In this study, an integrated microelectrode array was fabricated on glass slide using microfabrication technology. Probe DNAs consisting of mercaptohexyl moiety at their 5-end were spotted on the gold electrode using micropipette or DNA arrayer utilizing the affinity between gold and sulfur. Cyclic voltammetry in 5mM ferricyanide/ferrocyanide solution at 100 mV/s confirmed the immobilization of probe DNA on the gold electrodes. When several DNAs were detected electrochemically, there was a difference between target DNA and control DNA in the anodic peak current values. It was derived from specific binding of Hoechst 33258 to the double stranded DNA due to hybridization of target DNA. It suggested that this DNA chip could recognize the sequence specific genes. It suggested that multichannel electrochemical DNA microarray is useful to develop a portable device for clinical gene diagnostic system.
This research aims to develop the multiple channel electrochemical DNA chip that has the above characteristic and be able to solve the problems. At first, we fabricated a high integration type DNA chip array by lithography technology. It is able to detect a plural genes electrochemically after immobilization of a plural probe DNA and hybridization of non-labeling target DNA on the electrodes simultaneously. It suggested that this DNA chip could recognize the sequence specific genes. It suggested that multichannel electrochemical DNA microarray is useful to develop a portable device for clinical gene diagnostic system.
Proceedings of the Korean Information Science Society Conference
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2006.10a
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pp.6-10
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2006
마이크로어레이 실험의 등장으로 한 번에 수백 개에서 수천 개의 유전자를 실험할 수 있게 되었다. 이는 기존의 실험과 비교했을 때 질적인 측면과 양적인 측면에서 가히 혁신적이라 할 수 있다. 마이크로어레이 칩을 이용한 실험에서 쏟아져 나오는 엄청난 데이터를 비교, 분석, 관리하기 위해서는 실험실의 마이크로어레이 분석 소프트웨어나 시스템간의 데이터 형식이 호환되어야 하며, 소프트웨어의 지원 또한 획기적이고 효율적이어야 한다. 본 논문에서는 다양한 종류의 마이크로어레이 입력 데이터 및 분석 데이터를 다룰 수 있고, 표준 파일 형식으로의 변환 기능을 제공하며, 마이크로어레이 이미지 분석용 소프트웨어인 ArrayMall[1,2]과 유전자 조절 네트워크 분석 시스템인 GENAW[3]를 통합하고 마이크로어레이 실험데이터의 분석, 관리 및 데이터 공유를 위한 분산 시스템인 SMILE[4]에 대해 소개한다.
Immunoassays have become indispensable tools and achieved great importance in scientific and medical research. However, typical immunoassays are time-consuming and use complex, multi-step procedures. In this study, we introduce a new immunoassay system for the quantification of several analytes at a time without any washing steps. It is comprised of a detector solution with fluorescence-labeled antibodies and a test strip with immobilized capture antibodies. Using a micro-array scanner, the antigen-antibody complex was quantitatively determined by measuring the intensities of fluorescence on the capture lines or dots of nitrocellulose membrane. This method demonstrated its rapid quantitative determination of analytes without many processing steps as well as specific identification of multiple analytes in biological specimens.
Yi, TacGhee;Lee, Hyun-Joo;Cho, Yun-Kyoung;Jeon, Myung-Shin;Song, Sun U.
IMMUNE NETWORK
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v.14
no.1
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pp.54-65
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2014
Bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent, with the ability to differentiate into different cell types. Additionally, the immunomodulatory activity of MSCs can downregulate inflammatory responses. The use of MSCs to repair injured tissues and treat inflammation, including in neuroimmune diseases, has been extensively explored. Although MSCs have emerged as a promising resource for the treatment of neuroimmune diseases, attempts to define the molecular properties of MSCs have been limited by the heterogeneity of MSC populations. We recently developed a new method, the subfractionation culturing method, to isolate homogeneous human clonal MSCs (hcMSCs). The hcMSCs were able to differentiate into fat, cartilage, bone, neuroglia, and liver cell types. In this study, to better understand the properties of neurally differentiated MSCs, gene expression in highly homogeneous hcMSCs was analyzed. Neural differentiation of hcMSCs was induced for 14 days. Thereafter, RNA and genomic DNA was isolated and subjected to microarray analysis and DNA methylation array analysis, respectively. We correlated the transcriptome of hcMSCs during neural differentiation with the DNA methylation status. Here, we describe and discuss the gene expression profile of neurally differentiated hcMSCs. These findings will expand our understanding of the molecular properties of MSCs and contribute to the development of cell therapy for neuroimmune diseases.
In the analysis of microarray data with a small number of arrays, the most important task is the detection of differentially expressed genes by a significance test. For this purpose, one needs to construct a null distribution based on a large number of genes and one of the best way for constructing the null distribution for a small number of arrays is by means of permutation methods. In this paper we propose simple test statistics and permutation methods that are appropriate in constructing the null distribution. In a simulation study, we compare the null distributions generated by the proposed test statistics and permutation methods with the previous ones. With an example microarray data, differentially expressed genes are determined by applying these methods.
Background: Chronic myeloid leukemia (CML) is a myeloproliferative disorder of hematopoietic stem cell scarrying the Philadelphia (Ph) chromosome and an oncogenic BCR-ABL1 fusion gene. The tyrosine kinase inhibitor (TKI) of BCR-ABL1 kinase is a treatment of choice for control of CML. Objective: Recent studies have demonstrated that miRNAs within exosomes from cancer cells play crucial roles in initiation and progression. This study was performed to assess miRNAs within exosomes of K562 cells. Methods: miRNA microarray analysis of K562 cells and K562 cell-derived exosomes was conducted with the 6th generation miRCURYTM LNA Array (v.16.0). Gene ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) analyses were also carried out. GO terms and signaling pathways were categorized into 66 classes (including homophilic cell adhesion, negative regulation of apoptotic process, cell adhesion) and 26 signaling pathways (such as Wnt). Results: In exosomes, 49 miRNAs were up regulated as compared to K562 cells, and two of them were further confirmed by quantitative real-time PCR. There are differentially expressed miRNAs between K562 cell derived-exosomes and K562 cells. Conclusion: Selectively expressed miRNAs in exosomes may promote the development of CML via effects on interactions (e.g. adhesion) of CML cells with their microenvironment.
Lee, Jin Hwan;Kim, Hyo Jeong;Yoon, Jung Min;Cheon, Eun Jung;Lim, Jae Woo;Ko, Kyong Og;Lee, Gyung Min
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.59
no.sup1
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pp.19-24
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2016
Constitutional interstitial deletions of the long arm of chromosome 5 (5q) are quite rare, and the corresponding phenotype is not yet clearly delineated. Severe mental retardation has been described in most patients who present 5q deletions. Specifically, the interstitial deletion of chromosome 5q33.3q35.1, an extremely rare chromosomal aberration, is characterized by mental retardation, developmental delay, and facial dysmorphism. Although the severity of mental retardation varies across cases, it is the most common feature described in patients who present the 5q33.3q35.1 deletion. Here, we report a case of a de novo deletion of 5q33.3q35.1, 46,XY,del(5)(q33.3q35.1) in an 11-year-old boy with mental retardation; to the best of our knowledge this is the first case in Korea to be reported. He was diagnosed with severe mental retardation, developmental delay, facial dysmorphisms, dental anomalies, and epilepsy. Chromosomal microarray analysis using the comparative genomic hybridization array method revealed a 16-Mb-long deletion of 5q33. 3q35.1(156,409,412-172,584,708)x1. Understanding this deletion may help draw a rough phenotypic map of 5q and correlate the phenotypes with specific chromosomal regions. The 5q33.3q35.1 deletion is a rare condition; however, accurate diagnosis of the associated mental retardation is important to ensure proper genetic counseling and to guide patients as part of long-term management.
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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2003.10a
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pp.174-174
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2003
There are many synthetic chemicals, such as di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) and dibutyl phthalate (DBP), used in chemical reaction processes in industry. The establishment of toxicity and detection of synthetic chemicals that may pose a genetic hazard in our enviornment is subjects of great concern at present DEHP, a ubiquitous phthalate plasticizer, induces a wide range of developmental and reproductive toxicities in mammals. DEHP belongs to the large diverse class of peroxisome proliferator compounds, which include herbicides, hypolipidemic drugs. DBP is a plasticizer used to products containing nitrocellulose, polyvinyl acetate, and polyvinyl chloride such as food wraps and blood bags. DBP is also used in cosmetics as a solvent and fixative for perfumes, a suspension agent for solids, an antifoamer, a skin emollient, and hair spray The present study was performed to examine patterns of gene expression in MCF-7 cells following DEHP and DBP exposure. Changes in gene expression were determined by microarray analysis using KISTCHIP-400 including 401 endocrine related genes based on public database and research papers. Of the genes analysis, we determined that genes detected by array showed a 2-fold or greater change in their expression level(increase or decrease). The results of this study demonstrate that a number of genes were differentially expressed in MCF-7 cells but these changes were not significant. Therefore, we keep going this study using microarray analysis and future studies will examine changes of gene expression on time-course and does treatment in variable cell lines.
Ahn, Mi Young;Hwang, Jae Sam;Yun, Eun Young;Kim, Min-Ji;Park, Kun-Koo
Toxicological Research
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v.31
no.2
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pp.173-180
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2015
Extract from Gryllus bimaculatus crickets inhibits oxidation at the DNA level, with reduced production of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG). Microarray analyses were performed with a rat 28K cDNA clone set array to identify the gene expression profiles of aged (10 months old) Wistar Kyoto rats treated for one month with 100 mg/kg G. bimaculatus ethanol extract to assess the effects. The extract produced a meaningful anti-edema effect, evident by the inhibition of creatinine phosphokinase activity. The weights of abdominal and ovarian adipose tissues were reduced and the proportion of unsaturated fatty acids in adipose tissues was increased in an extract dose-dependent manner. Compared with untreated control rats, rats treated with the extract displayed the upregulation of 1053 genes including Fas (tumor necrosis factor receptor superfamily, member 6), Amigo3 (adhesion molecule with an immunoglobulin-like domain), Reticulon 4, 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme (Hmgcr; a reductase), related anti-fatigue (enzyme metabolism), and Rtn antioxidant, and the downregulation of 73 genes including Ugt2b (UDP glycosyltransferase 2 family), Early growth response 1, and Glycoprotein m6a. Data suggest that G. bimaculatus extract may have value in lessening the effects of aging, resulting in a differential gene expression pattern indicative of a marked stress response and lower expression of metabolic and biosynthetic genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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