본 연구의 목적은 소 체외수정란의 체외발달에 있어서 Matrigel의 첨가효과를 조사하는 것이었다. 소 체외수정란은 Ⅰ) SOF+0.8% BSA (SOF-B), Ⅱ) 0.8% Matrigel이 첨가된 SOF+0.8% BSA (SOF-M), 그리고 Ⅲ) SOF+0.8% BSA 배양 후, SOF+10% FBS(SOF-BF)에서 배양을 실시하였다. 배양액 내 Matrigel의 첨가는 배반포 발달율을 증가시키지 않는 것으로 나타났다(SOF-B, 26.6%; SOF-M, 28.2%; SOF-BF, 26.2%). 그러나, 부화 배반포의 비율은 Matrigel 첨가에 의하여 유의하게 증가하는 것으로 나타났다(SOF-B, 23.7%; SOF-M, 48.7%; SOF-BF, 18.5%) (P<0.05). 배반포의 세포수를 조사한 결과는 각 처리군 간에 차이가 없는 것으로 나타났으며(SOF-B, 172.7±35.5; SOF-M, 175.1±37.4; SOF-BF, 172.8±38.1), 또한 세포자연사가 유발된 세포수의 비율도 각 처리군 간에 차이가 없는 것으로 조사되었다(SOF-B, 3.6±3.2%; SOF-M, 4.3±2.6%; SOF-BF, 4.9±4.3%). 본 실험결과는 Matrigel이 소 체외수정란의 부화과정을 촉진시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과들을 종합해 볼 때, 세포외 기질 복합체인 Matrigel의 첨가는 무혈청 수정란 배양체계에서 보다 생리적인 환경을 조성할 수 있는 방법이 될 수 있을 것으로 사료된다.
J. M. Koo;S. H. Hyun;Lee, B. C.;S. K. Kang;W. S. Hwang
한국수정란이식학회지
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제17권3호
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pp.239-249
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2002
Embryos derived from pig oocytes matured in mSOF are able to develop to blastocysts after IVF. Experiment 1 evaluated the effects of two maturation media (TCM-199 vs mSOF) on maturation rate, fertilization parameters, including penetration, polyspermy, male pronuclear formation, and the mean number of sperm penetrated per oocyte. Experiment 2 and Experiments 3 examined the effects of two maturation media on zona pellucida solubility and cortical granule distribution by transmissible electron microscopy, respectively. Experiment 4 assessed the effects of two maturation media on the in vitro embryo cleavage rate and development to blastocyst. Lastly, experiment 5 examined the cell number of blastocyst. An effect of media (P<0.05) was detected for mSOF on the mean number of sperm per oocyte. In TCM group, zona digestion time (196.5$\pm$15.5 vs 131.6$\pm$20.1 before IVF, 397.5$\pm$30.3s vs 185.3$\pm$16.4s after IVF, p<0.05) was higher in TCM-199 group. No significant effects of media was observed on cortical granule distribution between two groups by TEM. An effect (P<0.05) was observed on embryo development to blastocyst (16% vs 8%) but not on cleavage rates. No significant effects of media was observed on total cell number of blastocyst. We found that the high mean number of sperm penetrated per oocyte and the weaker zona pellucida on the basis of the digestion time was shown in pig oocytes matured in mSOF, however, porcine oocyte maturation with supplemented synthetic oviduct fluid medium (mSOF) resulted in blastocyst cell numbers comparable to those observed with Tissue Culture Medium 199.
J. M. Koo;Y. J. Ryu;Lee, E. G.;Kim, D. Y.;Kim, S. W.;S. K. Kang;Lee, B. C.;W. S. Hwang
한국수정란이식학회지
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제18권1호
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pp.69-73
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2003
본 연구에서는 TCM-199, mSOF, NCSU-23 세 종류의 배지의 자연 단위 발생 유도로 형성된 돼지 배아의 초기 발육에 대한 효과를 조사하였다. 실험 1에서는 세 종류의 배지에서 체외 성숙된 도축장 유래 돼지 난자의 성숙율을 성숙 48 시간째 핵상 관찰로 조사하였다. 각 배지에서의 핵 성숙율은 mSOF군에서 83.1$\pm$2%, NCSU-23 군에서 78.0$\pm$3%, TCM-199군에서 83.5$\pm$2%로 세 배지의 난자 성숙율에 대한 유의적 차이는 없었다(P(0.05). 실험 2에서는 돼지 난자의 전핵 형성률, 단위 발생으로 형성된 배아의 분할율, 6-8세포기까지의 발육율 등이 각각 체외 성숙 55-58 시간, 96시간 그리고 168 시간 후에 관찰되었다. 전핵 형성율 (5.4$\pm$2 % in mSOF and 3.7$\pm$1% in NCSU-23 vs 1.7$\pm$3% in TCM-199) 그리고 6-8cell까지의 발육율은 (3.2$\pm$3% in mSOF and 4.0$\pm$1% in NCSU-23 vs 1.4$\pm$3% in TCM-199) mSOF군과 NCSU-23군에서 유의적으로 높았다(P<0.05). 이상의 결과를 볼 때 mSOF 배지와 NCSU-23 배지에서 장시간 배양에 의한 난자의 단위발생 유도율이 유의적으로 높았다.
This paper is to investigated the analysis of performance characteristics of diesel oxidation catalyst (DOC) for diesel vehicle with 2.5L piston displacement. The performance evaluation test of DOC applied to test diesel vehicle was carried out for four kinds of DOCs manufactured from different company. The testing DOCs were randomly selected from the retrofit vehicle and then standard test vehicle that was representative for the application group was equipped with DOC for the test. In this verification test, the reduction rate of particulate matter (P.M.) and the deviation of the performance of the DOC were examined through CVS-75 mode of the standard vehicle and SOF reduction rate of specific DOC was investigated. It was found that some DOCs failed to pass the criteria of the P.M. reduction rate because of the reason seen catalyst aging even if they were same devices. In the result of SOF analysis, the specific DOC showed more PM reduction than SOF of PM. reduction exceptionally.
The present study was undertaken to examine the critical effect of $Ca^2$+ concentration on electrostimulation and post-electrostimulation media for electric activation of in vitro matured oocytes of Korean Native Cattle. Oocytes collected from slaughterhouse ovaries were matured in TCM 199 containing FSH, estradiol-17$\beta$ and FBS with granulosa cell monolayer for 24 hours and denuded with hyaluronidase. And then cumulus-free oocytes were submitted to a DC field of 1.0 kV/cm for 60 $\mu$sec in electroporation media(0.28 M mannito' and PBS) with different $Ca^2$+ concentations (0.00, 0.05, 0.10 and 0.15 mM). Stimulated oocytes were stained and examined for pronuclear formation after incuhation in SOF for 12 hours. The rates of pronuclear formation in hovine oocytes electrically stimulated in 0.28 M mannitol with 0.05, 0.10 and 0.15 mM $Ca^2$+(60.3, 82.2 and 75.0%) were significantly higher than without $Ca^2$+(6.3%) at 12 hours after an electric pulse(p<0.005). The activation rates of Korean Native Cattle oocytes stimulated in PBS supplemented with 0.05, 0.10 and 0.15 mM $Ca^2$+(71.0, 75.8 and 75.4%) were significantly higher than without $Ca^2$+(23.5%) after post-stimulation incubation(p<0.005). After incubation of oocytes in SOF with and without $Ca^2$+ following electric stimulation in 0.28 M mannitol with 0.10 mM $Ca^2$+, the rates of pronuclear formation of bovine oocytes in $Ca^2$+-free SOF(85.7%) was significantly higher than in SOF with 1.71 mM $Ca^2$+(62.5%, p<0.05). When oocytes were stimulated in two electrostimulation media supplemented with $Ca^2$+ and incubated in $Ca^2$+-free SOF, there were no significant differences in the rates of pronuclear formation hetween 0.28 M mannitol and PBS. These results indicate that a single electric pulse could induce activation of Korea Native Cattle oocytes in 0.28 M mannitol and PBS supplemented with $Ca^2$+. Furthermore, to improve the activation rates, it was hetter that stimulated oocytes were incubated in $Ca^2$+-free SOF after electric stimulation than in SOF with $Ca^2$+.
Kim, Se-Woong;Jung, Yeon-Gil;Park, Jong-Im;Roh, Sangho
한국수정란이식학회지
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제29권3호
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pp.229-234
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2014
The aim of the present study was to compare two different serum-free media, modified synthetic oviduct fluid (mSOF) and modified potassium simplex optimization medium (mKSOM) containing 20% RD (RPMI1640 + DMEM, 1:1 v/v) (RD-mKSOM), for in vitro culture (IVC) of bovine embryos. After in vitro maturation and fertilization, the presumptive zygotes were cultured in two different serum-free conditions for 7 days and 9 days to evaluate blastocyst formation and hatching, respectively. Serum supplemented conventional CR2 medium was used as control. After 7 day of culture, there was no significant difference in cleavage and blastocyst formation rates among three groups (mSOF, 59.3 and 30.1%; RD-mKSOM, 65.0 and 41.5%; control, 51.6 and 38.0%, respectively). Hatching rate was significantly higher in control (69.0%) than other experimental groups (mSOF, 22.0%; RD-mKSOM, 39.5%) (P<0.0001 and P<0.001, respectively). Although both serum-free conditions showed lower hatching rates than serum-added control, in serum-free groups, RD-mKSOM showed significantly higher hatching rate than mSOF (P<0.001). In addition, one-step using RD-mKSOM may facilitate IVC procedure than two-step culture system. In conclusion, the results indicate that one-step RD-mKSOM is more suitable defined culture system for IVC of bovine embryos than two-step mSOF.
The objective of this study was to evaluate the embryonic development ability and the appearance of blastocysts of bovine in vitro fertilized oocytes cultured in different culture media, and also to evaluate survival rate after thawing of frozen embryos by using 1.5 or 1.8M ethylene glycol(EG) with sucrose or trehalose. Fertilized oocytes were divided into three groups; i ) monolayer of cumulus /granulosa cell prepared by TGM 199+5% calf serum(TGM199), ii)GRlaa+5% CS, iii)SOF+5% CS, and they were cultured after insemination for 9 days, at 39˚C, under 5% $CO_2$ in air, but SOF+5% CS was cultured at 39˚C, under 5% 02, 5% GO2, 99% N2. Blastocysts derived from GRlaa + 5% CS on day 7~8 after insemination were frozen by using 1.5M EG or 1.8M EG with/without 0.2M sucrose or O.1M trehalose. The development rate of blastocysts on day 7 after insemination in SOF+5% CS was significant higher than in TCM199 or CR1aa(P<0.05). The appearance rate of blastocysts on day 7-8 after insemination was higher than in TCM199, when fertilized oocytes were cultured in GRlas or SOF. The survival rate of frozen blastocysts after thawing tended to increase, when blastocysts were frozen by using 1.8M EG with 0.2M sucrose or O.1M trehalose. These results indicated that SOF or CRlaa media with amino acids was superior to TCM199 with monolayer in terms of blastocyst development in culturing of in vitro fertilized bovine nocytes, and sucrose or trehalose was supposed to prevent embryos from the freezing shock.
연구목적: 본 실험은 현재 임상에서 사용되고 있는 4가지 복합레진 연마 시스템의 연마 능력과 연마에 걸리는 시간을 평가하여 그 효율성을 알아보고자 하였다. 연구 재료 및 방법: 직경 4 mm, 높이 2 mm 의 테플론 몰드에 Z-250 (3M ESPE) 복합레진을 충전하고 양면을 슬라이드 글라스로 압접한 후 Optilux 501을 이용하여 각 면을 40초씩 중합하였다. 중합된 복합레진 디스크를 분리하고 #320 사포로 연마하여 동일한 거친면을 형성한 후 다음의 4가지 연마시스템을 이용하여 표면을 연마하였다: Sof-Lex (3M ESPE), Jiffy (Ultradent), Enhance (Dentsply/Caulk), and Pogo (Dentsply/Caulk). 연마된 면을 표면조도측정기를 이용하여 거칠기를 측정하고 연마에 소요된 시간을 측정하여 연마도와 효율성을 비교 평가하였다. 통계는 one-way ANOVA후 Duncan's multiple range test를 이용하여 군간의 비교를 하였다. 결과: 연마 후 표면조도는 Pogo에서 가장 낮게 나타났으며 Sof-Lex에서 가장 높게 나타났다. 연마에 소요된 시간은 Pogo에서 가장 짧게 걸렸으며 Sof-Lex, Enhance, Jiffy의 순으로 나타났다. 결론: One-step 연마 시스템인 Pogo는 복합레진의 연마에 있어 매우 짧은 시간에 매우 매끈한 면을 얻을 수 있는 것으로 나타나 수복물의 최종 연마에 매우 효율적으로 사용할 수 있는 것으로 평가되었다.
소아치과 임상에서 자주 사용하고 있는 심미 수복재료는 마무리와 연마 과정을 통해 내구정과 심미성이 향상된 수복물을 얻을 수 있다. 본 연구에서는 수복재료 종류에 따른 연마기구의 적합성과 사용된 연마기구 간의 효율성을 비교하고자 하였다. Z250(3M, USA), Heliomolar(Ivoclar Vivadent, USA), Dyract AP(Dentsply, USA), Fuji II LC(GC, Japan)를 이용하여 시편을 제작하고, 연마기구인 Enhance(Dentsply, USA), Sof-Lex(3M, USA), Composite(Shofu, Japan)를 적용하여 연마하였다. 각 제품마다 제작된 시편 중에 어떠한 연마 과정도 거치지 않은 5개의 시편을 대조군으로 사용하였다. 이 시편들의 표면 거칠기($R_a\;value,\;{\mu}m$)를 측정하고, 주사전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 수복재료에 따른 표면 거칠기를 비교한 결과 Z250이 가장 낮은 표면 거칠기를 나타냈으나 다른 수복재료와 비교하여 유의한 차이는 없었다(p>0.05). 2. 네 가지 수복재료는 대조군에서 가장 평활한 표면을 얻었고, 모든 연마 과정은 표면 거칠기를 증가시켰다. 3. 세 가지 연마기구 중 Sof-Lex가 가장 평활한 표면을 형성하였으며, Sof-Lex와 Enhance에 의한 표면 거칠기는 유의한 차이를 보였다(p < 0.05). 4. 주사전자현미경 관찰 시 네 가지 수복재료의 대조군은 실험군에 비해 균일한 표면을 나타냈다.
This study was done to evaluate the changes of enamel surface by interproximal stripping and recovery of it by polishing. The number of 34 1st premolars which had extracted for orthodontic treatment were selected as samples. Interproximal stripping was performed by hand with metal strip and strip placer (Dentaurum Co., Germany) and low speed handpiece with diamond disk (Superdiaflex, Germany). Polishing was performed by hand with plastic strip (3M Col) and low speed handpiece with whip-mix, DCPA (Dicalcium Phosphate, Anhydrous, $CaHPO_4$) powder and Sof-lex (3M Co. U.S.A.) polishing kit. Each groups were examined under the scanning electron microscope (JEOL Co., JSM-840A, Japan) and the following results were obtained: 1. The stripped group performed by metal strip and diamond disk altogether showed deep furrow on the enamel surface as wide as about $10{{\mu}m}$. 2. There could be seen more irregular scratched line in the group stripped by metal strip than that by diamond disk. 3. The polished group performed by plastic strip and DCPA powder showed slight smoothening of the edge of stripped furrow on the enamel surface without relation to the stripping method. 4. The polished group performed by Sof-lex progressive polishing kit could not avoid the formation of the furrows on the enamel surface according to the particle size without relation to the stripping method. 5. The polished group performed by the superfine polishing wheel, the final stage of Sof-lex polishing method showed shallow scratched line as wide as within about $2{{\mu}m}$ on the enamel surface without relation to the stripping method. 6. The interproximal stripped enamel surface could not recover its original surface texture by any kind of polishing methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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