Various physico-chemical and biological methods have been used to remove. cyanobacteria which causes blooms and releases toxin. The purpose of the following experiment is aimed finding out which cyanobacteria are affected by $_L-lysine $ and what concentration of$_L-lysine $ inhibits cyanobacteria. The 20 samples of Microcystis sp. have been tested. To prove the growth inhibition on Microcystis sp., double-layered agar method and microplate method have been used. When the concentration of $_L-lysine $ is as heavy as 100 ${\mu}g\; ml^{-1}$~300 ${\mu}g\; ml^{-1}$, some Microcystis sp. have made halo zone. Some Microcystis sp. have shown so high activity as to be inhibited in their growth by the $_{L}$-lysine of concentration 10 ${\mu}g\; ml^{-1}$ with microplate method. These activities are various in accordance with every species. In additions, the microplate method has been proven to be an easy way which examine the lytic activity on the species of algae.e.
The optimum conditions for protoplast formation and regeneration from Pyricularia oryzae Cav. were selected as follows. As a basic solution, 0.02M potassium phosphate buffer solution plus 0.6M KCl adjusted to pH 5.2 with 1N HCl was used. A mixture of enzyme combinations with 20mg Cellulase R-l0/ml, 5mg Macerozyme R-l0/ml and l0mg Driselase/ml used as a lytic enzyme showed better lytie effect than any single enzyme treatment for protoplast formation. Two-day-old mycelia of P. oryzae grown in the mixture of three lytie enzyme solution at $30^{\circ}C$ for 3 hr showed best condition for protoplasts formation. For regeneration from the protoplasts of P. oryzae, potato dextrose agar containing 0.02M potassium phosphate plus 0.6M KCl used as a stabilizer was best for regeneration medium.
The root of Bupleurum falcatum L.(BF) has been widely used in oriental medicine as a major camponent in many prescriptions for chronic hepatitis, renal disease, tuberculosis and some other infectious diseases. Many attempts have done to investigate the therapeutic effects of these principles. However, any kinds of screenig on immune regulatory- and antitumor- effects of BF has not been reported. The present study, therefore, was undertaken to investigate the BF-effects on cellular- and humoral-immune responses, phagocytic activities of macrophages, lymphokine- and Immunoglobulin(Ig)-production of lymphocytes, tumorigenesis of implanted sarcoma 180 cells and B16 melanoma cells, and proliferations of some tumor cell lines(Fsa II, 3LL and EL4). BF increased phagocytic activities of mouse peritoneal macrophages in a dose- and time-dependent fashion. Arthus reaction and antibody responses to SRBC were slightly enhanced but delayed hypersensitivity was depresed when BF was injected before- and after-SRBC sensitization. BF inhibited the proliferative responses of human tonsillar lymphocytes to PHA- and Con A-stimulation but slightly augmented the response of these cells to Staphylococcus aureus Cowan 1(SAC)-activation. Ig secretion of human mononuclear cells activated with SAC was slightly increased by BF. BF significantly augmented the SAC-induced IL 6 production of human mononuclear cells but not influenced Con Ainduced IL 2 secretion. NK cell activities of mouse splenocytes were somewhat increased when BF was pretreated and this responses were due to the increment of binding affinities of effector cells to target cells and of lytic activities of effector cells against target cells. In vitro BF significantly inhibited the proliferations of cancer cells such as Fsa II, 3LL and EL4 strains. BF decreased not only the frequency of tumor induction but also the tumor size per sarcoma 180 or B16 cell-implanted mouse. Taken together, these results indicate that BF is one of the potential immunomodulator, and suggest its possibility to be used as a desirable antitumor agent.
The immunomodulatory effects of levamisole (LMS) were evaluated in leucocytes of eels in vitro. Proliferation of lymhocytes treated with T-cell mitogen (Con A or PHA) was markedly inhibited by LMS in a dose dependent manner. B cell mitogen (LPS), in contrast, slightly increased the proliferaion. On the other hand, production of MIF and MAF when treated with Con A was increased in a dose-dependent way. NK cell activities were somewhat increased when LMS was pretreated and this augmentation was due to an increase in binding capacity of effector-target cell, but not due to the target cell lytic activity of effector cells. Phagocytic activity, superoxide anion formation, hydrogen peroxide formation and lysozyme activity of leucocytes were enhanced by LMS in a dose related-manner. These results suggest that LMS might modulate the immmune responses by activation of cytokine production and by augmentation of leukocyte activity but not by increment of immunocompetent cell numbers.
The rapid spread of superbugs leads to the escalation of infectious diseases, which threatens public health. Endolysins derived from bacteriophages are spotlighted as promising alternative antibiotics against multi-drug resistant bacteria. In this study, we isolated and characterized the novel Salmonella typhimurium phage PBST08. Bioinformatics analysis of the PBST08 genome revealed putative endolysin ST01 with a lysozyme-like domain. Since the lytic activity of the purified ST01 was minor, probably owing to the outer membrane, which blocks accessibility to peptidoglycan, antimicrobial peptide cecropin A (CecA) was fused to the N-terminus of ST01 to disrupt the outer membrane. The resulting CecA::ST01 has been shown to have increased bactericidal activity against gram-negative pathogens including Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, and Enterobacter cloacae and the most affected target was A. baumannii. In the presence of 0.25 µM CecA::ST01, A. baumannii ATCC 17978 strain was completely killed and CCARM 12026 strain was wiped out by 0.5 µM CecA::ST01, which is a clinical isolate of A. baumannii and resistant to multiple drugs including carbapenem. Moreover, the larvae of Galleria mellonella could be rescued up to 58% or 49% by the administration of CecA::ST01 upon infection by A. baumannii 17978 or CCARM 12026 strain. Finally, the antibacterial activity of CecA::ST01 was verified using 31 strains of five gram-negative pathogens by evaluation of minimal inhibitory concentration. Thus, the results indicate that a fusion of antimicrobial peptide to endolysin can enhance antibacterial activity and the spectrum of endolysin where multi-drug resistant gram-negative pathogens can be efficiently controlled.
Kim, Jong-myeon;Choi, Min-soon;Cho, Jeong-gon;Jung, Young-mee;Park, Tae-wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.34
no.2
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pp.307-313
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1994
We have previously shown that crude water extract of Euonymus alatus (EA) had strong prophylactic effect against chemically induced-and tumor cell implanted-cancer, and that the mechanisms responsible for its antitumor effects were due to nonspecific enhancement of the NK cell activities and the cell mediated immunity. However, it was unknown that any components of crude extract did work so, since it consisted of several components. In this paper, we fractionated the crude watar EA-extract into several fraction such as hexane-, ethylether-, ethyl acetate-, n-butanol- and water soluble-fraction, and screened the immune regulating activities of each fraction by the evaluation of lymphokine production and activated lymphocyte proliferation. As a result of the component fraction of EA-extract, it was found that n-butanol fraction was a potent immunostimulator, and the remained water soluble fraction also contained some stimulator, But, other fraction did not showed any remarkable effect. It is therefore suggested that EA-glycosides in n-butanol fraction may be new one of the potent biological response modifiers. The present study was also undertaken in an efforts to investigate the effects of elm-bark(EB, Ulmus clavidiana var japonica), which has been used for curing ulcer and inflammation as a folk medicine without any kind of experimental evidence to support this, on the cellular- and humoral-immune responses, lymphocyte function and NK cell activities in mice. Regardless of time and duration of EB-treatment, Arthus reaction and antibody response to SRBC were not modified by EB, but delayed hypersensitivity to SRBC was significantly enhanced only when EB was treated prior to SRBC-sensitization. EB slightly inhibited the proliferation responses of splenocytes to PHA-stimulation, but it significantly augmented the responses of these cells to S aureus Cowan 1 and Con A-activation, and these effects were manifested only when EB was added at culture initiation. EB did not influence Ig secretion of spleen cells but it significantly augmented the Con A-induced 1L 2 and MIF production of splenocytes. NK cell activities of splenocytes were markedly riled when effector cells were pretreated with EB and this augmentation was dine to the increase of binding affinity of effector cells to target cells and the target cell lytic activities of effector cells. These results led to the conclusion that EB triggers increase of cellular immune responses, such as delayed hypersensitivitiy, lymphokine production and NK cell activities. Also these results suggested that EB contains potent immune stimulants, which may provide the rational basis for their therapeutic use as one of the new biological response modifiers.
This experiment was carried out to investigate the bacteriolytic action of the egg white lysozyme isolated from Korean native Ogol fowl and to obtain the data for utilization of the enzyme as a food preservative. Staphyococcus aureus phage type 29 and Bacillus subtilis ATCC 6633 among the microorganisms tested were lyzed by the treatment with 0.05% lysozyme, but Staphylococcus aureus phage type 57 in addition to E. coli etc. was found to be a lysozyme- insensitive species. The lysis of S. aureus phage type 29 was maximized when incubated in nutrient broth (pH 7.0) at $37^{\circ}C$ for 24 hours and suspended it to absorbance 0.6 at 540nm in 0.05M sodium acetate but fer (pH 4.5) and then treated it with the 0.05% lysozyme for 30 min. at $30^{\circ}C$. It was found that the effect of 0.05% lysozyme in combination with 1% glycine on the growth inhibition of S. aurecus phage type 29 increased more 50% than that in the absence of glycine, but not effect with other any additeves and metal ions tested.
Objectives : The purpose of this experiment is comparing the difference on natural killer cell activity through Korean red ginseng and Chinese red ginseng by $^{51}Cr$ release assay. Methods : Thirty rats were equally divided into a Korean red ginseng group, a Chinese red ginseng group and a control group. Korean and Chinese red ginseng were administrated to the rats at 200mg daily for a weak, while 0.9% normal saline was given to the control. Percent specific lysis (PSL) and lytic units (LU) were calculated from spleen cells by $^{51}Cr$ release assay. Results : Percent specific lysis of the Korean red ginseng group was significantly higher than that of the control in the ratio of 100:1, effector cell:target cell (p<0.05). Percent specific lysis of Korean red ginseng group was also significantly higher than that of the Chinese red ginseng group in the ratio of 25:1, effector cell:target cell (p<0.05). Chinese red ginseng showed no effect on NK cell activity. Conclusions : These findings suggest that Korean red ginseng improves immunologic function and shows superior effects than Chinese red ginseng.
The root rot of pepper (Capsicum annuum L.) caused by Phytophthora capsici is one of the most important diseases affecting this crop worldwide. This work presents the evaluation of the capacity of Streptomyces griseus H7602 to protect pepper plants against Phytophthora capsici and establishes its role as a biocontrol agent. In this study, we isolated an actinomycete strain H7602 from rhizosphere soil, identified it as Streptomyces griseus by 16S rRNA analysis and demonstrated its antifungal activity against various plant pathogens including P. capsici. H7602 produced lytic emzymes such as chitinase, ${\beta}$-1,3-glucanase, lipase and protease. In addition, crude extract from H7602 also exhibited destructive activity toward P. capsici hyphae. In the pot trial, results showed the protective effect of H7602 against pepper from P. capsici. Application of H7602 culture suspension reduced 47.35% of root mortality and enhanced growth of pepper plants for 56.37% in fresh root and 17.56% g in fresh shoot as compared to control, resulting in greater protection to pepper plants against P. capsici infestation. Additionally, the enzymatic activities, chitinase and ${\beta}$-1,3-glucanase, were higher in rhizosphere soil and roots of pepper plants treated with H7602 than other treated plants. Therefore, our results indicated a clear potential of S. griseus H7602 to be used for biocontrol of root rot disease caused by P. capsici in pepper.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.13
no.2
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pp.193-204
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1984
The enzymatic properties of the alkaline AL-protease, which had been prepared from the crude zymolyase of Arthrobzoter luteus, was investigated together with its active amino acid residue. Complete inactivaton of the proteolytic activity of AL-protease by either DFP or PMSF was simultaneously accompanied by the loss of its lytic effect on the lysis of yeast cell wall. In the reaction, AL-protease showed the pattern of inactivation to decrease very slowly, as compared to that of chymotrypsin, and that enzyme and DFP were found to react with a molar ratio of 1 : 1. The preparation of AL-protease exhibited no hydrolytic activity in any substrates of polysaccharases, playing a significant role in the lysis of yeast cell wall. The optimum pH and temperature of AL-protease was pH 10.5 and $65^{\circ}C$, respectively. It also showed stability in the pH range from 5 to 11 and at the temperature below $65^{\circ}C$. Through the identification of the amino acid residue in the active site of the $^{32}P$-diisopropylph-osphorylated(DIP) AL-protease modified specifically with $^{32}P$-labeled DFP, AL-protease was found to be a DFP-sensitive which has a mole of active serine residue involved in its proteolytic activity per mole of the enzyme.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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