A potent α-glucosidase inhibitor (compound I) was isolated from coffee brews by activity-based fractionation and identified as a β-carboline alkaloid norharman (9H-pyrido[3.4-b]indole) on the basis of mass spectroscopy and nuclear magnetic resonance spectra (1H NMR, 13C NMR, and COSY). The norharman showed potent inhibition against α-glucosidase enzyme in a concentration-dependent manner, with an IC50 value of 0.27 mM for maltase and 0.41 mM for sucrase. A Lineweaver-Burk plot revealed that norharman inhibited α-glucosidase enzyme uncompetitively, with a Ki value of 0.13 mM.
Acidic polysaccharide from Korean red ginseng was found to inhibit pancreatic lipase activity and cause reduction of plasma triglyceride level after oral administration of corn oil emulsion to rats. Thus acidic polysaccharide may reduce plasma triglyceride through its inhibitory action on pancreatic lipase and successive inhibition of intestinal absorption of fat due to reduction of lipolysis. In the course of this experiment, we found an unknown ninhydrin positive substance in Korean red ginseng. The unknown substance was identified to be arginyl-fructosyl glucose(Arg - Fru - Glc). Coment of this new compound was $5.37\%$ in Korean red ginseng powder. Sucrase and maltase activities in mucous layer of rat jejunum were found to be inhibited by Arg-Fru-Glc. Physiological significance of the new compound was discussed based on these experimental results.
An $\alpha$-glucosidase inhibitor, CK-4416, was identified from the culture broth of Streptomyces sp. CK-4416. CK-4416, which had some specificity against intestinal disaccharidases, especially sucrase and matlase activities, was purified by adsorption and cationic ion exchange chromatographies. The molecular formula was determined to be $C_{37}H_{63}NO_{30}$ (MW 1001.31) by FAB-MS and NMR analyses. In vitro studies found CK-4416 to show a potent inhibitory activity against sucrase and maltase, but it had low inhibition against $\alpha$-amylase.
Three unknown ninhydrin positive substances (UK-I, UK-II and UK-III) were detected with an amino acid analyzer in a water extract of Korean red ginseng. One of them (UK-II) was isolated and determined to be maltulosyl arginine (Arg-Fru-Glc) on the basis of chemical and spectroscopic evidence. Another one (VK-III) was identified as Arg-Fru. Maltulosyl arginine, but not Arg-Fru, is a newly identified amino acid derivative. The Korean red ginseng was shown to contain more amount of maltulosyl arginine than the white ginseng. Maltulosyl arginine was found to be produced by the Mallard reaction of maltose with arginine during the heating process involved in preparation of the red ginseng. Maltulosyl arginine was found to inhibit maltase activity. Based on these results, the physiological significance of this new compound is discussed.
The inhibitory activity of several crude drugs on $\alpha$-glucosidases, which are the key enzymes for carbohydrate digestion and the prevention of diabetic complications, was investigated. Several crude drugs including Terminaliae Fructus, Mori Cortex Radicis, Caesalpiniae Lignum and Cyrophora esculenta potently inhibited maltase and sucrase isolated from rat intestine, while Arecae Semen and Corni Fructus remarkably inhibited $\alpha$-amylase. Caesalpiniae Lignum and Gyrophora esculenta exhibited significant reductions of blood glucose elevation in mice loaded with maltose and sucrose.
본 실험은 초산균인 Glwonncetobacter hansenii에 의해 코코넛 배지에서 생성된 막인 bacterial fiber가 흰쥐의 장 전반과 소장의 이당류 효소활성 및 체내 지질상태에 미치는 영 향을 조사하였다. 이를 위하여 흰쥐를 0.5% 콜레스테롤 식이로 사육하였으며 섬유소원으로 bacterial fiber를 식이의 2%로 첨가 하였으며, 효과를 비교할 실험군들에게는 섬유소원으로 식물성 cellulose와 pectin을 같은 수준으로 식이에 첨가하여 사육 하였다. 실험 4주간 동안 식이섭취량 및 체중 증가량은 세군간에 차이가 없었다. 소장의 길이, 무게 등은 군간에 유의적인 차이는 없었으나 소장점 막 sucrase활성이 bacterial fiber군에서 감소하였고, maltase 활성도 감소하는 경향이었다. 맹장의 무게가 bacterial fiber군에서 증가하였으나, 결장의 무게에는 영향이 없었고, 결장 내용물 및 건조분변량이 감소하였다 혈장 총 콜레스테롤 농도는 세군중에서 pectin군이 유의적으로 낮았고 HDL-콜레스테롤 함량은 반대로 pectin군에서 높았다. 혈장과 간조직의 중성지방 함량은 모두 bacterial fiber군에서 다른 군들에 비하여 유의적으로 낮았다. 간조직 콜레스테롤 함량은 pectin군에서 낮았다. 간조직의 상대적 무게는 군간에 차이가 없었고, 혈장 GOT 및 GPT 활성도 bacterial fiber군에서 다른 두 군에 비하여 차이가 없었다. 본 연구의 결과, 실험에서 사용한 bacterial fiber는 체내의 중성지방 수준을 낮추어 지질 상태를 개선 할 수 있는 가능성을 보여 주어 이에 대한 기전과 이 작용의 활용에 대한 연구가 요망된다. 본 실험에서는 콜레스테롤 및 소장의 구조와 소화효소에는 큰 영향을 주지 않았으나 사용하는 섬유소의 수준을 보다 높이거나 다른 섬유소와 복합적으로 사용하는 경우, 또 동물의 나이에 따라 다른 결과가 도출될 수도 있으리라고 사료되어 앞으로의 지속적인 연구가 필요하다.
8주령의 C57BL/KsJ db/db마우스에 상백피 냉침추출물을 투여하면서 5주간 사육하여 식이섭취량, 체중변화, 혈중 포도당 농도를 관찰하고, 소장내 ${\alpha}-glycosidase$ 활성변화와 혈중 당화헤모글로빈 농도, 중성지방 농도, 인슐린 농도를 측정하였다. 상백피추출물 500 mg/kg을 공급하는 Rad 500군과 1000 mg/kg을 공급하는 Rad 1000군, db/db 대조군과 lean군으로 나누고 대조약물로는 acarbose 5 mg/kg을 투여하였다. Rad 1000군은 식이섭취량에서 db/db 대조군보다 낮은 수준이었으며 그에 따라 체중증가량도 유의적으로 낮았다. 또한 공복시 혈중포도당 농도는 Rad 500, Rad 1000, acarbose군 모두 db/db 대조군보다 낮았다. 혈중 당화헤모글로빈 농도와 중성지방 함량 측정결과는 농도의존적으로 시료투여군이 db/db대조군보다 낮게 측정되었다. 혈중 인슐린 농도 측정결과 lean군을 제외한 나머지군간에 유의적인 차이는 없었고 Rad 500군에서 약간 높은 수준이 관찰되었다. 소장을 proximal, middle, distal 세부위로 나누어 각각에 대해 maltase, sucrase, lactase의 활성을 측정해본 결과 db/db군은 lean군에 비해 세효소의 활성이 매우 높은 활성을 나타내었으며, 시료투여군은 sucrase의 경우 proximal, middle 부위는 db/db군 보다 낮고 distal 부위는 활성이 높았다. Maltase, lactase의 활성은 모든부위에서 시료투여군이 db/db군 보다 낮아 lean군 수준이었다. 이상의 결과들로 미루어 상백피는 db/db마우스에서 식이섭취량을 줄여주어 체중증가를 억제시키고 소장내 glycosidase활성을 전반적으로 낮춰 혈중포도당 농도를 낮춰주고 혈중 당화헤모글로빈 농도와 중성지방 농도를 낮춰주는 등의 항당뇨효과가 있음을 알 수 있었다.
The current study examined the effects of freeze-dried mulberry fruit on disaccharidase activity in the small intestine and the lowering of blood glucose in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. Sprague-Dawley male rats were randomly assigned to one normal and three streptozotocin (STZ)-induced diabetic groups. The diabetic groups were fed a mulberry fruit-free diet (DM-group), 0.3% mulberry fruit diet (DM-F group) or 0.6% mulberry fruit diet (DM-2F group). After they were fed the experimental diets for three weeks, diabetes was induced with an intraperitoneal injection of streptozotocin 50 mg/kg b.w before sacrificing 9 days later using the same experimental treatments. Analyses of anthocyanins, flavonoid and 1-deoxynojirimycin (DNJ) of lyophilized mulberry fruit were carried out and the major anthocyanins were rutin (142.5 mg), isoquercitrin (10.3 mg), quercetin (5.8 mg), morin (1.6 mg) dihydroquercetin (3.83 mg), cy-3-O-glucopyranoside (230.45 mg) and cy-3-O-rutinoside (131.5 mg) on the basis of 100 g dry weight. Total DNJ content was 2.39 mg/g dry weight of lyophilized mulberry fruit. Blood glucose level decreased in the diabetic mts fed the mulberry fruit supplement. The content of the liver glycogen increased in the diabetic mts fed the mulberry fruit supplement. Disaccharidase activity in the proximal part of the intestine, such as that of maltase, sucrase and lactase in the mulberry fruit supplementation groups, were lower than that of the DM group. These results suggest that mulberry fruit possess a suppressive effect on hyperglycemia, possibly by inhibiting the activity of disaccharidase in the small intestine of rats.
The digestibility of xylooligosaccharide(XO) by juices of the digestive tract and retardation effect of XO on the adsorption of bile acids were compared with fructooligosaccharide(FO) and isomaltooligosaccharide(IO). In vitro digestion experiments showed that any hydrolyzed products of FO, IO and XO were not detected by HPLC after reaction with saliva, pancreatic, artifical intesteinal, and large intestinal luices, and artifical sera for 4 hours at 37$^{\circ}C$. However, IO were mostly digested by the small intestinal juice, and some quantity of FO were digested. XO were not digested at all by any enzyme of digestive tract. In order to investigate retardation effect of XO on the bile acid absorption. In vitro, permeability of bile acid against dialysis membrane was determined in the mixture which contained guar gum instead of XO was set 100%. The premeability of bile acid showed about 50% in the FO and IO mixture and 43% in the XO mixture. The activity of lactase in FO group and activity of sucrase and maltase in XO group in rat small intestinal mucosa were significantly decreased. Consequently, the present results indicate that XO is indigestible in digestive tract and has retarding effect of adsorption of bile acid compared with the other oligosaccharides. The disaccharidase activity of the XO dietary group was lower than that of the other oligosaccharides dietary group. Furthermore, it was suggested that hydrolysis of sugar may be retarded in digestive tract and glucose level in blood may be controlled effectively by the XO.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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