Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)는 화농성 질환, 균혈증을 유발하고 병원내 감염의 주요 원인균으로 알려져 있다. 병원에서의 MRSA 분리율은 점차 증가하여 80% 이상으로 보고 되고 있으며 Methicillin 뿐만 아니라 다른 항균제에도 내성을 나타냄으로 치료를 위한 항균제 사용에 제한을 받고 있다. 이에 본 연구에서는 MRSA의 정확한 판정을 통해 항생제 남용을 막고자 대부분의 병원에서 사용하는 항균제 감수성 검사법과 경제적인 면으로 인해 병원내에서 많이 사용되고 있지 않지만 정확도가 높은 mecA 유전자 검출법을 서로 비교하였다. 그 결과 대조군인 Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus와 실험군 MRSA 20 균주를 대상으로 항균제 감수성 검사법과 mecA 유전자 PCR 검출법을 실시한 결과 MRSA 20 균주는 Oxacillin과 Cefoxitin에 모두 내성을 나타냈으나 mecA 유전자 검출에서는 20 개 중 17 개에서만 유전자가 검출되어 염기서열분석 결과 mecA 유전자임을 확인하였다. 이런 결과로 보아 mecA(-) 3 균주는 mecA 유전자의 변이로 추측할 수 있기에 임상에서의 MRSA의 판정은 항균제 디스크법과 mecA 유전자 PCR 검출법을 동시에 사용함으로 정확한 MRSA 진단에 도움을 주고자 한다.
원유시료에서 분리한 methicillin 내성 황색포도알균의 분표율과 내성유전자의 분석을 분자수준에서의 실시하였다. 총 698종의 원유시료에서 286개의 포도알균속 세균을 Staphylococcus Medium 110을 이용하여 분리 후 Vitek 2 system을 이용하여 동정한 결과 94개의 황색포도알균을 확인하였다. 94개의 황색포도알균 중 총 7개의 균에서 methicillin 내성 mecA 유전자가 존재함을 확인하였다. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)로 확인된 7 균주에 대해 수종의 항생제에 대한 감수성 시험, staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) typing, 및 병독소유전자인 Panton-Valentine Leukocidin (pvl)유전자를 분석하였다. 그 결과 7종의 mecA 양성 MRSA 모두 ampicillin과 oxacillin에 내성이었으며 teicoplanin, vancomycin 및 ciprofloxacin에는 모두 감수성임을 확인하였다. 한편 SCCmec typing결과 7균 중 1균주는 SCCmec type II로 확인되었고 6균주는 SCCmec type IV로 확인되었으며 병독소 유전자인 pvl유전자는 검출되지 않았다.
Staphylococcus pseudintermedius is an important opportunistic pathogen of dog and cats. Since 2006 there has been a significant emergence of methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP) mainly due to clonal spread. The aim of this study was to investigated the prevalence of antibiotic resistance and presence of mecA and femA gene in 91 S. pseudintermedius isolates isolated from dogs and cats associated with various clinic infections. Methicillin resistance was confirmed by oxacillin disc diffusion method. MRSP isolate was detected 19 isolates (20.9%). MRSP and methicillin-resistant S. pseudintermedius (MSSP) isolates were highly resistant to penicillin, kanamycin, tetracycline, erythromycin, trimethoprim-sulfamethoxazole, clindamycin, ciprofloxacin, enrofloxacin and choloramphenicol (100~47.3% and 90.3~33.3%, respectively). About 90% of MRSP isolates were multi-drug resistance (resistance to at least five or more antimicrobials), and MSSP isolates was ca 74%. Among the 91 isolates, mecA gene was detected in 25 isolates (27.5%, 19 in MRSP isolates and 6 in MSSP isolates), but none carried the femA gene. Our results indicated MRSA isolates show a strong resistance to antimicrobials commonly used in veterinary medicine. A continuous surveillance and monitoring should be called for to prevent the contamination and spread of MRSP in dogs and cats.
We developed the multiplex LAMP assay using 16S rRNA, femA and mecA genes for direct detection of the methicillin resistance in Staphylococci from positive blood culture. To simultaneously recognize Staphylococci genus, S. aureus and methicillin resistance, three sets of six primers for 16S rRNA, femA and mecA were designed, respectively. The performance of LAMP assay was affirmed using VITEK system for the phenotypic methods of identification and for oxacillin and cefoxitin antimicrobial susceptibility. The optimal condition for LAMP assay was obtained under $64^{\circ}C$ for 50 min. The detection limit was determined to be of 20 copies and CFU/reaction ($10^4CFU/mL$). For clinical application of comparison with phenotypic methods, the sensitivity and specificity of the LAMP with femA gene for detecting S. aureus was 95.31% and 100%, respectively. The sensitivity and specificity of the LAMP with mecA gene for detecting methicillin resistance was 98.46% and 100%, respectively. The multiplex LAMP assay with femA and mecA gene successfully detected all of MRSA (38 isolates) isolates from 103 Staphylococci in blood cultures. The LAMP assay developed in this study is sensitive, specific, and of excellent agreement with the phenotypic methods.
Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignant neoplasm of the salivary gland, but primary thyroid MEC has rarely been reported and usually has a good prognosis. Herein, I report a case of thyroidal MEC with a poor prognosis in an 82-year-old woman with an anterior neck mass. Ultrasonography and computed tomography revealed a thyroid mass. The patient initially underwent fine-needle aspiration, was diagnosed with malignancy, and underwent a right lobectomy. On gross examination, a 4.0×3.6×2.6 cm-sized ill-defined, unencapsulated, and infiltrative tan to whitish mass with necrosis was identified. Microscopically, epidermoid tumor cell nests or solid sheets were identified. Mucous cells that were positive for periodic acid-Schiff and mucicarmine stains were also identified within epidermoid cell nests. Frequent mitosis and necrosis were observed. Immunohistochemical staining for p40 and p63 was positive, and that for thyroid transcription factor-1 and paired box gene 8 was focally positive. According to the Armed Forces Institute of Pathology grading system for salivary gland MEC, the current case was classified as high-grade MEC. After surgery, the patient suffered from dyspnea due to a remnant neck mass that compressed and obstructed the trachea; therefore, the patient refused further treatment. Thyroidal MECs are considered low-grade with a favorable prognosis, but there are several reported cases of thyroidal MEC with poor prognosis. The current case is a rare presentation of high-grade thyroidal MEC with a poor prognosis.
Staphyloccus aureus is one of the most important pathogens in clinical settings. It is also one of the leading causes of nosocomial infections and the dissemination of multiple drug-resistant strains, mainly methicillin resistant Staphyloccus aureus, and the recent emergence of a vancomycin resistant MRSA is the concern to hospital worldwide. MRSA strains have acquired multiple resistance to a wide range of antibiotics, including aminoglycosides and macrolides. $\beta$-Lactam resistance of methicillin-resistnat Staphyococcus aureus is determined by the function of penicillin binding protein 2'(PBP2') encoded by the methicillin resistance gene mec A. MRSA strains carry methicillin resistance gene mecA, encoded by a mobile genetic element designated staphylococoal cassette chromosome mec(SCCmec). MRSA clones are defined by the type of SCCmec element and the genotype of the methicilline-susceptible Staphyococcus aureus chromosome in which the SCCmec element is integrated.
The purpose of this study is to investigate the carrier rate of S. aureus in the community, antibiotic susceptibility patterns of the organism, detection of MRSA and mecA gene in MRSA. Identification and antibiotic resistance patterns of S. aureus and MRSA were done by MicroScan Panels. MRSA strain was confirmed by disk diffusion method using oxacillin disk. The mecA gene in MRSA was detected by PCR. Eighty-four strains (27.4%) of S. aureus were isolated from the nasal specimens of 307 university students in Busan in 2004. Sixty-eight strains (81.9%) of 83 S. aureus were resistant to penicllin, 16 strains(19.3%) to erythromycin, 15 strains (18.1%) to gentamicin, 12 strains (14.5%) to tetracycline, 6 strains (7.2%) to chloramphenicol, 3 strains (3.6%) to ofloxacin, 2 strains (2.4%) to cefepime, clindamycin, imipenem, meropenem, norfloxacin, respectively. One strain (1.2%) was resistant to ciprofloxacin, cefazolin, cefotaxime, cefuroxime, and oxacillin. And all the strains (100%) of 84 S. aureus were susceptible to amoxicilin/K clavulanate, ticarcillin/K clavulanate, trimethoprim/sulfamethoxazole, rifampin, syncroid, teicoplanin, and vancomycin. One strain of 84 S. aureus isolates was methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The mecA gene was detected from the MRSA strain.
We investigated the contamination of animal hospital floor, beauty table, computer keyboard, exam table, operation table and forcep handle by isolations of aerobic bacteria in small animal hospitals in Gwangju. The total number of aerobic bacteria was 52 isolates and Staphylococcus spp. (38 isolates) were the predominant isolates (69.71 %) of them. The prevalent contaminated areas were floor (17 isolates), beauty table (13 isolates) and computer keyboard (9 isolates). The detection of methicillin-resistant (mecA) gene, determined by PCR, showed that 3 of the 17 coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) isolates possessed the mecA gene. For evaluating the antibiotic susceptibility patterns of the isolates, disk diffusion method was used. The majority of isolates showed high susceptibility to amoxicillin (92.1 %), ceftiofur (84.2%) and polymixin B (73.7%). Also they showed the high resistant to ampicilline (66.7%), penicillin (65%) and kanamycin (56.5%). These results suggest extensive contamination of aerobic bacteria in animal hospital environment.
본 연구는 Lightcycler (Roche)를 이용한 Real-Time PCR(LC-PCR)기법을 통하여 원유시료에서 신속, 정확하게 황색포도상구균을 검출하는 기법을 개발하고자 하였다. coagulase 전구체를 coding하는 113 bp의 coa 유전자의 증폭, melting curve 분석 및 DNA염기서열을 분석하여 황색포도상구균 특유의 유전자 검출하는 기법을 개발하였다. 또한 분리된 균주중 메치실린에 내성을 나타내는 균주를 검출하고자 penicillin-binding protein, PBP2a (mecA)를 coding 하는 209 bp의 mecA 유전자의 증폭, melting curve 분석 및 DNA염기서열을 분석하여 메치실린내성 황색 포도상구균을 real-time PCR 기법으로 검출하는 기술을 개발하였다. 본 실험에 따르면 647개의 원유시료중 6개의 시료에서 황색포도상구균이 검출되었으며 이중 2개의 시료에서 분리된 황생포도상구균이 메치실린내성 황색포도상구균임을 확인하였다. 또한 DNA 검출한계는 10 fg으로 기존 PCR에 비해 매우 감도가 우수한 것을 확인하였다. 또한 3개의 원유시료에서 돼지나 소의 삼출성 피부염의 원인균인 Staphylococcus chromogenes가 분리되었다.
Recently, a total of 74 Staphylococcus pseudintermedius isolates were collected from clinical cases of canine pyoderma and otitis externa in Korea. In this study, we examined in vitro fluoroquinolone resistance among those isolates using a standard disc diffusion technique. The results demonstrated that, except for one isolate, approximately 18.9% to 27.0% of the isolates possessed bacterial resistance to both veterinary- and human-licensed fluoroquinolones including moxifloxacin (18.9% resistance), levofloxacin (20.3% resistance), ofloxacin (24.3% resistance), ciprofloxacin (25.7% resistance), and enrofloxacin (27.0% resistance). Most surprisingly, 14 out of 74 (18.9%) isolates were resistant to all the five fluoroquinolones evaluated. Moreover, a PCR detection of the methicillin resistance gene (mecA) among the 74 isolates revealed that 13 out of 25 (52.0%) mecApositive isolates, but only 7 out of 49 (14.3%) mecA-negative isolates, were resistant to one or more fluoroquinones. Taken together, our results imply that bacterial resistance to both veterinary- and human-use fluoroquinolones becomes prevalent among the S. pseudintermedius isolates from canine pyoderma and otitis externa in Korea, as well as that the high prevalence of the mecA-positive S. pseudintermedius isolates carrying multiple fluoroquinolones resistance could be a potential public health problem.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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