Graft transmission and cytopathological studies of a severe pear disease, pear black necrotic leafspot(PBNLS), were carried out to determine the causal agent of the disease. No evidence was found that a fungal or bacterial pathogen could be the causal agent of the disease. Attempts to transmit the agent by sap-inoculation to other plants including herbaceous hosts failed. How-ever, the pathogen was readily graft-transmitted from symptomatic diseased pears to healthy pears. Graft transmission of the pathogen was also demonstrated by using an indicator plant, PS-95, developed in the laboratory through various grafting methods. Ultrastructural study of the disease revealed the consistent presence of flexuous rod-shaped virus-like particles (VLP) in the symptomatic leaves of both Niitaka cultivar and indicator pear, PS-95. The particles, approximately 12 nm in diameter with undetermined length, occurred in the cytoplasm of mesophyll parenchyma cells. Cells with VLPs also contained fibril-containing vesicles, which are common in cells infected with plant viruses with ssRNA genome. The vesicles were formed at the tonoplast. Based on the symptomatology, the presence of fibril-containing vesicles, and graft-transmissibility, it is believed that the VLPs that occurred on symptomatic leaves of black necrotic leafspot of pear are viral in nature, possibly those of a capillovirus.
Four kinds of leaves with different shapes of leaf blade were used as experimental materials to establish an optimum condition for treating leaves to obtain skeleton leaves. Effective concentration and length of soaking time in a hot NaOH solution, which resulted in high valued ornaments, were 60% (v/v) for 50 minutes for Acer buergerianum (palmatifid), 20% (v/v) for 50 minutes for Ilex cornuta (serrate), 20-60% (v/v) for 70 minutes for Quercus mongolia (lobed), and 20-40% (v/v) for 70 minutes for Quercus palustris (parted). Through a series of the process of soaking leaves in a hot NaOH solution, rinsing or brushing to remove mesophyll, drying, and dying, high quality ornaments could be obtained.
This study was to investigate defense mechanisms on cassava induced by salicylic acid formulation (SA) against anthracnose disease. Our results indicated that the SA could reduce anthracnose severity in cassava plants up to 33.3% under the greenhouse condition. The 𝛽-1,3-glucanase and chitinase enzyme activities were significantly increased at 24 hours after inoculation (HAI) and decrease at 48 HAI after Colletotrichum gloeosporioides challenge inoculation, respectively, for cassava treated with SA formulation. Synchrotron radiation-based Fourier-transform infrared microspectroscopy spectra revealed changes of the C=H stretching vibration (3,000-2,800 cm-1), pectin (1,740-1,700 cm-1), amide I protein (1,700-1,600 cm-1), amide II protein (1,600-1,500 cm-1), lignin (1,515 cm-1) as well as mainly C-O-C of polysaccharides (1,300-1,100 cm-1) in the leaf epidermal and mesophyll tissues treated with SA formulations, compared to those treated with fungicide carbendazim and distilled water after the challenged inoculation with C. gloeosporioides. The results indicate that biochemical changes in cassava leaf treated with SA played an important role in the enhancement of structural and chemical defense mechanisms leading to reduced anthracnose severity.
These studies were carried out to select somatic hybrid using selectable marker genes of Nicotiana glauca transformed by NPTII gene and Solanum tuberosum transformed by T- DNA, and to study characteristics of transformant. The results are summarized as follows. 1. Crown gall tumors and hairy roots were formed on potato tuber disc infected by A. tumefaciens Ach5 and A. rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. 2. Callus formation from hairy root was prompted on the medium containing 2, 4 D 2mg/I with casein hydrolysate lg/l. 3. The survival ratio of crown gall tumor callus derived from potato increased on the medium containing the activated charcoal 0. 5-2. 0mg/I because of the preventions on the other hand, hairy roots were necrosis on the same medium. 4. Callus derived from hairy root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2, 4-D 2mg/I and casein hydrolysate lg/l. 5. The binary vector pGA643 was mobilized from E. coli MC1000 into wild type Agrobacteriurn tumefaciens Ach5, A. tumefaciens $A_4T$ and disarmed A. tuniefaciens LBA4404 using a triparental mating method with E. ccli HB1O1/pRK2013. Transconjugants were obtained on the minimal media containing tetracycline and kanamycin. pGA643 vectors were confirmed by electrophoresis on 0.7% agarose gel. 6. Kanamycin resistant calli were selected on the media supplemented with 2, 4-D 0.5mg/1 and kanamycin $100\mug$/ml after co- cultivating with tobacco stem explants and A. tumefaciens LBA4404/pGA643, and selected calli propagated on the same medium. 7. The multiple shoots were regenerated from kanamycin resistant calli on the MS medium containing BA 2mg/l. 8. Leaf segments of transformed shoot were able to grow vigorusly on the medium supplemented with high concentration of kanamycin $1000\mug$/ml. 9. Kanamycin resistant shoots were rooting and elongated on medium containing kanamycin $100\mug$/ml, but normal shoot were not. 10. For the production of protoplast from potato calli transformed by T-DNA and mesophyll tissue transformed by NPTII gene, the former was isolated in the enzyme mixture of 2.0% celluase Onozuka R-10, 1.0% dricelase, 1.0% macerozyme. and 0.5M mannitol, the latter was isolated in the enzyme mixture 1.0% Celluase Onozuka R-10, 0.3% macerozyme, and 0.7M mannitol. 11. The optimal concentrationn of mannitol in the enzyme mixture for high protoplast yield was 0.8M at both transformed tobacco mesophyll and potato callus. The viabilities of protoplast were shown above 90%, respectively. 12. Both tobacco mesophyll and potato callus protoplasts were fused by using PEG solution. Cell walls were regenerated on hormone free media supplemented with kanamycin after 5 days, and colonies were observed after 4 weeks culture.
The effect of leaf water content on apparent photosynthesis and respiration of tobacco plants(five varieties) was studied under the condition without the irrigation for 10 days after the plants were sufficiently watered on the first day. The wild race (N. longiflora) among varieties showed highest apparent photosynthesis (AP) and AP had a positive correlation with specific leaf weight. N. longiflora and Andongyeob were different in their AP from the other varieties significantly under the water stress condition. Respiration rate also decreased to be simillar to AP except slight increase at early stage of water deficit. The stomatal resistance and the mesophyll resistance increased in the stressed plants. The water stress resistant character seems to be mainly due to open stomata.
This study was conducted to obtain a basic information on the structural and histological characteristics of Gerbera hybrida Hort. leaf injured by american serpentine leafminer (ASL), Liriomyza trifolii, by using light and scanning electron microscope (SEM). Based on the anatomical observation of leaf blade injured by L. trifolii, the injury process could be divided into three stages. In the initial stage, the punctured tiny holes where ASL layed eggs after suction in the upperside of leaf were observed in the palisade parenchyma. In the middle stage, the hatched larvae made mines in the palisade parenchyma only. In the final stage, the mature larvae grew up making the mines bigger, and just before going out from the epidermis, it injured the inside of leaf containing one layer palisade parenchyma and two layers of spongy parenchyma.
Autophagy degrades toxic materials and old organelles, and recycles nutrients in eukaryotic cells. Whereas the studies on autophagy have been reported in other eukaryotic cells, its functioning in plants has not been well elucidated. We analyzed the roles of OsATG10 genes, which are autophagy-related. Two rice ATG10 genes - OsATG10a and OsATG10b - share significant sequence homology (about 75%), and were ubiquitously expressed in all organs examined here. GUS assay indicated that OsATG10b was highly expressed in the mesophyll cells and vascular tissue of younger leaves, but its level of expression decreased in older leaves. We identified T-DNA insertional mutants in that gene. Those osatg10b mutants were sensitive to treatments with high salt and methyl viologen (MV). Monodansylcadaverine-staining experiments showed that the number of autophagosomes was significantly decreased in the mutants compared with the WT. Furthermore, the amount of oxidized proteins increased in MV-treated mutant seedlings. These results demonstrate that OsATG10b plays an important role in the survival of rice cells against oxidative stresses.
Morphology, anatomy and diurnal acid fluctuations were investigated monthly for the succulent C4 dicot Portulaca grandiflora Hook. growing under natural environmental conditions. Modified Kranz-Type sturcture and typical CAM-like cells were shown in leaves and stems, respectively. Values of indices of mesophyll succulence inleaves stems were 5.62 and 16.68, respectively. The number of stomata were 1476$\textrm{cm}^{-2}$ in leaves while the stomata in stems were not observed through growing seasons from spring to summer. However, on Sep. 16, 1981 in defoliate autumn season, stomata were begun to be produced for the first time in stems and the number were increased gradually to 216$\textrm{cm}^{-2}$ on Oct. 29. This feature can be interpreted as a seasonal plant dimorphism. P. grandiflora exhibited a diurnal fluctuation of titratable acidity in leaves and stems. Seasonal amplitudes of acid fluctuation in stems were as follows: 27 $\mu$eq./g.f.wt. on Sep. 21; 57$\mu$eq/g.f.wt. on Oct. 3; 80$\mu$eq./g.f.wt. on Oct. 21. Such the results in seasonal amplitude were able to consider due to decrease of light period and cool night air temperature according to change of season. Also, the naturally defoliated stems which had already stomata exhibited usual diurnal acid fluctuation, on the other hand the treated stems which possessed artificially closed stomata showed a few of acid fluctuation. Especially, stomata in stems are developed by seasonal dimorphism and activated stomata participate in CAM behavior of stems.
This experiment was performed to observe morphological changes in rice leaf tissue caused by a successive UV-B radiation. Effect of UV-B radiation on the structural alteration of tissue was not visually found, however, Photosynthate containing phosphate was sharply reduced in proportion with an increase of UV-B radiation. Fundamental components of cuticle layer were being degraded after 6 h of UV-B radiation compared to the control. UV-B-induced mesophyll cell appeared altered because of water stress, the shape of chloroplast appeared to be considerably shrunk and chloroplast thylakoid membranes were severely destructed. Primary cell wall of UV-B-stressed tissue was entirely scattered or disappeared, and the secondary cell wall due to lignin synthesis and deposition resulted in being thickened, almost 2-times, compared with the control.
Functional stay-green is a beneficial trait that may increase grain yield through the sustained photosynthetic competence during monocarpic senescence in cereal crops. The temporal changes of photosynthesis and related characteristics throughout the grain filling period of a stay-green japonica rice "SNU-SG1" was compared in growth chamber conditions with three high-yielding cultivars(HYVs) and their $F_1$ hybrids with SNU-SG1. SNU-SG1 exhibited a typical characteristic of functional stay-green in terms of chlorophyll degradation and photosynthetic competence during grain filling. According to the photosynthesis-light response curve measured at 10 and 35 d after heading for the flag leaf, SNU-SG1 exhibited higher initial light conversion efficiency and thus higher gross photosynthetic rate at light saturation compared to HYVs. Light saturation point was not different among genotypes, ranging from 1000 to 1500 ${\mu}mol$ photon $m^{-2}s^{-1}$. Net photosynthetic rate at light saturation($P_{max}$) of the upper four leaves in SNU-SG1 was much higher and sustained longer throughout grain-filling than HYVs and $F_1$ hybrids. The sustained high photosynthetic competence of SNU-SG1 during grain filling was ascribed to the longer maintenance of high mesophyll conductance that resulted from not only high chlorophyll content and its delayed degradation but also the slow degeneration of photosystem II(PS II) as judged by chlorophyll fluorescence($F_v/F_m$) of flag leaves. $F_1$ hybrids showed slow degeneration of photosystem II similar to the male parent SNU-SG1 while chlorophyll degradation pattern close to female parents, thus exhibiting a little higher $P_{max}$ than female parents. These results suggest that SNU-SG1 has a typical functional stay-green trait that can be utilized for increasing rice yield potential through the improved dry matter production during grain filling.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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