• 치위생과학회지
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• 제15권2호
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• pp.209-219
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• 2015

치주질환과 관련된 세균인 S. gordonii, F. nucleatum 및 P. gingivalis의 상호작용이 군집 형성에 미치는 영향을 알아보고자 trypticase soy hemin menadione broth에 단독 및 열처리한 사균과 혼합 분주하여 혐기성 균배양조를 통해 $37^{\circ}C$ $CO_2$ 배양기에서 anearobic gas pack 하에 7일간 배양하였다. 군집 형성 정도를 확인하기 위해 흡광도를 측정하였으며, 군집 구조 및 형태를 확인하기 위해 주사전자현미경으로 관찰하였다. P. gingivalis의 병원성에 미치는 영향을 확인하기 위해 real-time RT-PCR를 통해 gingipain인 HRgpA를 생성하는 rgpA 유전자에 대한 발현 분석을 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. S. gordonii와 P. gingivalis의 군집 형성은 다른 사균들에 의해 증가하였다. F. nucleatum의 경우 P. gingivalis 사균에 의해 증가하는 양상을 보였으나 S. gordonii 사균에 의해서는 군집 형성이 감소되었다. 따라서 본 실험에 사용된 균주는 군집 형성 시 상호작용 인자뿐 아니라 세균 입자 그 자체 등을 통해서도 서로 영향을 주는 것으로 생각된다.

• Mycobiology
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• 제42권1호
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• pp.52-58
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• 2014

A nucleoside diphosphate-linked moiety X (Nudix) hydrolase-like gene, YSA1, has been identified as one of the gromwell plant extract-responsive genes in Cryptococcus neoformans. Ysa1 is known to control intracellular concentrations of ADP-ribose or O-acetyl-ADP-ribose, and has diverse biological functions, including the response to oxidative stress in the ascomycete yeast, Saccharomyces cerevisiae. In this study, we characterized the role of YSA1 in the stress response and adaptation of the basidiomycete yeast, C. neoformans. We constructed three independent deletion mutants for YSA1, and analyzed their mutant phenotypes. We found that ysa1 mutants did not show increased sensitivity to reactive oxygen species-producing oxidative damage agents, such as hydrogen peroxide and menadione, but exhibited increased sensitivity to diamide, which is a thiol-specific oxidant. Ysa1 was dispensable for the response to most environmental stresses, such as genotoxic, osmotic, and endoplasmic reticulum stress. In conclusion, modulation of YSA1 may regulate the cellular response and adaptation of C. neoformans to certain oxidative stresses and contribute to the evolution of antifungal drug resistance.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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• pp.280-280
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• 1994

혈행 장애 예방 및 치료 약물의 개발을 목적으로 혈소판 기능에 대한 약물의 영향을 연구하는데 있어, 효율적인 실험 조건의 선택은 중요하다. 본 연구에서는 마늘 메탄을 추출물의 혈소판 응집 억제능율 platelet rich plasma(PRP), washed platelet(Ca$^2$비첨가), washed platelet(Ca$^{2+}$ 첨가) 등 세가지 분리 조건을 사용하여 실험하였다. 그 결과 마늘 추출물의 $IC_{50}$/이 각각 2348 $\mu\textrm{g}$/ml, 221 $\mu\textrm{g}$/ml, 851 $\mu\textrm{g}$/ml로서, washed platelet(Ca$^{2+}$ 비첨가)가 마늘 추출물의 혈소판 응집 억제 작용에 가장 민감한 것으로 나타났다. 또한 마늘 추출물과는 다른 기전으로 혈소판 응집 억제 효과를 나타내는 menadione과 propranolol도 이와 동일한 결과를 보였다. 실험 조건에 따른 이러한 차이가 PRP 중에 존재하는 알부민 등과의 단백 결합에의한 약물의 유효농도 감소에 기인한다고 추정되어, washed platelet에 여러 농도의 알부민을 첨가하여 혈소판 응집 억제 실험을 실시한 결과 약물의 $IC_{50}$/은 알부민 농도 의존적으로 증가하였다. 혈소판 응집과 함께 혈소판 기능 변화를 측정하는 지표인 혈소판 분비능을 분비된 ATP를 Luciferin-Luciferase로 측정하여 알아보았다. 그 결과 thrombin에 의한 혈소판의 ATP 유리에 미치는 마늘 추출물의 영향을 위의 세 실험조건에서 실험하여 $IC_{50}$/을 비교한 결과 그 값이 washed platelet에서 가장 낮고 PRP에서 가장 높아, 혈소판 응집 억제 실험과 동일한 결과를 나타내었다. 이상의 결과는 세가지 혈소판 분리 조건 중 washed platelet(Ca$^{2+}$비첨가)가 약물에 의한 혈소판 기능 억제 실험에 가장 효율적임을 제시하고 있으며, 그 주요한 원인은 알부민 등 단백 결합에 의한 유효 약물 농도 감소때문 이라고 추정된다.

• BMB Reports
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• 제34권1호
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• pp.43-46
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• 2001

$\alpha$-Phenyl-N-t-butylnitrone (PBN) is one of the most widely used spin-trapping compounds for investigating the existence of free radicals in biological systems. Recently, there has been considerable interest in the antioxidant nature of PBN on degenerative diseases, presumably related to oxidative stress. In the present study, the protective effect of PBN on the HepG2 cell line under oxidative stress was investigated. When the HepG2 cells were exposed to oxidant, such as hydrogen peroxide, menadione, or ethanol, the protective role of PBN was manifested as a reduction in trypan blue uptake and a decrease in the endogenous production of oxidants, as measured by the oxidation of 2',7'-dichlorodihydrofluorescin. The modulation of activity of major antioxidant enzymes, such as superoxide dismutase and catalase, was not significantly different either in the presence or in the absence of PBN. This indicates that PBN acts as a direct scavenger of reactive oxygen species.

• 대한치과의사협회지
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• 제22권10호통권185호
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• pp.865-868
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• 1984

Three Korean rapidly progressive periodontitis patient (R.P.P.) were examined for the isolation and identification of black-pigmented Bacteroides and Bacteroides gingivalis in the subgingival plaque. Black-pigmented Bacteroides and Bacteroides gingivalis were recovered from all three R.P. patients and the predominant isolates were Bacteroides intermedius followed by Bacteroides gingivalis. The B. gingivalis isolated from subgingival plaque of rapidly progressive periodontitis patients were Gram-negative pleomorphic rods and each produced brown to black colonies on blood agar plate supplemented with 5% rabbit 5ug/ml haemin, 0.5ug/ml of menadione and 40ug/ml of Kanamycin. The B. gingivalis isolated were fermented none of Glucose, Sucrose, Lactose, Esculin and Cellobinose and produced indole. Isolation and identification of Bacteroides gingivalis in Korean R.P. patients can be contributed to the research on the pathogenesis of Korean periodontal disease.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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• pp.152-152
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• 1993

혈전 등에 의한 혈행 장애 예방 및 치료 약물의 개발을 목적으로 혈소판 기능에 대한 약물의 영향을 연구하는데 있어, 효율적인 실험 조건의 선택은 중요하다. 본 연구에서는 마늘 메탄올 추출물의 혈소판 응집 억제능을 platelet rich plasma(PRP), washed platelet (Ca$^2$비첨가), washed platelet(Ca$_{2＋}$ 첨가) 등 세가지 분리 조건을 사용하여 실험하였다. 그 결과 마늘 추출물의 $IC_{50}$/이 각각 2348 $\mu\textrm{g}$/ml, 221 $\mu\textrm{g}$/ml, 851 $\mu\textrm{g}$/ml로서, washed platelet(Ca$_{2＋}$ 비첨가)가 마늘 추출물의 혈소판 응집 억제 작용에 가장 민감한 것으로 나타났다. 또한 마늘 추출물과는 다른기전으로 혈소판 응집 억제 효과를 나타내는 menadione과 propranolol도 이와 동일한 결과를 보였다. 실험 조건에 따른 이러한 차이가 PRP 중에 존재하는 알부민 등과의 단백 결합에 의한 약물의 유효농도 감소에 기인한다고 추정되어, washed platelet에 여러 농도의 알부민을 첨가하여 혈소판 응집 억제 실험을 실시한 결과 약물의 $IC_{50}$/은 알부민 농도 의존적으로 증가하였다. 혈소판 응집과 함께 혈소판 기능 변화를 측정하는 지표인 혈소판 분비능을 분비된 ATP를 Luciferin-Luciferase로 측정하여 알아보았다. 그 결과 thrombin에 의한 혈소판의 ATP 유리에 미치는 마늘 추출물의 영향을 위의 세 실험 조건에서 실험하여 $IC_{50}$/을 비교한 결과 그 값이 washed platelet에서 가장 낮고 PRP에서 가장 높아, 혈소판 응집 억제 실험과 동일한 결과를 나타내었다. 이상의 결과는 세가지 혈소판 분리 조건 중 washed platelet(Ca$_{2＋}$ 비첨가)가 약물에 의한 혈소판 기능 억제실험에 가장 효율적임을 제시하고 있으며, 그 주요한 원인은 알부민 등 단백 결합에 의한 유효 약물 농도 감소 때문이라고 추정된다.

• 대한한의학회지
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• 제24권3호
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• pp.96-107
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• 2003

Objective : This study was undertaken to determine if Pyunggangaeuljihyul-tang (Pinggankaiyuzhixue-tang, PG) has a protective effect against cell injury induced by various toxic agents in rabbit liver, Methods : Cell injury in vitro was estimated by measuring lactate dehydrogenase (LDH), and that in vivo was estimated by measuring alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activity in serum. Lipid peroxidation was examined by measuring malondialdehyde, a product of lipid per oxidation. Results : PG prevented the LDH release by $CCl_4$, mercury, menadione, and tert-butyl hydroperoxide treatment in vitro in liver slices. The extent of protection by 2% PG was similar to that of $10{\mu\textrm{M}}$ N,N'-diphenyl-p-phenylenedianline, a potent antioxidant, in tert-butyl hydroperoxide-induced LDH release. PG also prevented lipid peroxidation and depletion of cellular ATP induced by Hg. Hg causes motphological changes including cell necrosis and its effect was significantly prevented by PG. When rats were treated intraperitoneatly with 0.5 ml/kg of $CCl_4$, serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activities were increased compared with the control, which was significantly inhibited by pretreatment of PG. PG also prevented reduction in GSH and lipid peroxidation induced by $CCl_4$ Conclusion : These results suggest that PG exerts aprotective effect against various toxic agents by its antioxidant action in liver tissues. Thus, PG may be used in prevention and treatment of drug-induced liver cell injury. However, the precise mechanisms of PG protection remain to be determined.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제27권3호
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• pp.515-524
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• 1997

헤민과 메나디온 제한에 의한 Porphyromonas gingivalis(P. gingivalis) W50의 병독력의 변화를 검색하고자, 실험관내 병독력을 NIH 3T3 세포의 세포활성 변화로 관찰하였고, 생체내 병독력은 배양상청액을 ICR mouse 피하조직에 주사한 후의 염증반응을 관찰하였다. 헤민 존재 하에 배양한 P. gingivalis W50 배양상청액에 의한 mouse 3T3 세포의 세포활성은 헤민과 메나디온 없이 배양한 세포의 활성보다 낮았다. 헤민과 메나디온을 첨가하지 않고 배양한 세균의 생체내 병독력은 중등도의 염증세포 침윤과 울혈에 의한 출혈, 미약한 세포간질의 부종과 근육 파괴를 보였다. 메나디온 존재 하에서 배양한 세균은 미약한 염증세포의 침윤, 울혈에 의한 출혈 및 근육의 파괴가 관찰되었다. 헤민 존재하에서 중등도의 울혈에 의한 출혈, 미약한 세포간질의 부종, 염증세포의 침윤 및 근육파괴가 관찰되었다. 헤민과 메나디온 존재 하에서 배양한 세균은 심한 염증세포의 침윤과 중등도의 세포간질의 부종 및 울혈에 의한 출혈을 보였다. 이상의 연구 결과 P. gingivalis W50 배양 상층액의 병독력은 헤민에 의하여 영향을 받는 것으로 생각된다.

• 약학회지
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• 제43권5호
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• pp.652-658
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• 1999

To reveal the inhibitory mechanism of NO-dependent vasorelaxation by quinone derivatives (OQ1 and OQ21), we have compared the generation of free radicals by oxidative stress and the formation of cellular adducts by arylation. First, we measured oxygen consumption by quinone derivatives as a marker of oxidative stress in order to investigate whether these quinone compounds could generate reactive oxygen species. Both OQ1 and OQ21 generated free radicals and OQ21 was more potent. These results suggested that free radicals be involved in the inhibition of vasorelaxation by quinones. Next, we measured the binding capacity of quinone derivatives with intracellular GSH and protein thiols (-SH) in order to investigate whether these quinones have arylation capacity. Compared to positive control groups (menadione), both OQ1 and OQ21 depleted intracellular GSH and protein thiols very slightly. These compounds have low toxicities in mammalian tissues. From these results, we concluded that the inhibition of vasorelaxation by quinone derivatives (OQ1, OQ21) may be cuased by generation of free radicals.

• Molecules and Cells
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• 제20권1호
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• pp.74-82
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• 2005

Glutaredoxins (Grxs) are thioloxidoreductases which are required for maintaining thiol/disulfide equilibrium in living cells. The Grx3 gene, which encodes one of the three monothiol Grxs in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe, was characterized, and its transcriptional regulation studied. Genomic DNA encoding Grx3 was isolated by PCR, and a plasmid pTT3 carrying this DNA was produced. The DNA sequence has 1,267 bp, which would encode a monothiol Grx of 166 amino acids with a molecular mass of 18.3 kDa. The putative protein has 27% homology with Grx5, and contains many hydrophobic amino acid residues in its N-terminal region. S. pombe cells harboring pTT3 had increased Grx activity and enhanced survival on minimal medium plates containing aluminum (5 mM), BSO (0.05 mM), menadione (0.01 mM) or cadmium (0.2 mM). The 568 bp upstream region of Grx3 was fused into the promoterless b-galactosidase gene of the shuttle vector YEp367R to generate fusion plasmid pMJS10. Potassium chloride (KCl) and metals including aluminum and cadmium enhanced the synthesis of ${\beta}$-galactosidase from the fusion gene. The synthesis of ${\beta}$-galactosidase was also enhanced, in a Pap1-dependent manner, by fermentable carbon sources such as glucose (at low concentrations) and sucrose, but not by non-fermentable carbon sources such as ethanol and acetate. Grx3 mRNA increased in response to treatment with BSO. These observations indicate that S. pombe Grx3 is involved in the response to stress, and is regulated by stress.