In this study, we report on a simple, efficient method for obtaining penicillin G amidase (PGA) from recombinant Escherichia coli using a formulation mixed with detergent and lysozyme. Research was conducted on the extraction efficiency of PGA from the periplasmic space in cells in terms of the type of detergent, detergent concentration, pH, reaction time, and temperature of permeabilization. The extraction yield of PGA in the formulated surfactant/lysozyme treatment was increased by approximately (55-65 U/ml) in comparison with that in the single surfactant treatment. The released PGA solution was concentrated and exchanged with buffer using an ultrafiltration (U/F) system. The yields of diatomite filtration, membrane filtration (M/F), and U/F were 69.7%, 93.8%, and 77.3%, respectively. A total of 212 KU of PGA was recovered. At the 25-L culture scale, the overall yield of extraction using the mixed surfactant/lysozyme method was 49.2%. The specific activity of extracted PGA was 11 U/mg in protein. The concentrated PGA solution was immobilized on microporous silica beads without further purification of PGA. The total immobilization yield of PGA on the resin was 48.7%, while the enzyme activity was 101 U/g. The immobilized PGA was successfully used to produce 6-APA from penicillin G. Our results indicated that a simple extraction method from periplasmic space in E. coli may be used for the commercial scale production of ${\beta}-lactam$ antibiotics using immobilized PGA.
Lee, Jin Sook;Kim, Jun Hyun;Jun, Yong Seong;Kwak, Young Ju;Lee, Jin Hyo
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.38
no.8
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pp.444-451
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2016
Most research on membrane fouling models in the past are based on theoretical equations in lab-scale experiments. But these studies are barely suitable for applying on the full-scale spot where there is a sequential process such as filtration, backwash and drain. This study was conducted in submerged membrane system which being on operation auto sequentially and treating wastewater from G-water purification plant in Incheon. TMP had been designated as a fouling indicator in constant flux conditions. Total volume of inflow and SS concentration are independent variables as major operation parameters and time-series analysis and prediction of TMP were conducted. And similarity between simulated values and measured values was assessed. Final prediction model by using genetic algorithm was fully adaptable because simulated values expressed pulse-shape periodicity and increasing trend according to time at the same time. As results of twice validation, correlation coefficients between simulated and measured data were $r^2=0.721$, $r^2=0.928$, respectively. Although this study was conducted limited to data for summer season, the more amount of data, better reliability for prediction model can be obtained. If simulator for short range forecast can be developed and applied, TMP prediction technique will be a great help to energy efficient operation.
This experiment was conducted to investigate the effects of concentrated pig slurry separated from membrane filter and by environment-friendly agro-materials mixtures on growth of lettuce in hydroponics. The swine waste treatment system having a ultra filtration and a reverse osmosis process was designed in this study. Filtration of pig slurry was necessary to prevent the hose clogging in hydroponics. Primary separation using ultra filter was followed by concentration by RO (Reverse Osmosis). The concentrated pig slurry (CS) was mixed by five different environment-friendly agro-materials mixtures. The chemical nutrient solution was the solution of National Horticulture Research Station for the growth of lettuce. The concentration of nutrient solution in hydroponics was adjusted a range of 1.5 mS/cm in EC. The concentrated pig slurry was low in phosphorus(P), suspended solid and heavy matal, but rich in potassium (K). The concentrated slurry was lowest in the growth characteristics of leaf lettuce. And also SPAD value in leaf was reduced in plot treated with concentrated slurry. But the growth of lettuce in the mixtures plot (CS+BM+AA, CS+BM+AA+SW) in hydroponics was significantly high compared to concentrated slurry. The fresh yield of lettuce was 78, 84% that of nutrient solution as 131.9, 142.2g in plot of CS+BM+AA and CS+BM+AA+SW, respectively. Our studies have shown that it is possible to produce organic culture using concentrated slurry and environment-friendly agro-materials mixture, although growth is slower than when using a conventional inorganic hydroponic solution.
We compared the diagnostic accuracy of liquid-based cervicovaginal cytology using $MonoPrep2^{TM}$ system (Monogen, Herndon, Virginia, USA), a manual system based on membrane filtration method, with conventional Pap smear. Study population included 92 patients visiting the gynecologic department under the suspicion of uterine cervical disease. In thirty of them, surgical biopsy was performed. $MonoPrep2^{TM}$ system provided well-preserved monolayer specimen with good nuclear morphology. However, about 19% of specimens were inadequate to interpret due to low cellularity. The detection rate of abnormal cells more than ASCUS (atypical squamous cells of unknown significance) was 23.9% and higher than 19.4 % of conventional Pap smear. Diagnostic concordance rate with conventional Pap smear was 81%, and severe discordance rate influencing on the management of patient was 7.6 %. Among these seven cases, $MonoPrep2^{TM}$ system was more diagnostic only in four. In comparison with histology, the sensitivity of diagnosis of $MonoPrep2^{TM}$ system was 78.9% and slightly higher than 73.5% of conventional Pap smear. However, the specificity was 81.1% and lower than 90.9% of Pap smear. In conclusion, $MonoPrep2^{TM}$ system provided diagnostic accuracies similar to the conventional Pap smear. The inexpertness of slide preparation and the low cellularity were considered to endow a limitation in more accurate evaluation.
Densities of total and injured coliforms in treated water( TW ) and three tap water salt pies( Taps Kl, K2 and K3) of Ku- eui water treatment plant and one tap water sample( Tap T) of Tuk- do water treatment plant were measured 23 times from 1991 to 1992. Coliform regrowth in the water distribution system occurred three times during the study period. When the regrowth episode occurred, injured coliforms were always but total coliforms were not always detected in treated water. Mean densities of total coliforms in TW, and Taps Kl, K2, K3 and T were 0.8, 2.3, 1.9, 1.4 and 2.1 cfu/100mℓ by membrane filtration method using m- TF agar and those of injured coliforms were 3.4, 2.8, 2.5, 2.7 and 2.9 c1u/100mℓ using mondo- LES agar. The injury rates of TW and Taps Kl, K2, K3 and T were 89.5,77.4,67.9, 82.8 and 75.9%, respectively. The high injury rate of coliform bacteria in Seoul water supply can cause regrowth problems in distribution systems due to the repair of injured cells under an appropriate condition. It is recommended the injured coliforms should be measured in drinking water since they can lead to a significant underestimation of total coliforms and result in an inaccurate evaluation of the potential health risks.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.47
no.2
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pp.24-33
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2015
This study aims to suggest wastewater treatment options for diaper recycling by identifying characteristic analysis of wastewater from diaper recycling process and efficiency evaluation of wastewater treatment units. The wastewater characteristic analysis showed that the concentration of organic pollutants and ionic materials were very high comparing to seawater. Through the investigation of similar wastewater treatment, six treatment units were identified to reduce pollutants. It is found UF(ultra-filtration), DAF(dissolved air flotation), fenton oxidation, electro-coagulation and chemical-coagulation are effective in reducing organic pollutants while membrane system and ion exchanger are effective in reducing ionic materials. Even though the target of water quality should be secured in terms of managing organic pollutants level, the application of treatment unit for reducing ionic material needs lots of considerations. This result suggests that reuse of pulping wastewater after controlling organic pollutants is better than direct discharge of pulping wastewater. To select the appropriate wastewater treatment unit, an economic analysis about operation condition, wastewater flow, cost, efficiency should be considered.
In this study the nanofiltration (NF) membrane treatment of a sulfuric acid waste solutions containing copper ion ($Cu^{+2}$) discharging from the etching processes of the printed circuit board (PCB) manufacturing industry has been studied for the recycling of acid etching solution. SelRO MPS-34 4040 NF membrane from Koch company was tested to obtain the basic NF data for recycling of etching solution and separation efficiency (total rejection) of copper ion. NF experiments were carried out with a cross-flow membrane filtration laboratory system. The permeate flux was decreased with the increasing copper ion concentration in sulfuric acid solution and lowering pH of acid solution, and its value was the range of $4.5{\sim}23L/m^2{\cdot}h$. Total rejection of copper ion was decreased with the increasing copper ion concentration, lowering pH of acid solution and decreasing cross-flow rate. The total rejection of copper ion was more than 70% at the experimental condition. The SelRO MPS-34 4040 NF membrane was represented the stable flux and rejection for 1 year operation.
Ahn, Byung Hun;Moon, Dong Ju;Yoo, Kye Sang;Ho, Chia Chi
Korean Chemical Engineering Research
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v.43
no.2
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pp.236-242
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2005
Membrane fouling by protein mixtures during microfiltration has been investigated for binary mixtures of bovine serum albumin (BSA), casein, lysozyme, pepsin, and ovalbumin. Filtration experiments were carried out using $0.2{\mu}m$ polycarbonate track-etched (PCTE) membrane in a stirred cell under constant transmembrane pressure (14 kPa) and concentration of hydrogen ion (pH=11) to study the effect of mixture composition on filtrate flux decline. Flux decline data were analyzed using a pore blockage-cake formation model developed recently. It was found that the model is in a good agreement with the experimental data. Fouling parameters such as the rate of pore blockage(${\alpha}$), the initial resistance of the protein deposit ($R_{po}$) and the increasing rate of the protein layer resistance(${\beta}$) were used to evaluate the rate of filtrate flow by membrane fouling in the binary mixture system. Generally, the trend of ${\alpha}$ is comparable with that of filtrate flux decline. It was also found that fast flux decreasing was observed over the binary mixture containing casein. The result is due to high value of the initial resistance of the protein deposit ($R_{po}$) over casein.
A method was developed for concentrating fish pathogenic virus from sea water using membrane ultrafiltration system and centricon. The method consists of passing large volumes (Ca. 20 liter) of sea water through ultrafiltration (PAN) filter followed by cross-flow filtration method and centrifugation use the centricon (Plus-20). This procedure permitted the processing of 20 liter of sea water which resulted in a 20,000-fold reduction in the volume of water and greater than 90% recovery of the seeded MABV.
Wang, Pi-Chao;Hisamune Kato;Takehiro Inoue;Masatoshi Matsumura;Noriyuki Ishii;Yoshinobu Murakami;Tsukasa Seya
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.2
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pp.67-75
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2002
The human complement receptor type 1 (CR 1, C3 b/C4b receptor) is a polymorphic membrane glycoprotein expressed on human erythrocytes, peripheral leukocytes, plasma and renal glomerular podocytes, which consists of transmembrane and cytoplasmic domains with 30 repeating homologous protein domains known as short consensus repeats (SCR). CR1 has been used as an inhibitor for inflammatory and immune system for the past several years. Recently; it is reported that CRl was found to suppress the hyper-acute rejection in xeno-transplantation and can be used to cure autoimmune diseases. A soluble form of CRl, called sCRl, is a recombinant CRl by cleaving the transmembrane domain at C-terminus and has been expressed in Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. Several purification methods for sCR1 from CHO cells have been reported, but most of them require complicated steps at high cost. Moreover, such methods are mostly performed under the pH condition apt to denaturing sCR1 and causes sCRl losing its activity. We here report a rapid and efficient method to purify sCR1 from CHO cell. The new method consists of a two-stage of cell culture by cultivating cells in serum medium followed by serum-free medium, and a two-stage of column purification by means of heparin and gel filtration column chromatography. By using this novel method, sCR1 can be purified in a simple and effective way with high yield and purity, furthermore, the purified sCR1 was confirmed to retain its activity to suppress the complement activation in vivo and ex vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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