• 제목/요약/키워드: mannose-6-phosphate

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자낭균 곰보(Morchella esculenta)버섯의 인공재배에 관한 연구 (Studies on the Artificial Cultivation of Morchella esculenta in Ascomycetes)

  • 김한경;이강효;정종천;전창성;석순자;장갑열
    • 한국버섯학회지
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    • 제7권1호
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    • pp.9-21
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    • 2009
  • 곰보버섯의 자실체 색은 갈색 또는 회갈색이고 갓의 형태는 원뿔모양이며, 대의 색은 흰 크림색 또는 흰색이다. 자실체를 반으로 잘라보면 갓과 대는 속은 비어있다. 자실체의 현미경 관찰에서 자낭의 크기는 $113.5{\sim}114.2{\times}9.3{\sim}10.3{\mu}m$, 자낭포자의 크기는 $17.6{\sim}20.9{\times}9.4{\sim}10.7{\mu}m$, 측사는 $40.0{\sim}45.2{\times}5.8{\sim}6.4{\mu}m$, 대의 안쪽세포는 $7.5{\sim}15.1{\mu}m$이었다. 곰보버섯 자실체 발생지 환경조건은 온도 $13.8^{\circ}C$, 습도 75.8%, 광 538룩스이며, 토성은 sand 72.7%, silt 21.0%, clay 6.3%로 silt loamy 이며, 유기물 함량은 10.0%로 밭 토양보다 많고 인산함량은 낮았다. 균주별 균사배양 최적배지는 PDB 배지이며, 배양최적 온도는 $25^{\circ}C$, pH는 5.0이었으며, 합성배지인 Czapek에 배지에 조정된 무기태 성분의 최적농도는 potassium phosphate 1%, sodium nitrate 2%, potassium chloride은 대조구에서 좋았다. 영양원 선발에서 최적 탄소원은 mannose이었으며, 최적농도는 5%이었다. 질소원은 대조구에 비하여 균사생육이 극히 저조하였다. 곰보버섯 균핵 형성 촉진배지 선발시험에서 균사생장과 균핵형성이 좋은 배지는 폐면 이었으며, 톱밥에서는 참나무톱밥에서 균사생장이 빨랐다. 폐면과 참나무톱밥의 혼합비율은 참나무톱밥 20%+폐면 80% 혼합수준에서 균핵 형성이 좋았고 첨가제인 밀기울의 혼합비율은 15-20%, 황산칼슘은 2% 수준에서 균핵 형성이 좋았다. 토양종류별 균핵 형성은 피트모스 처리구에서 균사생장 및 균핵 형성이 가장 좋았으며, 피트모스의 혼합비율은 60-80%이나, 참나무를 혼합하면 50:50으로 혼합 처리한 구에 밀기울을 30% 첨가하면 균핵 형성이 가장 좋았다.

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Inhibitory effect of Ulmus davidiana Planch extracts on bone resorption mediated by processing of cathepsin K in cultured mouse osteoclasts

  • Park, Jun-Sung;Kim, Kyung-Ho;Jo, Hyun-Seog;Kim, Kap-Sung;Hwang, Min-Seob
    • Journal of Acupuncture Research
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    • 제22권2호
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    • pp.55-70
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    • 2005
  • Objective: Ulmus davidiana Planch (Ulmaceae) has long been known to have anti-inflammnatory in the traditional Korean medicine. UD has been reported as a good enhancer for bone healing. Methods : In this experiment, we investigate the Inhibitory effects of UD on bone resorption using the bone cells culture. Different concentrations of crude extract of UD were added to mouse bone cells culture. The mitochondria activity of the bone cells after exposure was determined by colorimetric MIT assay. It was demonstrated that UD has potential effects on bone cells culture without any cytotoxicity. The most effective concentration of UD on bone cells were $100\;{\mu}g/ml$. Cathepsin K (Cat K) is the major cysteine protease expressed in osteoclasts and is thought to play a key role in matrix degradation during bone resorption. Results : When mouse long bone cells including osteoclasts and osteoblast were treated with the PI3-Kinase inhibitor, wortmannin (WT), WT prevented the osteoclast-mediated intracellular processing of Cat K. Similarly, treatment of osteoclasts-containing long bone cells with UD extracts prevented the intracellular maturation of Cat K, suggesting that UD may disrupt the intracellular trafficking of pro Cat K. This is similar to that of WT. Since secreted proenzymes have the potential to reenter the cell via mannose-6-phosphate (M6P) receptor, to prevent this possibility, we tested WT and UD in the absence or presence of M6P. Inhibition of Cat K processing by WT or UD was observed in a dose-dependent manner. Furthermore, the addition of M6P resulted in enhanced potency of WT and UD. Conclusion : UD dose-dependently inhibited in vitro bone resorption with a potency similar to that observed for inhibition of Cat K processing.

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Molecular Cloning of Vps26a, Vps26b, Vps29, and Vps35 and Expression Analysis of Retromer Complex in Micro Pig

  • Kim, Ek-Yune;Kim, Young-Hyun;Ryu, Chung-Hun;Lee, Jae-Woong;Kim, Sang-Hyun;Lee, Sang-Rae;Kim, Myeong-Su;Kim, Wan-Jun;Lim, Jeong-Mook;Chang, Kyu-Tae
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제32권1호
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    • pp.65-70
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    • 2008
  • Members of the Vps (Vacuolar protein sorting) protein family involved in the formation of the retromer complex have been discovered in a variety of species such as yeast, mouse, and human. A mammalian retromer complex is composed of Vps26, Vps29, and Vps35 proteins and plays and important role in cation-independent mannose-6-phosphate receptor retrieval from the endosome to the trans-Golgi network. In this study, we have identified the full-length sequences of the retromer components of Vps26, Vps29, and Vps35 in micro pigs. The cDNA sequences of these retromer components have been determined and the result showed there is 99% homology among the component counterparts from mouse, micro pigs, and humans. In addition, the retromer complexes formed with hetero-components were found in the brain of micro pigs. Based on above results, we suggest mammalian Vps components are well conserved in micro pigs.

사상균(絲狀菌)의 지방분해효소(脂肪分解酵素)에 관(關)한 연구(硏究) 제2보(第2報) 분리사상균(分離絲狀菌) Rhizopus japonicus의 배양조건검토(培養條件檢討) (Studies on the Lipolytic Enzyme of Molds Part II. Cultural condition of Rhizopus japonicus)

  • 정만재
    • 한국식품과학회지
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    • 제8권1호
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    • pp.33-41
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    • 1976
  • 1. 유기질소원(有機窒素源)으로는 soybean meal, 무기질소원(無機窒素源)으로는 $(NH_4)_2SO_4$가 lipase생산(生産)에 가장 효과(效果)이었다. 2. 배양중(培養中) 배지(培地)의 pH저하(低下)를 이르키는 xylose, glucose, fructose, galactose, mannose, maltose, soluble starch, dextrin을 탄소원(炭素源)으로 첨가(添加)하였을 때 lipase 생산(生産)이 심(甚)하게 저해(沮害)되었다. sucrose는 lipase생산(生産)을 저해(沮害)하지 않았으나 첨가효과(添加效果)는 인정(認定)되지 않았다. 3. 인산염(燐酸鹽)으로서는 $K_2HPO_4$, 마그네슘염(鹽)으로서는 $MgSO_4{\cdot}7H_2O$가 lipase생산(生産)에 가장 효과적(效果的)이었다. 4. Olive유(油), 대두유(大豆油) 및 야자유(油)의 첨가(添加)는 lipase생산(生産)을 증가(增加)시켰으며 1% olive유(油) 첨가시(添加時) lipase생산(生産)이 50% 증가(增加)되었다. 5. yeast extract $0.05{\sim}0.07%$첨가시(添加時) lipase생산(生産)이 약간 증가(增加)되었다. 6. 본균(本菌)의 lipase생산(生産)에 가장 적합(適合)한 배지(培地)는 soybean meal 2%, $K_2HPO_4$ 0.5%, $(NH_4)_2SO_4$ 0.1%, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.05%, yeast extract 0.05%, olive유(油) 1%의 조성(組成)의 것으로서 최적배양조건하(最適培養條件下)에서 48시간(時間) 배양시(培養時)에 lipase생산(生産)이 최고(最高)에 도달(到達)하였다.

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Insulin-like Growth Factor Systems의 생식기능에서의 역할;자궁편 (Roles of the Insulin-like Growth Factor System in the Reproductive Function;Uterine Connection)

  • 이철영
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제23권3호
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    • pp.247-268
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    • 1996
  • 여포와 난포의 성숙, 배란과 착상, 임신의 유지와 태아의 성장 발달, 분만 및 유선발육과 비유 등 일련의 생식현상에서 있어서 성선자극호르몬과 스테로이드 호르몬의 작용이 중추적인 역할을 한다는 사실은 오래 전부터 알려져왔다. 그러나 이러한 일련의 현상에 고전적인 호르몬 외에도 다수의 성장인자가 관여되고 있음이 최근의 연구 결과 밝혀지고 있다. 생식기관에서 성장인자들은 대부분 autocrine/paracrine mode로 작용하여, 성선자극호르몬과 스테로이드 호르몬의 작용을 매개하거나 이들 호르몬 등과 교호적인 작용(synergy)을 한다. 생식기관 내 insulin-like growth factor(IGF) system은 최근 가장 활발히 연구된 분야 중의 하나로 생식현상의 전반에 걸쳐 중요한 역할을 하고 있음이 밝혀졌다. 본 지면에서는 IGF system에 관한 개괄적인 정보를 소개하고 현재까지 보고된 intrauterine IGF system에 관한 연구를 요약하고자 한다. IGF family는 IGF-I과 IGF-II ligands, 두종류의 IGF receptors(수용체), 그리고 지금까지 발견된 6종류의 IGF-binding proteins(IGFBPs)로 이루어져 있다. IGF-I과 IGF-II는 proinsulin과 상동한 구조를 가진 peptide로서 포도당과 아미노산 운반을 자극하는 등 insulin과 유사한 작용을 한다. 이 외에도 IGFs는 세포분열촉진제(mitogens)로서 여러 형태의 세포에 걸쳐 세포증식을 자극하고, 세포의 분화(differentiation)과 세포기능의 발현에 관여한다. IGFs는 간과 주로 messenchymal cells에서 발현되어 endocrine mode는 물론 autocrine/paracrine mode로 거의 모든 조직에 작용한다. IGF 수용체는 두종류가 알려져 있는데 type I IGF receptor는 tyrosine kinase로서 IGF-I과 IGF-II에 공히 high-affinity를 나타내고, 상기한 대부분의 IGFs의 작용을 매개한다. Type II IGF receptor 혹은 IGF-II/mannose-6-phosphate receptor는 두개의 서로 다른 binding sites를 가지고 있는데 IGF-II binding site는 IGF-II에만 high-affinity를 나타낸다. Type II IGF receptor의 주요 역할은 IGF-II를 lysosomal targeting하여 ligand를 파괴하는데 있다. 체액 속의 IGFs는 대부분 IGFBP에 결합되어 있다. IGFBPs는 IGF의 저장/운반체 혹은 IGF 작용을 조절하는 역할을 하는 것으로 알려져 있으나 개개 IGFBP의 역할에 대해서는 지극히 제한된 정보만이 알려져 있다. IGFBPs의 IGF ligands에의 affinity는 IGF receptors의 IGFs에의 affinity보다 크기 때문에 대부분의 in vitro 상황 하에서 IGFBPs는 IGF 작용을 억제한다. IGFBP에 결합되어 있는 IGF가 어떤 기작에 의해 IGFBP로부터 분리되어 IGF receptor에 도달하는지는 알려지지 않고 있으나, 혈액과 조직액에 들어있는 불특정 IGFBP protease activity는 IGF의 방출과정에서 일역을 하는 것으로 믿어지고 있다. 최근 연구보고에 의하면 특정 in vitro 상황 하에서 IGFBP-1, -3, -5 등은 IGF와 무관한 작용도 있다는 증빙이 있어 IGF system의 또 다른 차원을 예고하고 있다. IGF family members의 mRNAs & proteins는 영장류, 설치류 및 가축의 자궁조직과 수태물(conceptus)에서 발현되어 자궁과 태아의 성장 발달에 중요한 역할을 한다. 자궁조직의 IGF system의 발현은 성선호르몬, 국소 생리조절인자 등에 의해 발현시기와 장소의 특이성이 결정되며, 발현된 IGFs와 IGFBPs는 autocrine/paracrine mode로 자궁조직에 작용하기도 하고, 자궁강에 분비되어 수태물의 성장 발달에 관여한다. 착상을 전후하여 수태물에서도 IGF system이 발현되는데 개개 IGF family member의 발현 시기는 모체로부터 유래된 mRNA의 유무, 수태물 자체의 genetic programming, 모체와의 상호작용 등에 의해 결정되고, IGFs의 작용 부위 역시 시간(생리적 상태)과 장소의 특이성이 있다. 이와같이 conceptus IGF system의 발현이 시간적, 공간적으로 조절되고있다는 사실은 IGFs가 수태물의 성장 발달에 일역을 한다는 가설을 간접적으로 지지해 준다. 자궁조직과 수태물에서 발현된 IGFs는 세포의 증식과 분화, 포도당과 아미노산의 운반과 단백질합성, placental lactogen과 prolactin 등과 같은 유선자극호르몬의 생성을 자극하고 스테로이드 호르몬의 합성에도 관여한다. 태아의 성장 발달에 있어서 IGFs의 역할은 embryo의 IGF-I, IGF-II, 혹은 IGF receptor gene을 homologous recombination technique에 의해 파괴(gene targeting)하여을 때의 결과로써 입증되었다. 생쥐의 IGF and/or IGF-II gene 혹은 IGF receptor gene을 파괴했을 때 출생 전후 모두 성장 발달이 지연되며 출생시 무게는 정상치의 30-60% 수준에 머물고, 특히 type I IGF receptor gene 혹은 IGF-I과 IGF-II genes를 모두 파괴했을 경우에는 출생 후 곧 치사한다. 자궁 내의 IGFBPs는 IGF ligands를 자궁 내에 제한시키거나 IGFs의 receptor binding을 억제하는 negative regulators 역할을 하는 것으로 믿어지고 있다. 그러나 영장류의 자궁에서 IGFBP-I과 같은 특정 IGFBP는 IGFs보다 월등히 많은 양이 발현 분비되고 있는 것으로 추산되고 있으며, 또한 이 단백질은 모체탈락막세포에서 분비되는 주요 단백질 중의 하나라는 점을 감안할 때 IGFBP-I이 IGF과 무관한 작용이 있을 가능성도 배제할 수 없다. 따라서 IGFBPs의 역할 규명은 IGF system을 이해하는데 중요한 부분을 차지하고 있어 향후 이 분야의 연구에 많은 기대와 촛점이 모여지고 있다.

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리소좀 교통 이상을 초래하는 뮤코지방증 2형과 3형 환자의 섬유아세포를 이용한 신규 유전자 탐색 및 돌연변이에 대한 연구 (A Study on the Screening of the Novel Genes Associated with Lysosomal Trafficking and Mutation Detection in Fibroblasts of the Patients with Mucolipidosis type II and III)

  • 송승미;장수희;백경훈;진동규
    • 대한유전성대사질환학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.65-75
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    • 2005
  • 목적: 뮤코지방증 유형 II와 III은 리소좀 효소인N-acetylglucosaminyl-1-phosphotransferase (UDP-N-acetylglucosamine, GlcNAc-phospho-transferase)의 결손에 의해 초래되며, 상염색체 열성으로 유전되는 질환이다. ${\alpha}/{\beta}/{\gamma}$ subunit로 구성되는 이 효소의 결핍으로 인해 리소좀으로 운반되는 수십 종류의 효소들에 mannose-6-phosphate(M6P)를 부착하는 과정에 장애가 생겨 분해되지 않은 물질이 축적되어 질병이 초래된다. 이 질환에 있어서 산전 진단과 유전 상담을 위해서는 상기 효소의 해당 유전자가 밝혀져 있어야 하나, 현재 이 효소의 ${\gamma}$ subunit를 암호화하는 유전자가 GNPTAG에 해당된다고 밝혀져 있을 뿐 ${\alpha}/{\beta}$ subunit을 암호화하는 GNPTA에 해당하는 유전자는 밝혀져 있지 않고 돌연변이 역시 보고된 적이 없다. 본 연구는 리소좀 효소의 인산화에 관여하는 N-acetylglucosamine-1-phospho-transferase의 결함이 있는 환자의 섬유아세포를 이용하여 리소좀 연관 신규 유전자를 찾아내고, 그 유전자를 대상으로 돌연변이를 규명하고자 하였다. 방법: 이를 위해 5명의 환자와5명의 연령, 성별이 일치하는 정상아의 섬유아세포를 계대 배양하여 이 세포를 이용하여 수행한 subtractive hybridization을 통해 신규 유전자를 탐색하고, 신규 유전자를 대상으로 돌연변이 분석을 수행하였다. 결과: 연구 결과 환자에서 발현이 증가된 유전자 73개와 발현이 감소된 유전자 50개를 밝혀냈다. 분석된 유전자 중에서 MGC4170이환자에서는 발현되지 않으나 정상인에서는 발현됨을 발견하였고, 이 유전자가 아직 밝혀지지 않은 GNPTA로 확인되어 환자를 대상으로 돌연변이 분석을 시행하였다.분석 결과 기존에 돌연변이가 보고되었던 GNPTAG에는 돌연변이가 없었으나, MGC4170에는 7개의 돌연변이가 발견되었다. 본 연구는 GlcNAc-phosphotransferase의 ${\alpha}/{\beta}$ subunit에 해당되는 MGC4170의 최초 돌연변이 보고이다. 결론: 본 연구를 통해 뮤코지방증 II형과 III형에서 발현되는 유전자 군을 파악할 수 있었으며, 동시에 MGC4170 돌연변이를 규명함으로써 이 질환의 병리 기전 연구와 산전 진단에 기여하고자 한다.

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