Preservation of liquid semen is an important factor for breeding management in swine industry. Oxidative stress of spermatozoa during liquid preservation has a detrimental effect on sperm quality and decreases fertility. Objective of this study was to determine the effect of antioxidant, Quercetin, on capability of porcine liquid semen preservation. Freshly collected porcine semen from boars (n=3), having proven fertility was counted, diluted to $3{\times}10^7/mL$ and divided into 5 different semen extenders. Aliquots of diluted semen with different extenders were subjected to measure the pH, motility, viability and sperm DNA structure status on elapse time after preservation for 10 days. For the first 3 days, semen preserved in all 5 different extenders maintained their initial pH and either gradually decreased or increased thereafter, indicating lipid peroxidation has started. Sperm motility (r=0.52, p=0.01) and viability (r=0.55, p=0.03) had positive correlation with semen pH. Sperm motility was maintained well (p<0.05) in especially 2 extenders containing Tris and antioxidant compared to other extenders, suggesting both Tris and antioxidant worked as pH regulator and had beneficial effects on sperm characteristic during preservation. Sperm DNA structure status accessed by sperm chromatin structure assay on elapsed time after preservation, tended to be higher in semen preserved without antioxidant. Taken together, addition of antioxidant to extender prevents the sperm from oxidative stress during storage in mechanism by which antioxidant slows the lipid peroxidation, and thus reduced the reactive oxygen species in preserved porcine semen resulted in maintaining semen pH, sperm motility and viability for 7~10 days.
Park, C.S.;Kim, M.Y.;Yi, Y.J.;Chang, Y.J.;Lee, S.H.;Lee, J.J.;Kim, M.C.;Jin, D.I.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권10호
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pp.1369-1373
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2004
The percentages of sperm motility and normal acrosome on the liquid boar semen diluted and preserved at $4^{\circ}C$ with lactose hydrate, egg yolk and N-acetyl-D-glucosamine (LEN) diluent were significant differences according to preservation day and incubation time, respectively. The sperm motility steadily declined from 96.9% at 0.5 h incubation to 78.8% at 6 h incubation at 1 day of preservation. However, the sperm motility rapidly declined after 4 day of preservation during incubation. The normal acrosome steadily declined from 93.3% at 0.5 h incubation to 73.8% at 6 h incubation at 1 day of preservation. However, the normal acrosome rapidly declined after 3 day of preservation during incubation. The rates of sperm penetration and polyspermy were higher in 5 and $10{\times}10^6$ sperm/ml than in 0.2 and $1{\times}10^6$ sperm/ml. Mean numbers of sperm in penetrated oocyte were highest in $10{\times}10^6$ sperm/ml compared with other sperm concentrations. The rates of blastocysts from the cleaved oocytes (2-4 cell stage) were highest in $1{\times}10^6$sperm/ml compared with other sperm concentrations. In conclusion, we found out that liquid boar sperm stored at $4^{\circ}C$ could be used for in vitro fertilization of pig oocytes matured in vitro. Also, we recommend $1{\times}10^6$sperm/ml concentration for in vitro fertilization of pig oocytes.
The method of vitnilcation has various merits. It needs neither seeding nor slow freezing. It can freeze embryo by putting it directly into liquid nitrogen at the indoor temperature to $0^{\circ}C$. The operation process is quite easy. Moreover, higher promise of survival can be expected as there is no physical damage by any lumps of ice with the exception of cells. In Kasal's experiment (1990) using EFS liquid and Kang's experiment (1991) using GFS liquid the ratio of the damaged embryo was only 2-3%. But, the method of vitrification is now on the process of improvement, and the final or united method is not yet established. At the present time, most of the major institutes all over the world are using the traditional freezing method in the preservation of mouse embryo, but it is very likely that the vitrification will prevaIl in the near future considering the various merits of it. Calves can be begotten from the embryo by means of vitriilcated preservation in the cases of cow, rat, and rabbit as well as of mouse. In addition, recent experiments have shown that vitrificated preservation was successful in the case of drosophila embryo which was much bigger than mammalian embryo, which fact tells that this method is expected to be preferably used even in the preservation of living organs in the near future.
액체질소 보존법은 동결 건조 보존이 불가능한 것을 포함한 곰팡이를 가장 효과적으로 보존할 수 있는 방법 중의 하나로서, 유전적인 변화와 오염을 방지하고 장기보존이 가능한 이점을 가진다. 크료튜브 대신 액체질소 보존에 사용할 수 있는 폴리프로필렌 스트로는 경제성, 안전성, 편리성 그리고 공간 이용성 등의 이점을 가진다. 이에 한국농업미생물자원센터(KACC)에서는 폴리프로필렌 스트로를 이용한 곰팡이의 액체질소 보존법을 정립하였으며, 이를 상세하게 소개하였다.
This study was done to find out the preservation possibility of liquid boar semen at variabel room temperature of 9 to 16$^{\circ}C$. The percentages of sperm motility and NAR acrosome were highest in B tschwiler extender compared to B tschwiler+Hepes, Andro+Hepes and Andro extenders. The extenders with Hepes buffer showed detrimental effect for preservation of liquid boar semen. The pH of ejaculated sperm-rich fraction was 7.5. The pH of B tschwiler+Hepes, B tschwiler, Andro+Hepes and Andro extenders was 6.9, 7.5, 7.1 and 8.1, respectively. The pH of liquid boar semen with B tschwiler+Hepes, B tschwiler, Andro+Hepes and Andro extenders was 6.6, 6.9, 6.7 and 6.9 at 1st day of storage, and 5.5, 5.7, 5.6 and 5.8 at 7th day of storage, respectively. Gilts and sows were inseminated twice with liquid boar semen stored at 9~16$^{\circ}C$ in B tschwiler extender for 3~4 days. Farrowing rate, litter size and average pig weight at birth between AI and natural service did not differ significantly in gilt and sow, respectively. However, sow showed higher farrowing rate and litter size compared to gilt both in AI and in natural service. As a result of this study, we found out that liquid boar semen can be stored for 5~7 days at uncontrolled room temperature of 9~16$^{\circ}C$ in B tschwiler extender.
During storage, boar spermatozoa undergo several changes including diminished motility and viability and accumulated reactive oxygen species (ROS). In this study, we investigated the effects of green tea extract (GTE) supplementation in the Sui Dil extender on the sperm motility, viability, ROS and lipid peroxidation (LPO) of long-term preserved boar semen at $17^{\circ}C$. A total number of eight boars were used for this experiment. Pooled ejaculates were diluted to $20{\times}10^6sperm/ml$ in the Sui Dil extender containing 0 (control), 1, 10, 100 or 500 mg/l GTE and were preserved at $17^{\circ}C$ for 24, 72, 120 and 168 h, respectively. At each storage time, sperm motility and viability were estimated by microscopic examination and the fluorescent double stain $Fertilight^{(R)}$, respectively. Sperm ROS level and LPO were assessed using the 2', 7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate ($H_2DCFDA$)/propidium iodide (PI) and C11-BODIPY581/591/PI with flow cytometry, respectively. Compared to that of the 500 mg group, there were higher sperm motility and viability in the 1, 10 and 100 mg GTE groups during the preservation from 24 to 168 h (p < 0.05). The ROS levels of the 10 and 100 mg groups during the 168 h preservation were lower than those of the 0, 1 and 500 mg groups (p < 0.05). There were no significant differences in LPO regardless of the preservation period or the GTE concentration. In conclusion, the optimal concentrations (10 and 100 mg/l) of GTE that led to lower ROS levels may be useful for liquid boar sperm preservation at $17^{\circ}C$ for a period of 168 h.
냉동 저장온도에서 비동결 상태로 액란을 저장할 수 있는 방법을 연구하기 위하여 cryoprotectants를 첨가하거나 papain으로 처리하여 $-15^{\circ}C$에서 저장하면서 품질변화를 조사한 결과는 다음과 같다. Cryoprotectants로는 제품의 향미를 고려하여 fructose와 glucose를 45 : 55로 혼합하여 사용하는 것이 좋고, whole egg나 난황을 $-15^{\circ}C$에서 비동결 상태로 저장하는데 필요한 cryoprotectants의 농도는 각각 70.3%와 45.2%이었다. 그리고 액란에 cryoprotectants를 첨가하여 저장하면 gel화를 효과적으로 방지할수 있었으며, gel화가 발생한 액란에서는 consistency의 증가, 단백질 침전도의 증가 및 미세구조의 파괴를 볼수 있었다. 액란에 0.15%.papain을 처리한 후 냉동온도에서 저장하면 액란의 gel화를 상당히 방지할 수 있었다.
Garole is a prolific, rare, less known and small size Indian sheep breed found in low and humid Sunderban region of West Bengal. Although information on stored Garole ram liquid semen upto 24 h is available, but there is a need to further investigate the short-term and long-term preservability of Garole ram semen for extensive utilization of this valuable germplasm by artificial insemination. The aim of the present study was to apply computer-assisted sperm analysis technique for assessing the motion characteristics of Garole ram semen stored (i) in liquid state at refrigeration temperature for short-term preservation upto 48 h and (ii) in frozen state at $-196^{\circ}C$ for long-term preservation after packaging in mini straws. Short-term preservation had a significant effect on motility (p<0.01) as the motility progressively decreased from 90.1% at 0 h to 85.5% and 73.2% after 24 and 48 h of storage, respectively. Although the decline in rapid moving sperms was also significant (p<0.01) on storage but the decrease was more pronounced at 48 h as compared to 24 h of storage period. Storage of chilled semen had also a significant effect on % linearity (p<0.05), % straightness (p<0.01), sperm velocities (p<0.01), amplitude of lateral head displacement (p<0.01) and beat frequency (pO.Ol) of spermatozoa. The replication had a significant effect for all the variables except average path and straight line velocity. However, the interactions of short-term storage and replication were non-significant for most of the variables except % of medium moving sperms, sperm velocities and beat frequency. On long-term preservation of Garole ram spermatozoa under controlled conditions the mean post-thaw recovery of 70.4 and 71.4% motile spermatozoa was achieved having 48.8 and 48.9% of rapidly motile spermatozoa, respectively in both the replicates. The effect of replication on cryopreservation was significant (p<0.05) on amplitude of lateral head displacement and beat frequency, but there was no significant effect on motility, rapidly motile spermatozoa, linearity, straightness and sperm velocities of frozen-thawed spermatozoa. It can be concluded from these results that an average 70% motility can be achieved on storage of Garole ram semen in chilled liquid state upto 48 h or in liquid nitrogen after freezing under controlled conditions in straws. However, further studies are required to evaluate the fertility of short-term and long-term preserved Garole ram semen for extensive use of this prolific sheep breed.
Dairy products, including milk, cheese, cream, yogurt, and butter, constitute excellent sources of essential nutrients such as calcium, proteins, and vitamin D; therefore, nutritionists recommend a constant daily dietary intake of dairy products. Packaging is an important feature that ensures high-quality products are delivered to consumers; different packaging materials and forms are required depending on the products. Packaging forms include pouches for butter, cheese, and milk powder; cartons for liquid, frozen, and coagulated milk; packets for pasteurized liquid milk; bottles for milkshakes and other liquid products; and cups for frozen and coagulated products. The increase in mobile lifestyles among consumers will lead to smaller households and greater preference for convenience, which will promote individual and smaller packaging for dairy products. This article reviews the development of packaging materials and forms, packaging requirements, and future considerations for the packaging of dairy products.
In order to fad out an efficient way of topdressing nitrogen fertilizer in mulch-cropping system of onion(Allium cepa L.), solid, slow-release, and liquid forms of nitrogen fertilizers were allied to cv. 'Changnyungdaego' various number of times at different time, with 5 topdress applications of solid fertilizer serving as a control. Whole basal application of conventional solid fertilizer and 2 slow-release fertilizers were labor-saving and showed improved storage quality of bulbs, but resulted in poor plant growth and considerably low yield due to fertilizer shortage from early April. This suggests that topdress application is necessary. Liquid form of nitrogen fertilizer was more effective for plant growth and yield and saving labor than the solid form. Early applications was effective for increasing yield and storage quality of onion bulbs harvested. Thus two applications of liquid form of nitrogen fertilizer in February and March at rome month interval are recommended in mulch crowing system of onion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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