We have analyzed the MRE3/REC114 gene of Saccharomyces cerevisiae, previously detected in isolation of mutants defective in meiotic recombination. We cloned the MRE3/REC114 gene by complementation of the meiotic recombination defect and it has been mapped to chormosome XIII. The DNA sequence analysis revealed that the MRE3 gene is identical to the REC114 gene. The upstream region of the MRE3/REC114 gene contains a T_4C site, a URS (upstream repression sequence) and a TR (T-rich) box-like sequence, which reside upstream of many meiotic genes. Coincidentally, northern blot analysis indicated that the three sizes of MRE3/REC114 transcripts, 3.4, 1.4 and 1.2 kb, are induced in meiosis. A less abundant transcript of 1.4 kb is detected in both mitotic and meiotic cells, suggesting that it is needed in mitosis as well as meiosis. To examine the role of the MRE3/REC114 gene, we constructed mre3 disruption mutants. Strains carrying an insertion or null deletion of the MRE3/REC114 gene showed slow growth in nutrient medium and the doubling time of these cells increased approximately by 2-fond compared to the wild-type strain. Moreover, the deletion mutant (${\delta}$mre3) displayed no meiotically induced recombination and no viable spores. The mre3/rec114 spore lethality can be suppressed by spo13, a mutation that causes cells to bypass reductional division. The double-stranded breaks (DSBs) which are involved in initiation of meiotic recombination were not detected in the analysis of meiotic chromosomal DNA from the mre3/rec114 disruptant. From these results we suggest that the MRE3/REC114 gene product is essential in normal growth and in early meiotic stages involved in meiotic recombination.
saccharomyces cerevisiae J170, mutant를 사용하여 YEP 배지에서 20시간 진탕 배양하여 생장이 왕성한 영양시기의 효모세포를 얻었다. 이 세포를 sporulation medium에 접종하여 3$0^{\circ}C$에서 20시간 진탕 배양하면 약 80%의 ascospore를 형성함을 볼 수 있었다. 포자형성시기와 생장시기를 택하여 D-C-glucose 운반에 관하여 비교 검토한 결과는 다음과 같다. haploid인 포자형성시나 diploid인 생장시기의 포도당 흡수는 PH6.0에서 최대이었다. 이 두 시기는 포도당 운반은 2,4-dinitrophenol에 의하여 저해되었으므로 포자형성기의 포도당운반도 역시 energy를 요구하는 능동수송과 연관이 있음을 알게 되었아. 생장시기의 포도당 흡수정도는 포자형성기 보다 높았으며 이때에 fructose나 galactose와 포도당흡수의 관계는 서로 경쟁적으로 작용함을 알 수 있었다. 효모세포의 당 성분은 ribose, mannose, $\alpha$,$eta$-glucose로 되어 있으며 특히 포자형성기의 mannose 함량은 영양세포 때보다 현저히 적었다.
Candida pseudotropicalis의 영양요구성 돌연변이 균주들에 대한 원형질체 형성, 재생 그리고 융합에 있어서 bovine serum albumin (BSA), myoinositol 그리고 ergosterol의 증진효과를 연구하였다. 원형질체 형성율은 영양요구성 균주의 type에 따라 48%-98%였다. O. 5mg/ml의 myoinositol과 0.1mg/ml의 ergosterol을 배양액에 첨가하고 4mg/ ml의 BSA을 원형 질체 형성 완충용액에 첨가했을 때는 50~100%의 원형절체 형성윷을 얻었다. 영양요구성 균주의 생장배지에 myoinositol과 ergosterol을 동시에 첨가하고 원형질체 형성 완충용액에 BSA를 침가하면 2.2-3.0애의 원형질체 재생율 증진을 보여주었다. 원형질체 융합의 최적조건에서 상보적 영양요구성 균주간의 융합율은 $7.0\times 10^{-4}$ ~ $1.5\times 10^{-3}$ 이였으며 상기화합물을 처리하지 않고 얻은 융힐l율과 비교해서 1. 9-2. 3배의 증가를 보였다. 이러힌 결과로 본 연구에서 사용된 균주들에서는 상기화합물 처리 에 의해 원형질체 재생은 물론 세포융합율도 증진됨을 알 수 있었다.
S.albus subsp.와 S.globosus에서 Tetracyclin과 Streptomycin 같은 항생물질을 생성된다는 것은 이미 전보에서 밝힌 바 있다. 이들 두 種의 생장최적조건과 항생제 생성정도와의 관계를 배지성분과 그 농도에 따라 검토하였다. 그 결과 S.albus subsp.와 S.globosus 모두 배양시간이 130~150시간이 될때 항생물질 생성과 균체량이 최고에 달했다. 그리고 PH는 그 근처에서만 떨어지는 현상을 볼 수 있었다. 또한 두 균주 모두 탄소원으로서는 starch(4~5%)질소원으로서는 soybeam meal(1.5~2.0%)에서 균체의 생장도 양호하고 향균력도 높게 나타났다. 이외의 성분으로는 calcium carbonate(2mg/ml), potassium phosphate' dibasic(0.05M~0.01M), magnesium sulfate(0.01M~0.03M) ferric chloride(0.01M)가 가장 생장에 좋은 배지농도로 추정되며 zinc ion(0.0005M)은 균체생장을 현저하게 억제하였다.
담자균류 백색부후균의 일종인 흰구름버섯(Coriolus hirsutus)을 실험균주로 하여 수종의 난분해성 방향족염료의 분해능을 측정하였다. 사용된 4종류의 염료 중, triphenyl methane 염료인 bromophenol blue가 탈색율 95% 이상으로 가장 잘 탈색되었으며, Congo red와 Poly R-478은 이보다는 낮은 57%, 55%가 탈색되었다. 그러나, heterocyclic 염료인 methylene blue는 본 균주에 의해 거의 탈색되지 않았으며, UV-visible spectrum상에서의 심색성 이동만 관찰되었다. 세포외 laccase와 peroxidase의 활성은 각 염료의 탈색율과 비례하여 나타났으며, 최대 활성 또한 최대 탈색시기에 관찰되었다. 효소의 활성 염색시 모든 염료의 탈색배지에서 공통적인 laccase와 peroxidase의 활성 띠가 관찰되었다. 이러한 결과로 볼 때, 세포외 laccase와 peroxidase가 난분해성 염료의 탈색에 중요한 역할을 할 것으로 판단된다.
아미노산이 김치유산균에 미치는 영향을 검토하였다. 발효온도 $15^{\circ}C$에서 형태가 다른 집락을 73개 분리하였다. 이 중에서 69.9%가 덱스트란 생성균주이었으며, Leuconostoc 속이 4.1%, Lactobacillus 속이 65.8%를 차지하였다. Tyrosine 500 ppm이 되도록 첨가한 배지에서 분리균주의 생장은 완전히 억제되었다. 그러나 실제로 이 아미노산을 첨가하여 만든 김치에서 분리된 총 집락수는 58개 이었고, 이 중에서 덱스트란 생성균주가 70.7%로 큰 변동이 없었으나 대신에 Leuconostoc 속이 41.4%로 증가하였고, Lactobacillus 속은 29.3%로 감소하였다. 각 속에서 우점종은 Leu. mesenteroides와 Lac. minor이었다. 따라서 실제 김치에서 tyrosine은 Lactobacillus 속의 생장을 억제하는 효과가 있었다.
우리는 처음으로 바닷물에서 히알우론산 분해효소를 생산하는 균주인 Vibrio splendidus KCTC 11899BP를 분리하고 동정했다. KCTC 11899BP는 히알우론산(HA)이 기초 배지에 첨가 될 때에만 Hyaluronate lyase를 생산하며, 이 효소는 HA의 ${\beta}$-(1, 4) 결합을 분해하여 이당(disaccharide)을 생성시키는 효소로서 미생물에 의해 생산된다. 게놈 염기서열분석을 통해, KCTC 11899BP의 게놈은 2개의 염색체를 보유하는 다른 Vibrio sp.와 유사하게 각각 3,522 kb (contig 1)와 1,986 kb (contig 2)인 두 개의 원형 contig로 구성되어 있다는 것을 확인하였다. 또한 4,700개의 예측 오픈 리딩 프레임, G + C 함량 44.12%, 137개의 tRNA 유전자 및 46개의 rRNA 유전자를 포함하고 있다는 것을 확인했다.
본 연구는 과메기의 위생적 품질 및 저장기간을 연장하기 위한 감마선 조사의 효과를 조사하기 위해 실시하였다. 과메기를 0, 3, 5, 7, 10 kGy의 선량으로 감마선 조사하여 저장하면서 미생물 생육을 검사하였다. 미생물학적 관점에서 비조사구는 저장동안 빠르게 품질이 저하되었고, 선택배지를 이용한 시험에서 병원균으로 추정되는 균들의 생육이 관찰되었다. 그러나, 감마선 조사된 시료에서 총균수 및 병원균으로 추정되는 균들의 생육이 조사선량이 증가함에 따라 감소되었고, 7에서 10 kGy의 감마선 조사가 과메기의 저장에 적절하고 효과적인 선량으로 나타났다.
Metal nanoparticles have been intensively studied within the past decade. Nano-sized materials have been an important subject in basic and applied sciences. Zinc oxide nanoparticles have received considerable attention due to their unique antibacterial, antifungal, and UV filtering properties, high catalytic and photochemical activity. In this study, microbiological aspects of scale formation in PVC pipelines bacteria and fungi were isolated. In the emerging issue of increased multi-resistant properties in water borne pathogens, zinc oxide (ZnO) nanoparticle are being used increasingly as antimicrobial agents. Thus, the minimum bactericidal concentration (MBC) and minimum fungal concentration of ZnO nanoparticles towards pathogens microbe were examined in this study. The results obtained suggested that ZnO nanoparticles exhibit a good anti fungal activity than bactericidal effect towards all pathogens tested in in-vitro disc diffusion method (170 ppm, 100 ppm and 30 ppm). ZnO nanoparticles can be a potential antimicrobial agent due to its low cost of production and high effectiveness in antimicrobial properties, which may find wide applications in various industries to address safety issues. Stable ZnO nanoparticles were prepared and their shape and size distribution characterized by Dynamic light scattering (35.7 nm) and transmission electron microscopic TEM study for morphology identification (20 nm), UV-visible spectroscopy (230 nm), X-ray diffraction (FWHM of more intense peak corresponding to 101 planes located at $36.33^{\circ}$ using Scherrer's formula), FT-IR (Amines, Alcohols, Carbonyl and Nitrate ions), Zeta potential (-28.8). The antimicrobial activity of ZnO nanoparticles was investigated against Bacteria and Fungi present in drinking water PVC pipelines biofilm. In these tests, Muller Hinton agar plates were used and ZnO nanoparticles of various concentrations were supplemented in solid medium.
본 연구는 포도의 과피에서 분리한 효모 Pichia의 생리활성 증진효과를 연구하기 위한 것이다. 두 균주는 18S rRNA 염기서열분석에 근거하여 Pichia manshurica GU-3와 Pichia terricola GU-4로 각각 동정되었다. 주사전자현미경 분석을 통해 YPD 배지에서 배양한 두 분리세균은 세포표면에 출아와 출아흔적을 가지고 있었으며 전형적인 타원형을 보여주었다. 단일 및 혼합 Pichia 배양의 생리활성을 비교 관찰한 결과, 72시간 배양한 후, 혼합배양에서 tyrosinase억제, ACE 억제, 항산화 최대활성은 각각 81.7%, 45.9%, 42.7%로 나타났다. Superoxide dismutase-유사활성은 혼합배양에서 약 30%로 측정되었다. 이 연구를 통해서 혼합배양된 Pichia 종들은 생리활성을 증진시켰으며, 생리활성을 가지는 산물 개발의 가능성을 가지는 것으로 입증되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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