This study was performed to find out the optimal larval stage among trochophore, D-shaped and umbo stage larvae and the desirable protective additive such as fructose, glucose, sucrose and trehalose with cryoprotectant for cryopreservation of surf clam, Spisula sachalinensis larvae. Dimethyl sulfoxide and ethylene glycol were used as cryoprotectant and each cryoprotectant was made to 2.0 M with previous protective additives. The larvae were immersed in the preparations waited for 15 minutes to reach equilibration, and then frozen in a program freezer (-35$^{\circ}C$) and liquid nitrogen (-196$^{\circ}C$). The freezing rate of 1.0$^{\circ}C$ /min. was used for cryopreservation of trochophores before seeding temperature (-12$^{\circ}C$). The survival rate of frozen-thawed larvae increased as larval developing and that of umbo stage larvae was the highest as 96.1 ${\pm}$ 1.0%. The presence of lower concentration of disaccharides as sucrose or trehalose significantly enhanced survival rate when mixed with cryoprotectants (P<0.05). The results of our study indicate that desirable developmental stages of larvae and protective additive for cryopreservation are the umbo stage larvae and 0.2 M sucrose, respectively.
유생의 발달크기에 따라 미세조류 12종에 대하여 섭취 가능성을 조사한 결과 유생의 크기에 따라 섭취 가능한 미세조류는 많은 차이를 보였다. 전체 유생크기에서 I. galban, I. aff. galbana, P. lutheri, C. ellipsoidea, N. oculata는 94.2-99.7%의 섭취율를 보였고, C. calcitrans, C. gracilis, C. simplex는 평균 각장 $189.3{\pm}13.8{\mu}m$ 크기인 중형 각 정기 이후 90.0% 이상의 섭취율을 보였다. P. triconutum, D. tertiolecta, T. tetrathele는 평균 각장 $65.0-100.0{\mu}m$의 D형 유생은 섭취가 관찰되지 않았지만, 이후 유생에서는 각각 97.3-99.7%, 43.3-99.3%, 48.5-99.3% 섭취하였다. 그러나 T. weissflogii는 평균 각장 $306.2{\pm}14.7{\mu}m$ 이상에서 1.0-1.7%의 섭취율을 보였지만, 전체 유생기동안 그의 섭취가 되지 않았다. 이상의 결과를 이용해 전체 50.0% 이상 섭취 가능한 먹이생물의 세포크기를 조사한 결과, 평균 각장 $102.3{\mu}m$ 이하의 D형 단계는 장축과 단축 모두 $4.6{\mu}m$ 이하, $158.3{\mu}m$ 미만에서는 장축기준으로 $9.3{\mu}m$ 미만까지 섭취가 가능하고, $158.3{\mu}m$ 이상 크기는 단축 기준 $9.3{\mu}m$까지 섭취가 가능한 것으로 나타났다. 전제 유생기 동안 장축과 단축을 포함해서 $10.0{\mu}m$ 이상은 섭취가 되지 않았다.
Caenorhabditis elegans (C. elegans) utilizes two different cell-cycle modes, binucleations during the L1 larval stage and endoreduplications at four larval moltings, for its postembryonic intestinal development. Previous genetic studies indicated that CDC-25.2 is specifically required for binucleations at the L1 larval stage and is repressed before endoreduplications. Furthermore, LIN-23, the C. elegans ${\beta}$-TrCP ortholog, appears to function as a repressor of CDC-25.2 to prevent excess intestinal divisions. We previously reported that intestinal hyperplasia in lin-23(e1883) mutants was effectively suppressed by the RNAi depletion of cdc-25.2. Nevertheless, LIN-23 targeting CDC-25.2 for ubiquitination as a component of E3 ubiquitin ligase has not yet been tested. In this study, LIN-23 is shown to be the major E3 ubiquitin ligase component, recognizing CDC-25.2 to repress their activities for proper transition of cell-cycle modes during the C. elegans postembryonic intestinal development. In addition, for the first time that LIN-23 physically interacts with both CDC-25.1 and CDC-25.2 and facilitates ubiquitination for timely regulation of their activities during the intestinal development.
배추흰나비의 변태에 따른 esterase의 활성변화 및 zymogram pattern의 변화를 조사하였으며 5령말 유충으로부터 3개의 esterase를 순수 분리하였다. Esterase의 활성은 5령초에서 5령말에 이르는 동안 급격히 증가하여 5령말에서 최대의 활성이 나타났으며 전기영동의 결과 whole body와 중장내 esterase band의 수나 강도는 5령말에서 최대로 나타났다. Gel filtration과 ion-exchange chromatography 및 preparative electorphoresis를 통해 정제된 각 esterase의 최종순도는 약 30-60배였다.
Intake of caffeine during pregnancy can cause retardation of fetal development. Although the significant influence of caffeine on animal development is widely recognized, much remains unknown about its mode of action because of its pleiotropic effects on living organisms. In the present study, by using Caenorhabditis elegans as a model organism, the effects of caffeine on development were examined. Brood size, embryonic lethality, and percent larval development were investigated, and caffeine was found to inhibit the development of C. elegans at most of the stages in a dosage-dependent fashion. Upon treatment with 30 mM caffeine, the majority ($86.1{\pm}3.4%$) of the L1 larvae were irreversibly arrested without further development. In contrast, many of the late-stage larvae survived and grew to adults when exposed to the same 30 mM caffeine. These results suggest that early-stage larvae are more susceptible to caffeine than later-stage larvae. To understand the metabolic responses to caffeine treatment, the levels of expression of cytochrome P450 (cyp) genes were examined with or without caffeine treatment using comparative microarray, and it was found that the expression of 24 cyp genes was increased by more than 2-fold (p < 0.05). Among them, induction of the cyp-35A gene family was the most prominent. Interestingly, depletion of the cyp-35A family genes one-by-one or in combination through RNA interference resulted in partial rescue from early larval developmental arrest caused by caffeine treatment, suggesting that the high-level induction of cyp-35A family genes can be fatal to the development of early-stage larvae.
The larval stages of Pilumnopeus granulata and the megalopal stage of Pilumnus minutus are described in detail. Comparisons are made with the known larvae of other species of the pilumnid genera, and the provisional key is provided for the pilumnid zoeae. The brachyuran genera Heteropanope, Heteropilumnus, Actumnus, Pilumonopeus, Pilumnus, Parapilumnus, and Benthopanpe are clearly classified on the basis of the zoeal characteristics, such as the lateral carapace spine, dorsal carapace spine, maxillule, and abominal lateral knobs.
The larval stage of Ceraclea labulata (Martynov) is described for the first time. The larva can be distinguished from other known larvae of Korean Ceraclea by the absence of head marking and by the shape of frontoclypeus, which is equal in anterior and posterior width. The larval case is also described. Line-drawings of key characters and discussion on Korean Ceraclea are provided.
The fat bodies of cabbage worm (Pieris rapae) and silk worm (Bomyx mori) during metamorphosis was comparatively studied by electron microscope. 1. Cell oranelles: Golgi apparatus were not observed in both species. It is observed that RER of cabbage worms initiate to degenerate in prepupa stage with complete degeneration at adult stage, while that of silk worms shows similar degenerative pattern. However, mitochondria of cabbage worms are transformed into autophagic vacuole from prepupa stage until adult stage whereas those of silk worm shows a decrease in number in prepupa stage but maintains a certain level until adult stage. 2. Storage substance in cell: Lipid droplets in cabbage worms were observed to increase in numbers during larval stage but afterward decrease in number with an enlargement in size. However immediately after their pupal stage, they almost disappear. On the contrary lipid droplets in silk worms show rather increase in number until adult stage. Protein storage granules in bothspecies were arised from autophagic vacuoles(lysosome) . Fat cells of cabbage worm in adult stage turn out to be residual bodies which last until final stage, but those of silk worm rapidly decrease. Glycogen particles in both species reach maximum at last larval instar and thee gradually decrease thereafter. 3. Fat body sheath: The average width of fat body sheath was measured to be $0.2{\mu}m$ and $0.6{\mu}m$ and surface of fat cells adjacent to fat body sheath in silk worm is heavily infolded.
실험에 사용한 성숙한 난소를 가진 산모양깔깔새우 (Metapenaeopsis dalei)는 1999년 8월 11일 충남 외연도 근해에서 새우조망을 이용하여 채집하였다. 산란한 유생을 4개의 염분구간과 3개의 수온구간 및 5개의 다른 먹이 조건에서 사육하여 이들의 생존율과 성장률을 비교하였다. 염분조건에서는 채집지의 염분과 유사한 30과 35에서 생존율이 높았고, 수온 조건에서는 산란 수온$24^{\circ}C$에서 생존율이 가장 높았다. 먹이 조건 실험에서는 식물성먹이에서 생존율과 성장이 동물성을 투여한 실험구보다 높았다.
The effects of acute acid stress on hatching success and hatching period of laboratory-reared hermaphroditic fish Rivulus marmoratus were examined. The effects of acute acid toxicity on mortality was also determined in three life stages of this fish. There was a significant negative effect of acid stress on hatching performance in the R. marmoratus embryos. The hatching success was only 5% at pH 3.5 compared to over 78% at pH higher than 4.0. The hatching period was also delayed by low pH treatments. The larval and juvenile stages were more sensitive to acid toxicity on mortality than the adult stage, but larvae and juveniles showed similar sensitivity. The 96-h LC50 value was pH 3.8 in larval and juvenile stages and pH 3.3 in adult stage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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