This study was conducted to identify lily species native to Korea from formosan lily (Lilium formosanum) belonging to Longiflorum section. Due to flowering time, flower color and orientation, long shelf life and resistant to diseases, the native lily species can be valuable genetic resources for interspecific hybrids. One of the chloroplast genes, matK, was used to clone and sequence to explore any base changes. The matK was successfully amplified into 1,539 bp (94% of the gene) and phylogenetic tree demonstrated 6 clades for those 11 lily species used in this study. There were one or two base substitutions among 10 lilies native to Korea, while formosan lily native to Taiwan exhibited 6 base substitutions in matK gene, rendering it genetically distant. A restriction enzyme NruI recognized one of the six base changes, and digested the matK gene of 10 native lily species only, but not in formosan lily. The confirmed cleavage characteristic of the target region in matK gene was designed into a CAPS (cleaved amplified polymorphic sequences) marker which will be available to estimate compatibility of interspecific hybridization and to trace the pedigree when those native lilies are crossed with the formosan lily.
The Lily mottle virus (LMoV) impedes the growth and quality of lily crops in Lanzhou, China. Recently Arabis mosaic virus (ArMV) has been detected in LMoV-infected plants in this region, causing plant stunting as well as severe foliar symptoms, and likely posing a threat to lily production. Consequently, there is a need to develop simple, sensitive, and reliable detection methods for these two viruses to prevent them from spreading. Reverse transcription (RT) loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assays have been developed to detect LMoV and ArMV using two primer pairs that match six conserved sequences of LMoV and ArMV coat proteins, respectively. RT-LAMP assay results were visually assessed in reaction tubes using green fluorescence and gel electrophoresis. Our assays successfully detected both LMoV and ArMV in lily plants without the occurrence of viral cross-reactivity from other lily viruses. Optimal conditions for LAMP reactions were 65℃ and 60℃ for 60 min for LMoV and ArMV, respectively. Detection sensitivity for both RT-LAMP assays was a hundredfold greater than that of our comparative RT-polymerase chain reaction assays. We have also found this relatively rapid, target specific and sensitive method can also be used for samples collected in the field and may be especially useful in regions with limited or no laboratory facilities.
이 연구는 고랭지 나리에서 발생하는 바이러스의 병징, 종류 및 계통별 방병률을 조사 분석하고 효과적인 검정방법을 개발하고자 수행하였다. 고랭지 나리에서 발생하는 바이러스의 병징은 모자이크, 축엽, 퇴록반점, 줄무의, 라인패턴을 나타내었으며, 증상별 분포는 모자이크가 43.8%, 축엽이 29.2%, 퇴록반점이 10.9%였다. 바이러스 종류별로는 Lily symptomless virus(LSV), Cucumber mosaic virus(CMV), Lily mottle virus(LMoV) 등 6가지 바이러스가 전자현미경으로 검정되었다. 지역별로는 강릉(왕산)이 대관령보다 바이러스 이병률이 높았으며, 계통별 바이러스 이병률은 오리엔탈 계통(카사블랑카, 마르코폴로)이 아시아틱 계통(솔레미오, 플라토)보다 2~4배 높았다. 바이러스 진단방법으로는 기존의 PT-PCR보다 개선된 one-step RT-PCR 검정이 시간을 줄이면서 민감도가 뛰어나 가장 효과적이었다.
소맥분에 백합 구근분말을 첨가한 물리적 특성은 백합 구근분말 첨가 비율이 증가할수록 farinogram에서 탄력도는 증가하는 경향이었으나, 점탄성, 흡수율, 흡수 시간 및 안정도는 3%이상 첨가 시 증가 후 감소하는 경향을 보였다. Rapid viscoanalyzer(RVA)에서 유지 강도, 최종점도, breakdown, setback 값, alveogram의 $P_{max}$값과 falling number 값은 감소하였다. 소맥분에 백합 구근의 첨가량과 입도 차에 의한 호화도 특성에서 초기 호화온도는 일반 분쇄 및 미분쇄($10\;{\mu}m$) 백합 구근분말의 종류와 양에 관계없이 영향을 미치지 않았다. Rheofermentometer로 측정한 gaseous release는 전체 $CO_2$ 가스 발생량과 보유량이 감소하였다. 기호도 검사에서는 백합 구근분말의 입도와 첨가 비율에 따른 식빵의 가공적성에서 식감, 향미, 맛에서 유의적인 차이가 나타났으며, 촉감과 크럼 색상은 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났다. 한편 식빵의 가공 적성에서 일반 분쇄 3%와 초미분쇄 3% 첨가군이 양호하였으나, 종합적인 평가에서는 대조구 다음으로 미분쇄 백합 구근분말 3% 첨가군에서 우수하였다. 이미 백합 구근의 항산화 활성 등 생리활성은 검증되어져 발표되어 있는 만큼 제빵 가공에서 조직감의 문제를 보완하고 개선한다면 건강 기능성 제빵으로 상품화 가치가 있다고 생각된다.
본 연구는 우리나라 전통 참나리중 본 연구에서는 경남 진주시에서 선발한 참나리 변이체의 생장과 형태적 특성, 그리고 배수체 검사와 virus 검정 등을 실시하여, 기존 참나리 품종과는 다른 자가결실성 2배체 품종으로 선발하여 조경지피용 소재 및 나리속 식물의 육종시 유전자원으로 이용할 수 있는 기초자료로 이용하고자 하였으며, 얻어진 결과는 다음과 같다. 선발된 자가결실 참나리 2배체 품종의 생육형은 고성형으로 자생 3배체 품종과 동일하였고 주아도 공히 형성하였다. 꽃의 형태적 특성 및 잎의 형태적 특성등은 큰 차이를 보이지 않은 반면 주아의 크기 및 구근의 크기에서는 큰 차이를 보여 품종간 차이를 나타내었다. 자가결실율에서는 자가결실성 2배체 품종의 경우 착과율이 72.6%로 높은 결실율을 보인 반면 자생 3배체 품종은 0%로 자가 불화합성을 보였다. 또한 염색체 조사결과 자가결실 품종의 경우 염색체수가 26개로서 x = 13의 2배체 품종으로 확인되었으며 자생 참나리의 경우 염색체 수가 39개로서 3배체 품종임이 증명되었다. 선발된 자가 결실성 품종의 경우 후대검정을 실시한 결과 생육 특성 및 형태적 특성, 그리고 결실 습성까지 모본과 동일하여 모본의 특성이 후대에도 유전되는 것을 증명할 수 있었고 염색체 조사결과 2n = 26으로 2배체임이 증명되었다. 자가 결실성 참나리 2배체 품종의 화분발아력을 조사한 결과 모본의 화분발아력이 58%로 양호하였으며 종자 및 주아로 번식된 3년생 식물체와 2년생 식물체 공히 화분발아력이 50% 이상으로 나타났다. 그러나 자생 참나리의 화분발아력은 0%로 전혀 발아가 되지 않았다.
Three isolates of Cucumber mosaic virus (CMV) from lily plants showing mosaic and distortion symptoms were detected by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) using primers specific to Cucumovirus genus namely, LK-CMV, LK4-CMV, and LKS-CMV. Restriction enzymes patterns of the RT-PCR products revealed that the lily isolates belonged to subgroup IA of CMV. In terms of biological properties, the lily isolates have highly similar but distinct pathogenicity as reported in other lily strains and ordinary strains of CMV. To characterize the molecular properties, cDNAs containing coat protein (CP) gene and 3' non-coding region (NCR) of RNA3 for the isolates were cloned and their nucleotide sequences were determined. The CP similarity (218 amino acids) was highly homologous (>97%) with that of subgroup I CMV strains. However, an additional 20-nulcleotide long segment was only present in 3' NCR of lily isolates, which form an additional stem-loop RNA structure. By using chimeric construct exchange cDNA containing 3'NCR of LK-CMV into the full-length cDNA clone of RNA3 of Fny-CMV, this additional segment may prove to be significant in the identification and fitness of the virus in lily plants. The pathology of zucchini squash infected by F1F2L3-CMV, a pseudorecombinant virus was showed to change drastically the severe mosaic and stunting symptom into a mild chlorotic spot on systemic leave, compared with Fny-CMV. To delimit the sequence of RNA3 affected the pathology, various RNA3 chimeras were constructed between two strains of CMV. The symptom determinants of F1F2L3-CMV were mapped to the positions amino acid 234, 239, and 250 in 3a movement protein (MP). RNA3 chimeras changed the sequences encoding three amino acids were resulted in alteration of systemic symptom.
Park, Seung-Kook;Park, Sun-Hee;Yoon, Ju-Yeon;Park, Jang-Kyung;Ryu, Ki-Hyun
The Plant Pathology Journal
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제19권4호
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pp.210-216
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2003
This study examined the existence of genetically diverse population of Cucumber mosaic virus (CMV), known as quasispecies, from lily, Nicotiana benthamiana and from purified virions. Based on the conserved sequences of CMV lily isolates in intergenic region (IR) on RNA3, the genetic variation of IR from three different sources was investigated by a specific restriction endonuclease hydrolysis of amplified reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) products using virus-specific primers, and was compared with IR sequences. The IR nucleotide sequences of CMV lily isolates were highly conserved, however, quasispecies was detected from all three sources in low level, containing sub-populations of RNA3. These subpopulations of RNA3 were inoculated onto zucchini squash by in vitro transcripts from corresponding full-length cDNA clones together with Eny RNA1 and 2 transcripts. The systemic symptom of zucchini plants infected by these quasispecies was chlorotic spotting, which was milder than severe mosaic and stunt symptom caused by Eny-CMV. The severity of symptom was correlated with RNA accumulation of viruses. These results suggest that the genome of CMV lily isolates consists of quasispecies populations.
Stem rot symptomof lily caused by Phytophthora was observed in Chilkok, Korea in 1997. Oogonia of Phytophthora were abundantly developed on epidermal tissues of stem and leaves of the diseased plants. The casual fungus was identified as Phytophthora cactorum based on their cultural and morphological characteristics. Sporangia were markedly papillate and the shape was broadly spherical to ovoid both on agar and in water. The size was 28~44$\times$20~28 ${\mu}{\textrm}{m}$ (av. 36~24) and a short pedicel was attached to each sporangium. The fungus was homothallic and oogonia were 28~32 ${\mu}{\textrm}{m}$ (av. 30) in size and slightly yellow. Antheridia were paragynous and spherical or irregularly club shaped. Optimal temperature for mycelial growth was 25~27$^{\circ}C$. The fungus did not grow under 6$^{\circ}C$ and over 34$^{\circ}C$. The fungus was highly pathogenic to three cultivars of lily. Symptom was developed at 4-day after artificial inoculation with zoospores (103 cell/ml) on the stem of lily. The symptom was identical to those produced by natural infection in the field and the plant was blighted within 14 days after inoculation.
Kim, Jin Ha;Yoo, Ha Na;Bae, Eun Hye;Jung, Yong-Tae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권12호
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pp.1776-1781
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2012
Multiple viruses such as Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV), and cucumber mosaic virus (CMV) are the most prevalent viruses infecting lilies in Korea. Leaf samples and bulbs showing characteristic symptoms of virus infection were collected from Gangwon, Chungnam, and Jeju provinces of Korea in 2008-2011. Coat protein (CP) genes of LSV and LMoV were amplified from collected samples by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and cloned into a pET21d(+) expression vector to generate recombinant CPs. The resulting carboxy-terminal His-tagged CPs were expressed in Escherichia coli strain BL21(DE3) by isopropyl-1-thio-${\beta}$-D-galactoside induction. The recombinant proteins were purified using Ni-NTA agarose beads, and the purified proteins were used as an immunogen to produce polyclonal antibodies in rabbits. The resulting polyclonal antisera recognized specifically LSV and LMoV from infected plant tissues in Western blotting assays. Indirect enzymelinked immunosorbent assay and immunocapture RT-PCR using these polyclonal antisera were developed for the sensitive, efficient, economic, and rapid detection of Lily viruses. These results suggest that large-scale bulb tests and economic detection of Lily viruses in epidemiological studies can be performed routinely using these polyclonal antisera.
Lee, Ja Hee;Choi, So Young;Park, Hye Min;Oh, Sang Im;Lee, Ae Kyung
인간식물환경학회지
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제22권3호
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pp.233-239
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2019
This study was conducted in order to predict the vase life of cut lily 'Woori Tower' flowers using a non-destructive thermal imaging technique. It was found that the temperature of cut lily flowers was maintained at 20℃ and was slightly lower than the air temperature until they bloomed. On the 11th day, when flowers bloomed, the temperature of leaves and flowers was measured to be 18.75±0.38℃ and 19.23±0.32℃ respectively, and their difference with ambient temperature was over 3℃. The flower temperature increased slightly when the vase life of cut lily flowers ended, and the temperature difference between the air and leaf temperature (1.77℃) and between the air and flower temperature (1.39℃) got smaller. No visible aging symptom was observed, but it was found that the temperature had risen due to water losses and less functional stomata. The vase life of cut lily flowers can be predicted based on changes in temperature and it will be also possible to predict the potential quality and vase life of cut flowers before harvesting them in greenhouses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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