Song, Ilchan;Kang, Yang Joo;Kim, Dae Heon;Kim, Mi Kyung;Ko, Kisung
BMB Reports
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제53권4호
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pp.229-233
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2020
The anti-colorectal cancer monoclonal antibody CO17-1A (mAb CO), which recognizes the tumor-associated antigen EpCAM, was expressed in transgenic Arabidopsis plants. PCR and western blot analyses showed the insertion and expression of heavy chain (HC)/HC fused to the KDEL ER retention modif (HCK) and light chain (LC) of mAb CO and mAb CO with HCK (mAb COK) in Arabidopsis transformants. Both plant-derived mAbP CO and mAbP COK were purified from a biomass of approximately 1,000 seedlings grown in a greenhouse. In sandwich ELISA, both mAbP CO showed a slightly higher binding affinity for the target, EpCAM, compared to mAbM CO. In cell ELISA, both mAbsP COs showed binding affinity to the human colorectal cancer cell line SW480. Furthermore, mAbM CO, mAbP CO, and mAbP COK exhibited dose and timedependent regression effects on SW480 cells in vitro. In summation, both mAbP CO and mAbP COK, expressed in Arabidopsis, recognized the target antigen EpCAM and showed anti-proliferative activity against human colorectal cancer cells.
There are two types of metal hydride electrodes as a negative electrode in a Ni-MH battery, $AB_2$ Zr-based Laves phases and $AB_5$ LM(La-rich mischmetal)-based alloys. The $AB_5$ alloy electrodes have characteristic properties such as a large discharge capacity per volume, easiness in activation, long cycle life and a low cost of alloy. However they have a relatively small discharge capacity per weight. The $AB_2$alloy electrodes have a much higher discharge capacity per weight than $AB_5$ alloy electrodes, however they have some disadvantages of poor activation behavior and cycle life. Therefore, in order to improve the discharge capacity of the $AB_5$ alloy electrode the Zr, Ti and V which are the alloying elements of the $AB_2$ alloys were added to the $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}$ alloy which was chosen as a $AB_5$ alloy with a high capacity. The addition of Zr, Ti and V to $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}$ alloy improved the activation to be completed in two cycles. The discharge capacities of Zr 0.02, Ti 0.02 and V 0.1 alloys in $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}M_y$ (M = Zr, Ti, V) were respectively 346, 348 and 366 mAh/g alloy. The alloy electrodes, Zr 0.02, Ti 0.05 and V 0.1 in $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}M_y$ (M = Zr, Ti, V), have shown good cycle property after 200 cycles. The rate capability of the $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}M_y$ (M = Zr, Ti, V) alloy electrodes were very good until 0.6 C rate and the alloys, Zr 0.02, Ti 0.05 and V 0.1, have shown the best result as 92 % at 2.4 C rate. The charge retention property of the $LaNi_{3.6}Ai_{0.4}Co_{0.7}Mn_{0.3}M_y$ (M = Zr, Ti, V) alloys was not good and the alloys with M content from 0.02 to 0.05 showed better charge retention properties.
Ju, Won Seok;Song, Ilchan;Park, Se-Ra;Seo, Sang Young;Cho, Jin Hyoung;Min, Sung-Hun;Kim, Dae-Heon;Kim, Ji-Su;Kim, Sun-Uk;Park, Soon Ju;Ko, Kisung;Choo, Young-Kug
Journal of Plant Biotechnology
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제46권3호
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pp.217-227
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2019
Production of therapeutic monoclonal antibodies (mAbs) using a plant platform has been considered an alternative to the mammalian cell-based production system. A plant-derived mAb CO17-1AK ($mAb^P$ COK) can specifically bind to various types of cancer cell lines. The target protein of $mAb^P$ COK is the epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) highly expressed in human epithelial cancer cells, including breast and colorectal cancer cells. It has been hypothesized that its overexpression supports tumor growth and metastasis. A ganglioside is extended well beyond the surfaces of the various cell membranes and has roles in cell growth, inflammation, differentiation, and carcinogenesis. However, the regulation of EpCAM gene expression in breast cancers and the role of gangliosides in oncogenesis are unclear. Here, the purpose of this study was to determine the effects of $mAb^P$ COK on human breast cancer cell proliferation, apoptosis, and ganglioside expression patterns. Our results show that treatment with $mAb^P$ COK suppressed the growth of breast cancer cells and induced apoptotic cell death. It also upregulated the expression of metastasis-related gangliosides in breast cancer cells. Thus, treatment with $mAb^P$ COK may have chemo-preventive therapeutic effects against human breast cancer.
식물 생명공학 기술을 이용해 인간에게 유용한 치료단백질 및 백신을 생산하는 것은 최근에 각광받고 있는 연구 분야이다. 식물을 이용한 유용 단백질 생산은 다른 시스템에 비하여 경제적일 뿐만 아니라 병원성 인자에 대한 안전성이 있어서 유용하다고 할 수 있다. 암세포 표면에 특이적으로 발현하고 있는 분자 와 당 구조를 각각 인지할 수 있는 두 종류의 항체를 동시에 투여하는 면역 치료는 질병의 치료를 유도하는 데 있어서 효과적일 수 있다. 본 연구는 기존에 본 연구팀에서 확보하고 있었던 두 종류의 항체 단백질(mAb CO17-1A, mAb BR55) 생산 형질전환 식물체를 이용하여 상호교배를 통하여 한 식물에서 두 종류의 항체 단백질을 모두 생산하는 식물 발현 시스템 구축에 관한 연구이다. 각기 다른 유전자를 갖고 있는 식물체로부터 수분을 유도하여 씨앗을 얻고 이 씨앗을 배양하여 완벽한 식품 개체로 성장시켰으며, 그 식물체로부터 DNA, RNA, 단백질을 분리하여 형질전환 유전자를 포함하고 있는지 여부를 확인하였다. 그 결과, 개체에 차이는 있지만, 한 식물에서 두 항체 유전자를 갖고 있음을 확인할 수 있었고, 이 유전자는 식물체 내에서 안정적으로 transcription 되었음을 확인하였다. 또한, 두 종류의 항체를 동시 생산하는 식물체에서 분리한 단백질은 한 종류의 항체 단백질만 생산하는 식물체에 비하여 수용성 단백질 단위당 항체 발현률이 높게 나타나는 것을 확인하였다. 따라서 본 연구를 통하여 식물을 이 용한 유용 단백질 생산 효율을 높일 수 있는 시스템을 확립하였으며 앞으로 추가적으로 생산한 항체의 생물학적 활성 및 항암 효능, 당 구조 분석 등에 대한 연구용 수행한다면, 식물 생명공학적 방법을 통한 항체 생산에 대한 새로운 가능성을 제시할 수 있을 것으로 기대된다.
식물화분발아는 수분수정을 통한 식물의 종자형성과 식물개체의 지속적 세대유지를 위한 중요한 요소이다. 따라서, 본 연구에서는 boric acid를 이용하여 형질전환 하지 않은 (NT) 식물과 항암활성 (anti-colorectal cancer mAb CO17-1A, anti-breast cancer mAb BR55) 혹은 항바이러스 활성을 갖는 항체 (anti-rabies virus mAb57)의 유전인자를 발현하는 형질전환식물 간의 in vitro pollen germination과 Pollen tube growth의 차이를 알아보았다. Boric acid의 화분발아에 미치는 영향을 보기 위하여 0, 5, 10, 15, 20, $40{\mu}g/mL$의 농도를 갖는 발아용액 (germination buffer)을 담배식물 화분에 처리하여 pollen germination rate을 본 결과 $20{\mu}g/mL$에서 가장 높게 발아율 (49.5%)을 보였다. Boric acid ($20{\mu}g/mL$)에 대해 형질전환식물과 NT 식물에서 화분발아율을 관찰한 결과, boric acid를 처리하지 않은 화분에 비해 형질전환여부에 관계없이 발아율이 3-10배 증가하였다. 또한, boric acid $20{\mu}g/mL$농도에서 형질전환식물과 NT 식물의 pollen tube length의 성장률이 가장 높게 나타났다. 시간 별로 형질전환 식물들의 Pollen tube length를 확인 한 결과, germination buffer ($20{\mu}g/mL$)를 처리하고 난 후 3시간까지 가장 빠른 성장률을 보였으며, 3시간 후에는 그 성장률이 둔화됨을 확인하였다. Western blot를 이용하여 식물의 화분과 잎에서 황체유전자 단백질 발현을 확인하였다. 화분과 잎에서의 발현을 비교해 본 결과, 잎에서 항체의 안정한 발현을 확인하였다. 본 연구결과를 통해 $20{\mu}g/mL$의 boric acid가 항체발현 형질전환담배식물의 in vitro pollen germination을 보기 위해 가장 적절한 농도라는 것을 제시하였다. 궁극적으로 의료용 항체유전자를 발현하는 형질전환식물의 in vitro pollen germination viability를 확인함으로써 형질전환식물의 화분의 안정적인 수분수정이 이루어질 수 있음을 간접적으로 제시하였다.
Objective: This study was conducted to investigate the potential effects of prolonged photoperiod on the serum lipids, carcass traits, and meat quality of Jinjiang cattle during winter. Methods: Thirty-four Jinjiang bulls aged between 14 and 16 months were randomly assigned to two groups that were alternatively subjected to either natural daylight +4 h supplemental light (long photoperiod, LP) or natural daylight (natural photoperiod, NP) for 96 days. The potential effects on the levels of serum lipids, carcass traits, meat quality, and genes regulating lipid metabolism in the intramuscular fat (IMF) of the cattle were evaluated. Results: Jinjiang cattle kept under LP showed significant increase in both dry matter intake and backfat thickness. the serum glucose and the plasma leptin levels were significantly reduced, while that of melatonin and insulin were observed to be increased. The crude fat contents of biceps femoris muscle and longissimus dorsi muscle were higher in LP than in NP group. In longissimus dorsi muscle, the proportions of C17:0 and C18:0 were significantly higher but that of the C16:1 was found to be significantly lower in LP group. The relative mRNA expressions in IMF of longissimus dorsi muscle, the lipid synthesis genes (proliferator-activated receptor gamma, fatty acid-binding protein) and the fatty acid synthesis genes (acetyl-coa carboxylase, fatty acid synthetase, 1-acylglycerol-3-phosphate acyltransferase) were significantly up-regulated in LP group (p<0.05); whereas the hormone-sensitive lipase and stearoyl-CoA desaturase 1 were significantly down-regulated in LP than in NP group. Conclusion: Prolonged photoperiod significantly altered the growth performance, hormonal levels, gene expression and fat deposition in Jinjiang cattle. It suggested that the LP improved the fat deposition by regulating the levels of different hormones and genes related to lipid metabolism, thereby improving the fattening of Jinjiang cattle during winter.
Rony Lizana, Riveros;Rosiane, de Sousa Camargos;Marcos, Macari;Matheus, de Paula Reis;Bruno Balbino, Leme;Nilva Kazue, Sakomura
Animal Bioscience
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제36권1호
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pp.75-83
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2023
Objective: The objective of this study was to describe a methodological procedure to quantify the heat production (HP) partitioning in basal metabolism or fasting heat production (FHP), heat production due to physical activity (HPA), and the thermic effect of feeding (TEF) in roosters. Methods: Eighteen 54-wk-old Hy Line Brown roosters (2.916±0.15 kg) were allocated in an open-circuit chamber of respirometry for O2 consumption (VO2), CO2 production (VCO2), and physical activity (PA) measurements, under environmental comfort conditions, following the protocol: adaptation (3 d), ad libitum feeding (1 d), and fasting conditions (1 d). The Brouwer equation was used to calculate the HP from VO2 and VCO2. The plateau-FHP (parameter L) was estimated through the broken line model: HP = U×(R-t)×I+L; I = 1 if t<R or I = 0 if t>R; Where the broken-point (R) was assigned as the time (t) that defined the difference between a short and long fasting period, I is conditional, and U is the decreasing rate after the feed was withdrawn. The HP components description was characterized by three events: ad libitum feeding and short and long fasting periods. Linear regression was adjusted between physical activity (PA) and HP to determine the HPA and to estimate the standardized FHP (st-FHP) as the intercept of PA = 0. Results: The time when plateau-FHP was reached at 11.7 h after withdrawal feed, with a mean value of 386 kJ/kg0.75/d, differing in 32 kJ from st-FHP (354 kJ/kg0.75/d). The slope of HP per unit of PA was 4.52 kJ/mV. The total HP in roosters partitioned into the st-FHP, termal effect of feeding (TEF), and HPA was 56.6%, 25.7%, and 17.7%, respectively. Conclusion: The FHP represents the largest fraction of energy expenditure in roosters, followed by the TEF. Furthermore, the PA increased the variation of HP measurements.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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