가 첨가된 처리구에서 액아 당 평균 25.8개로 가장 많았다. 신초의 발생 빈도는 조금 낮지만 발생된 신초가 완전한 식물체로 되기 위한 크기를 고려할 때의 조합은 0.5 mg/L NAA와 1 mg/L BA가 첨가된 처리구에서 액아 당 19.7개의 신초가 발생하여 가장 좋은 결과를 얻었다. 한편 발생된 신초는 절취하여 0.1mg/L IBA가 첨가된 1/2 MS 배지에서 배양했을 때 뿌리의 발생과 신장이 가장 양호하였으며, 식물체의 생육도 왕성하였다. 발근된 식물체를 기외로 이식 후 활착시켜 쇠무릎의 액아 배양을 통한 다량증식의 가능성을 확인하였다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제39권3호
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• pp.182-188
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• 2012

Iris dichotoma Pall. is an important endangered plant belonging to the family Iridaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of I. dichotoma through plant regeneration from leaf, rhizome, and root explant-derived calli. Leaf, rhizome, and root segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D; $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for callus induction. Callus production was highest at $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, where 73.8% and 45.5% of cultured rhizome and root cuttings, respectively, produced calli. The viable calli were maintained at an induced concentration of 2,4-D ($3.0mg{\cdot}L^{-1}$). They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of 2,4-D ($0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with 6-benzyladenine (BA: 0, 1.0 and $3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for adventitious shoot regeneration. The addition of a low concentration of 2,4-D into BA-containing medium significantly increased the frequency of shoot regeneration in leaf, rhizome, and root-derived calli. The highest number of adventitious shoots (26.4 per callus) formed at $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg/l BA. For rooting of the shoots, half- strength MS medium supplemented with different concentrations of indole 3-butyric acid (IBA) $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$ was tested. The optimal results were observed using half-strength MS medium supplemented with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA, on which 98% of the regenerated shoots developed roots with an average of 3.5 roots per shoot within 45 days. The plantlets raised in vitro were acclimatized and transferred to soil with 95% success. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.

• Plant Biotechnology Reports
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• 제2권4호
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• pp.259-265
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• 2008

Picea koraiensis, called Korean spruce, is an evergreen tree and found mostly in northeast Asia. In this study, plant regeneration via somatic embryogenesis from open-pollinated immature zygotic embryos of nine geno-types of elite trees was established. Immature zygotic embryos were cultured onto RJW medium modified from 505 medium with $21.48{\mu}M$ NAA, $2.22{\mu}M$ BA, and $2.32{\mu}M$ KT. The average frequency for all nine genotypes was 74.2%. Embryogenic calluses of the nine genotypes of elite trees were subcultured on RJW basal medium containing $8.06{\mu}M$ NAA, $1.11{\mu}M$ BA, and $1.16{\mu}M$ kinetin. The calluses of three lines, $3^{\sharp}$, $9^{\sharp}$, and $2^{\sharp}$, were actively proliferated but others were not. Somatic embryogenesis was induced from the embryogenic callus in genotypes of $3^{\sharp}$, $9^{\sharp}$, and $2^{\sharp}$ on RJW medium with ABA and $60g\;l^{-1}$ sucrose. Cotyledonary somatic embryos were subjected to a drying process. The drying of embryos by uncapping the culture bottle for 5 days on a clean bench resulted in a high frequency of germination of somatic embryos (87% in RJW medium). However, plantlet conversion from germinated embryos was greatly reduced and the optimal medium for plant conversion was 1/2 WPM or 1/2 BMI medium. In conclusion, we have, for the first time, established a plant regeneration system via somatic embryogenesis in the Korean spruce, which can be applied for rapid micropropagation of elite trees.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제40권3호
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• pp.163-168
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• 2013

Iris odaesanensis Y. N. Lee. is an important endangered and native plant belonging to the family Iridaceae in Korea. This study describes a method for rapid micropropagation of this species via from leaf, rhizome and root explants derived calli. Leaf, rhizome and root explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) for callus induction. Rhizome explants yielded calli at a frequency of 72% when cultured at 1.0 mg/l 2,4-D. Calli were maintained at 1.0 mg/l 2,4-D. These calli were transferred to MS medium supplemented with 0, 0.5, 1.0, and 2.0 mg/l 2,4-D in combination with 0, 0.5, 1.0, and 3.0 mg/l BA for adventitious shoot induction. The highest number of adventitious shoot (228.9 per petri-dish) were formed at 1.0 mg/l 2,4-D and 1.0 mg/l BA. WPM medium was the best to convert calli into plantlets, where up to 98.2% of calli were regenerated into plantlets. This in vitro propagation protocol should be useful for conservation of this endangered plant.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제32권2호
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• pp.129-134
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• 2005

체세포배 유도를 통해 두릅나무 역병 저항성 개체인 '자오'의 효율적인 재분화가 가능하였다. 절편에 따라 배발생 캘러스에 요구되는 생장조절제의 종류가 다르게 나타났다. 잎의 경우 MS 배지에 2,4-D와 TDZ, L-glutamine이 처리된 배지에서 캘러스와 체세포배의 유도가 양호하였으며, 엽병과 뿌리는 2,4-D 단독처리 시 가장 좋은 결과를 얻을 수 있었다. 적정 배양조건하에서 배발생캘러스 유도율은 잎, 엽병, 뿌리로부터 각각 75%, 67% 및 83%를 나타냈다. 삼투압제 처리에 따른 체세포배의 발아율은 sucrose, glucose, maltose모두 90% 이상의 발아율을 보였으나, 식물체 형성은 2% sucrose에서 72%로 가장 좋았다. 어린 식물체는 생장조절제를 첨가하지 않은 1/2MS 배지에서 정상 식물체로 생장하였고, 인공상토에 이식하여 95% 이상 순화하였다. 본 실험결과는 두릅나무 역병 저항성 개체 '자오'의 체세포 배발생을 통한 기내 대량증식이 가능함을 보여주었다.

• Advances in Traditional Medicine
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• 제9권2호
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• pp.174-181
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• 2009

Pterocarpus marsupium, Clitoria ternatea, and Sanseveiria cylindrica are some of the important and endangered medicinal plant species of India. Despite of medicinal properties, antibacterial potential of the plants have not yet been explored. The present study was designed to optimize the in vitro technique for micropropagation and to screen the extracts from leaves and in vitro raised calli for antibacterial properties. Excised leaf-explants from the parent plants were surface sterilized and cultivated on Murashige & Skoog's (MS) medium containing $N^6$-benzyladenine (BA) in concentrations of 1, 2, 5, and $10{\mu}M$. Optimal growth of calli was noticed at a concentration of $5{\mu}M$, therefore the extracts from calli grown at this concentration were further studied for antibacterial activity. Both alcoholic and aqueous extracts from leaves of respective plants, and their in vitro raised calli were tested for antibacterial activity by agar well diffusion method against a range of Gram-positive and Gram-negative bacteria. Aqueous extracts showed antibacterial activity against limited number of bacterial species; notably the extracts of C. ternatea which showed antibacterial activity against Streptococcus pyogenes, Bacillus subtilis and Bacillus cereus. Alcoholic extracts of all three plants showed antibacterial activity against a wider range of bacteria. Among the Gram-positive bacteria, extracts from C. ternatea showed strong antibacterial activity against Bacillus spp., whereas the extracts of S. cylindrica showed good antibacterial potential for Staphylococcus aureus, S. epidermidis and S. pyogenes. The extracts from all three plants showed antibacterial activity against Gram-negative bacteria, including, Salmonella spp. and Shigella dysenteriae; organisms causing enteric fever and dysentery. In most of the cases, the extracts from respective calli showed comparable, and in some cases better, result in comparison to the extracts from parent leaves. To the best of our knowledge this is the first preliminary report on antibacterial potential, especially through calli extracts, of these plants; and in vitro cultivation of the explants may be used to obtain phytotherapeutic compounds.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권3호
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• pp.159-163
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• 1998

배 '신고'의 경정배양을 통한 급속대량증식법을 개발하기 위하여 모수의 수세와 채취시기 및 배지에 첨가되는 생장 조절제 NAA와 BA, sucrose가 경정배양의 각 단계의 생육에 미치는 영향을 구명하고자 하였다. 신초를 채취하는 모수의 수세와 채취시기에 있어서, 중 정도의 수세를 가진 모수로부터 6월에 채취한 경정이 배양확립단계에 가장 적합하였다. 신초생장은 BA 1.0, 2.0㎎/L의 단독처리구에서 가장 좋았으며, NAA의 첨가는 저조한 신초생장과 과도한 callus 발생을 야기하였다. 신초증식단계에서는 BA 단독처리로는 신초의 대량증식이 불가능하였으며, BA 2.0㎎/L와 NAA 0.01㎎/L의 혼합처리구에서 발근단계에 필요한 크기의 신초를 다량으로 얻을 수 있었고, 30g/L 의 sucrose 첨가가 효과적이었다. 발근단계에는 NAA 0.1㎎/L 를 첨가한 1/4MS배지에서 높은 발근율(96%), 1, 2차 근수와 근장을 나타내었으며, 이상의 과정을 통하여 정상적인 소식물체를 얻을 수 있었다.