Hur Cheol-Goo;Kim Sunny;Kim Chang-Hoon;Yoon Sung-Ho;In Yong-Ho;Kim Cheol-Min;Cho Hwan-Gue
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.5
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pp.683-688
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2006
We have developed a program for generating shotgun data sets from known genome sequences. Generation of synthetic data sets by computer program is a useful alternative to real data to which students and researchers have limited access. Uniformly-distributed-sampling clones that were adopted by previous programs cannot account for the real situation where sampled reads tend to come from particular regions of the target genome. To reflect such situation, a probabilistic model for biased sampling distribution was developed by using an experimental data set derived from a microbial genome project. Among the experimental parameters tested (varied fragment or read lengths, chimerism, and sequencing error), the extent of sequencing error was the most critical factor that hampered sequence assembly. We propose that an optimum sequencing strategy employing different insert lengths and redundancy can be established by performing a variety of simulations.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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2001.06a
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pp.15-19
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2001
Creating an artificial strain with a minimal gene set for a specific purpose is every biologist's dream. With the complete genome sequencing of more than 50 microorganisms and extensive functional analyses of their genes, it is possible to design a genetic blueprint for a simple custom-designed microbe with the minimal gene set. Two different approaches are being considered. The first 'top-down' approach is trimming the genome to a minimal gene set by selectively removing genes of an organism thought to be unnecessary based on microbial genomics. The second 'bottom-up' approach is to synthesize the proposed minimal genome from basic chemical building blocks. The 'top-down' approach starting with the genome of a well known microorganism is more technically feasible, whereas the bottom-up approach may not be attainable in the nearest future because of the lack of the complete functional analysis of the genes needed for a life. Here in this study, we used the top-down approach to minimize the E. coli genome to create an artificial organism with 'core' elements for self-sustaining and self-replicating cells by eliminating unnecessary genes. Using several different kinds of sophisticated deletion techniques combined with a p:1age and transposons, we deleted about 19% of the E. coli genome without causing any damages to cellular growth. This smaller E. coli genome will be further reduced to a genome with a minimal gene l;et essential for cell life. This minimized E. coli genome can lead to the construction of many custom-designed strains with myriad practical and commercial applications.
Here we report the complete genome sequence of Staphylococcus xylosus S170, strong biofilm-producing strain, which comprised a single circular 2,910,005 bp chromosome and 32.97% G + C content. The genome included 2,674 protein-coding sequences, 22 rRNA genes, and 57 tRNA genes. Gene analysis of S. xylosus S170 could contribute to better understanding of biofilm-forming mechanisms.
Abstract A direct approach was used to retrieve active lipases from Paenibacillus polymyxa genome databases. Twelve putative lipase genes were tested using a typical lipase sequence rule built on the basis of a consensus sequence of a catalytic triad and oxyanion hole. Among them, six genes satisfied the sequence rule and had similarity (about 25%) with known bacterial lipases. To obtain the six lipase proteins, lipase genes were expressed in E. coli cells and lipolytic activities were measured by using tributyrin plate and pnitrophenyl caproate. One of them, contig 160-26, was expressed as a soluble and active form in E. coli cell. After purifying on Ni-NTA column, its detailed biochemical properties were characterized. It had a maximum hydrolytic activity at $30^{\circ}C$ and pH 7- 8, and was stable up to $40^{\circ}C$ and in the range of pH 5- 8. It most rapidly hydrolyzed pNPC$_6$ among various PNPesters. The other contigs were expressed more or less as soluble forms, although no lipolytic activities were detected. As they have many conserved regions with lipase 160-26 as well as other bacterial lipases throughout their equence, they are suggested as true lipase genes.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2002.10a
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pp.185-193
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2002
We have developed GComp as an analysis tool for comparative analysis of microbial genomes. Thetool uses BLAST or FASTA as a preprocessing program for local alignments, parses the homology search results, and generates tables and files to show homology relationship between two genomes at a glance. The interface for graphical representation of the comparative genomic analysis has been also implemented. Through analysis of a few pairs of microbial genome sequences, the program has been proved to be practically useful and a few additional features have been devised and designed, which will be added in the further development.
The genus Paenibacillus is a new group of bacilli separated from the genus Bacillus, and most of species have been isolated from soil. In the present study, we collected 450 spore-forming bacilli from the roots of winter crops, such as barley, wheat, onion, green onion, and Chinese cabbage, which were cultivated in the southern part of Korea. Among these 450 isolates, 104 Paenibacillus-like isolates were selected, based on their colony shape, odor, color, and endospore morphology, and 41 isolates were then finally identified as Paenibacillus spp. by 16S rDNA sequencing. Among the 41 Paenibacillus isolates, 23 were classified as P. polymyxa, a type species of the genus Paenibacillus, based on comparison of the 16S rDNA sequences with those of 32 type strains of the genus Paenibacillus from the GenBank database. Thirty-five isolates among the 41 Paenibacillus isolates exhibited antagonistic activity towards plant fungal and bacterial pathogens, whereas 24 isolates had a significant growth-enhancing effect on cucumber seedlings, when applied to the seeds. An assessment of the root-colonization capacity under gnotobiotic conditions revealed that all 41 isolates were able to colonize cucumber roots without any significant difference. Twenty-one of the Paenibacillus isolates were shown to contain the nifH gene, which is an indicator of $N_{2}$ fixation. However, the other 20 isolates, including the reference strain E681, did not incorporate the nifH gene. To investigate the diversity of the isolates, a BOX-PCR was performed, and the resulting electrophoresis patterns allowed the 41 Paenibacillus isolates to be divided into three groups (Groups A, B, and C). One group included Paenibacillus strains isolated mainly from barley or wheat, whereas the other two groups contained strains isolated from diverse plant samples. Accordingly, the present results showed that the Paenibacillus isolates collected from the rhizosphere of winter crops were diverse in their biological and genetic characteristics, and they are good candidates for further application studies.
Pectobacterium carotovorum subsp. actinidiae KKH3 is an Enterobacteriaceae bacterial pathogen that infects kiwi plants, causing canker-like symptoms that pose a threat to the kiwifruit industry. Because the strain was originally isolated from woody plants and possesses numerous plant cell wall-degrading enzymes, this draft genome report provides insight into possible bioconversion applications, as well as a better understanding of this important plant pathogen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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