This study was conducted to examine the effects of hormone and sodium pyruvate on in vitro maturation of canine oocytes. Canine oocytes were collected from the ovaries of dogs and cultured in NCSU-37 medium with hormones and sodium pyruvate for 72 hr. Oocytes matured to the metaphase II (MII) stage were observed only from estradiol $17{\beta}\;(E_2)$, and the presence of gonadotropin did not improve the nuclear maturation. No oocytes were developed to the MII stage when $E_2$ was added to medium during the first 6 and 24 hrs of culture period. The presence of $E_2$ during the whole culture period enhanced the nuclear maturation to the MII stage (6.0%, P<0.05). High concentration of sodium pyruvate (2.5 mM) slightly enhanced the nuclear maturation to the metapahse I (HMI) stage, but not the MII stage. the result of the present study shows that the presence of $ E_2$ during the whole culture period of 72 hr enhances the maturation of canine oocytes to the M stage, but sodium pyruvate does not affect the nuclear maturation of the canine oocytes.
In the present study, effects of concentration of cryoprotectant solutions on the nuclear maturation of vitrifiedthawed bovine oocytes were examined. Also, the developmental capacity of vitrified-thawed immature oocytes following ICSI was investigated. Oocytes were cultured in TCM-199 medium supplemented with 5% FBS at $38^{\circ}$C in 5% $CO_2$ and air. The in vitro maturation rate of vitrified oocytes was 24.5 ${\pm}$ 4.2%. The in vitro maturation rate of vitrified oocytes was lower than that of the control (72.0 ${\pm}$ 3.5%, p<0.05). The in vitro maturation rate of vitrified${\sim}$thawed oocytes incubated in TCM-199 medium supplemented with 1.0${\sim}$5.0 ug CB were 26.7 ${\pm}$ 3.2%, 35.7 ${\pm}$ 3.2%, 54.0 ${\pm}$ 3.0%, 42.5 ${\pm}$ 3.6%, respectively. The in vitro maturation rate (57.0 ${\pm}$ 3.0%) of the vitrified-thawed oocytes treated with 3.0 ${\mu}$g CB for 20 min was the highest of all vitrification groups, although the maturation rate were significantly (p<0.05) lower than those of fresh oocytes. The in vitro maturation rates of the vitrified-thawed (with EDS and EDT) oocytes were 53.8 ${\pm}$ 3.4%, 51.1 ${\pm}$ 3.5%, respectively. This results were lower than the control group (72.0 ${\pm}$ 3.0%). The in vitro developmental rates of the vitrified-thawed oocytes following ICSI were 28.6 ${\pm}$ 4.5%, 25.6 ${\pm}$ 4.3%, respectively. This results were lower than the control group (40.0 ${\pm}$ 4.0%).
The objective of this study was to examine the effect of macromolecule in a maturation medium on nuclear maturation, intracellular glutathione (GSH) level of oocytes, and embryonic development after parthenogenetic activation (PA) and somatic cell nuclear transfer (SCNT) in pigs. Immature pig oocytes were cultured in maturation medium that was supplemented with each polyvinyl alcohol (PVA), pig follicular fluid (pFF) or newborn calf serum (NBCS) during the first 22 h and the second 22 h. Oocyte maturation was not influenced by the source of macromolecules during in vitro maturation (IVM). Embryo cleavage and cell number in blastocyst after PA was altered by the source of macromolecule but no difference was observed in blastocyst formation among treatments. Oocytes matured in PVA-PVA medium showed lower rates of oocyte-cell fusion (70.4% vs. 77${\sim}$82%) and embryo cleavage (75% vs. 86${\sim}$90%) after SCNT than those matured in other media but blastocyst formation was not altered (13${\sim}$27%) by different macromolecules. pFF added to IVM medium significantly increased the intracellular GSH level of oocytes compared to PVA and NBCS, particularly when pFF was supplemented during the first 22 h of IVM. Our results demonstrate that source of macromolecule in IVM medium influences developmental competence of oocytes after PA and SCNT, and that pFF supplementation during the early period (first 22 h) of IVM increases intracellular GSH level of oocytes.
Objective: This study aimed to evaluate the differences in cephalometric characteristics and skeletal maturation in girls with central precocious puberty (CPP) via lateral and hand-wrist radiographs. We also aimed to identify the indicators that are most effective for determining skeletal maturity in these patients. Methods: The study included 70 Korean girls (mean age, 8.5 ± 0.5 years) diagnosed with CPP at the Department of Pediatrics, and 48 normal healthy age-matched girls who visited the Department of Orthodontics and had no history of hormone treatment or growth problems. Skeletal maturation was evaluated using lateral cephalometric and hand-wrist radiographs using cervical vertebrae maturation indicators (CVMI) and skeletal maturity indicators (SMI). Results: The mean mandibular plane angle was smaller in the CPP group than in the control group (35.8° ± 4.9° vs. 39.0° ± 6.5°), resulting in greater posterior facial height (p = 0.003). SMI was significantly greater in the CPP group (3.5 ± 1.4 vs. 2.0 ± 1.0) than in the control group (p = 0.001) and was significantly associated with CPP (r = 0.492; p = 0.001), whereas CVMI was not. Conclusions: In comparison with the control group, the CPP group exhibited a smaller mandibular plane angle, greater posterior facial height, and greater skeletal maturation. SMI may be more suitable than CVMI for determining skeletal maturation in CPP. Hand-wrist radiography is recommended in addition to lateral cephalogram for predicting growth in girls with CPP.
This study was determined to change in chemical composition of Mume(Prunus mume Sieb. et Zucc) fruits during maturation. There were no differences in the soluble solid and moisture content among varieties, but the soluble solid slowly increased with maturing. The pH and ash content were slightly decreased with maturation. The green color of 'Nanko' fruits was maintained for 92days after full bloom at the greeness value of -3.81 Whereas, the chlorophyll content of 'Koume' fruits remarkably decreased and it was not suitable for the processing of immature green Mume fruits. The titratable acidity increased during maturation. The organic acids were mainly composed of malic acid and citric acid. The malic acid was significantly decreased during maturation, whereas citric acid increased. Major free sugars and sugar alcohols were sucrose, glucose, fructose, sorbitol and maltose. Sucrose content increased as the maturity proceeded, whereas glucose and sorbitol were decreased. The total contesnt of free amino acids decreased with maturation and the total free amino acids in the flesh of fruits were occupied by asparagine at the range of 60 to 78%.
Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) is a facultative intracellular pathogen that causes salmonellosis and mortality worldwide. S. Typhimurium infects macrophages and survives within phagosomes by avoiding the phagosome-lysosome fusion system. Phagosomes sequentially acquire different Rab GTPases during maturation and eventually fuse with acidic lysosomes. Lysophosphatidylcholine (LPC) is a bioactive lipid that is associated with the generation of chemoattractants and reactive oxygen species (ROS). In our previous study, LPC controlled the intracellular growth of Mycobacterium tuberculosis by promoting phagosome maturation. In this study, to verify whether LPC enhances phagosome maturation and regulates the intracellular growth of S. Typhimurium, macrophages were infected with S. Typhimurium. LPC decreased the intracellular bacterial burden, but it did not induce cytotoxicity in S. Typhimurium-infected cells. In addition, combined administration of LPC and antibiotic significantly reduced the bacterial burden in the spleen and the liver. The ratios of the colocalization of intracellular S. Typhimurium with phagosome maturation markers, such as early endosome antigen 1 (EEA1) and lysosome-associated membrane protein 1 (LAMP-1), were significantly increased in LPC-treated cells. The expression level of cleaved cathepsin D was rapidly increased in LPC-treated cells during S. Typhimurium infection. Treatment with LPC enhanced ROS production, but it did not affect nitric oxide production in S. Typhimurium-infected cells. LPC also rapidly triggered the phosphorylation of IκBα during S. Typhimurium infection. These results suggest that LPC can improve phagosome maturation via ROS-induced activation of NF-κB pathway and thus may be developed as a therapeutic agent to control S. Typhimurium growth.
Objective: This study aimed to evaluate the zygomaticotemporal suture (ZTS) maturation, analyze the age distribution patterns of ZTS maturation stages, and investigate the relationship between ZTS and cervical vertebral maturation (CVM). Methods: A total of 261 patients who underwent cone-beam computed tomography (112 males, mean age, 13.1 ± 3.3 years; 149 females, mean age, 13.7 ± 3.1 years) were examined to evaluate the ZTS stages. The ZTS stages were defined based on a modified method from previous studies on zygomaticomaxillary sutures. Differences between groups and correlations between indicators were analyzed using the Spearman correlation test, intraclass coefficient of correlation (ICC), one-way analysis of variance and rank sum test. Statistical significance was set at p < 0.05. The diagnostic value of CVM stages in identifying ZTS maturation stages was evaluated using positive likelihood ratios (LRs). Results: A positive relationship was found between the ZTS and CVM stage (r = 0.747, ICC = 0.621, p < 0.01) and between the ZTS stage and chronological age (r = 0.727, ICC = 0.330, p < 0.01). Positive LRs > 10 were found for several cervical stages (CSs), including CS1 and CS2 for the diagnosis of stage B, CS1 to CS3 for the diagnosis of stages B and C, and CS6 for the diagnosis of stages D and E. Conclusions: The ZTS maturation stage may be more relevant to the CVM stage than to the chronological age. The CVM stages can be good indicators for clinical decisions regarding maxillary protraction, except for CS4 and CS5.
Heejae Kang;Seonggyu Bang;Heyyoung Kim;Ayeong Han;Shuntaro Miura;Hye Sun Park;Islam M. Saadeldin;Sanghoon Lee;Jongki Cho
Korean Journal of Veterinary Research
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v.63
no.4
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pp.40.1-40.7
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2023
To optimize the most efficient method for porcine in vitro maturation (IVM), we compared the effects of supplementing extracellular vesicles (EVs) derived from porcine follicular fluid (pFF). The cumulus oocyte complexes were grouped into 4 groups with different supplementations as following: pFF (G1), pFF-depleted EVs (G2), EVs (G3) and control (G4) groups. After IVM with different supplementations, maturation rates and the developmental competences of porcine oocytes and blastocyst development were investigated. Additionally, glutathione (GSH) and reactive oxygen species (ROS) levels were measured in mature oocytes. The EVs were isolated and characterized with cryo-TEM and nanoparticle tracking analysis. The pFF significantly affected the maturation rate, whereas the presence of EVs did not show notable difference in the maturation rates. Although there were numerical increases in the measured parameters in EV and pFF-depleted EVs groups, no significant differences were observed between them. The EV group showed similar oocyte maturation rate for both positive and negative control groups. The GSH was not different among the groups, but ROS levels were significantly lower in pFF-supplemented group when compared with other groups with the highest level in the control group. G2 group wasn't significantly different G1 and G3 group. G3 group wasn't significantly different from G2 and G4 group. This suggests that EVs in IVM medium which probably effected partially to protect against oxidative stress and potentially enhance the quality of oocytes. This study indicates that the EVs in pFF play a significant role in improving the efficiency of oocyte maturation in porcine.
The zebrafish is an emerging vertebrate model organism in reproductive biology. The oocyte maturation of zebrafish is triggered by maturation inducing hormone (MIH, 17α,20β-Dihydroxy-4-pregnen-3-one). In almost all animals, the oocyte maturation is governed by activation of pre-MPF which consists of cyclinB and inactive Cdk1. In the oocyte of Xenopus and mice, the activity of Cdk1 is regulated in two ways, one is the interaction with cyclinB and the other is phosphorylation/dephosphorylation of T14/Y15 residues on the Cdk1 by Wee1 and Cdc25. Unlike Xenopus and mice that have a sufficient amount of pre-MPF, pre-MPF is absent in GV oocyte of most teleost including zebrafish. Therefore, the activation of MPF during zebrafish oocyte maturation might totally depend on de novo synthesis of cyclinB proteins. It is reported that the translation of maternal mRNA is regulated by combination of several RNA binding proteins such as CPEB, Dazl, Pum1/Pum2, and insulin-like growth factor2 mRNA-binding protein 3 in the zebrafish oocytes. However, the definitive mechanism of these proteins to regulate the translation of stored maternal mRNAs remains to be elucidated. Therefore, the investigation of the maturation process of the zebrafish oocyte will provide new information that can help identify the role of translational control in early vertebrate oocyte maturation.
Melatonin (N-acetyl-5-methoxytryptamine), a major hormone of pineal gland in vertebrates, is known to be associated with regulation of the dynamic physiological functions in general and has some functions on reproduction in the ovarian follicles in particular. And its antioxidant properties as a scavenger are also reported. The aim of this study was to investigate the effect of melatonin on the in vitro maturation of mouse germinal vesicle (GV)-stage oocytes. Oocyte maturation, apoptosis, and mRNA expression of melatonin receptor were analyzed in the cumulus cell-enclosed oocytes (CEOs) cultured with melatonin for 18 h. The CEOs were obtained from 3 wk-old ICR female mice cultured in media with 0, 0.1 nM, 10 nM, or 1,000 nM melatonin for 18 h. And then the extrusion of the first polar body was assessed to evaluate the maturation rate. The apoptosis and mRNA expression of melatonin receptor (Mtnr1-a and Mtnr1-b) in cumulus cells of each group were measured by TUNEL assay, ELISA, and real time RT-PCR after in vitro maturation(IVM). The addition of melatonin in the IVM medium significantly improved nuclear maturation of the mouse GV oocytes and the highest maturation rate were obtained from the group treated with 1,000 nM melatonin. Apoptosis was not detected in IVM oocytes, but detected in cumulus cells. And cumulus cells treated with 1,000 nM melatonin exhibited significantly lower apoptosis. In the group treated with 1,000 nM melatonin, the expression of melatonin receptor mRNA was decreased in CEOs. In conclusion, melatonin has a potentially important role for regulating oocyte maturation and reduces the apoptosis of cumulus cells in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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