A blue laccase was purified from a white rot fungus of Trametes trogii, which was a monomeric protein of 64 kDa as determined by SDS-PAGE. The enzyme acted optimally at a pH of 2.2 to 4.5 and a temperature of 70℃ and showed high thermal stability, with a half-life of 1.6 h at 60℃. A broad range of substrates, including the non-phenolic azo dye methyl red, was oxidized by the laccase, and the laccase exhibited high affinity towards ABTS and syringaldazine. Moreover, the laccase was fairly metal-tolerant. A high-molecular-weight kraft lignin was effectively polymerized by the laccase, with a maximum of 6.4-fold increase in weight-average molecular weight, as demonstrated by gel permeation chromatography. Notable structural changes in the polymerized lignin were detected by Fourier transform infrared spectroscopy and 1H NMR spectroscopy. This revealed an increase in condensed structures as well as carbonyl and aliphatic hydroxyl groups. Simultaneously, phenolic hydroxyl and methoxy groups decreased. These results suggested the potential use of the laccase in lignin modification.
Kraft pulping of Trema orientalis (Nalita) was studied in order to find kinetic data for delignification. Pulping runs were carried out in the temperature range of $160-180\;^{\circ}C$ under constant and well-defined conditions. The delignification was found to be first order with respect to residual lignin and was chemically controlled. The rate of delignification reaction was increased 1.11-1.23 for $10\;^{\circ}C$ temperature increase in the range of $160-180\;^{\circ}C$ range. A mean value of 93% of lignin was removed at the transition between bulk and residual delignification. The influence of cooking temperature on the rate constant was expressed by an Arrhenius-type equation. The obtained activation energy of the delignification reaction was 6,164 cal/mol. The transition point between bulk and residual phase was shifted to lower lignin and carbohydrate yield with the increase of temperature.
Studies of the effectiveness of anthraquinone (AQ) in kraft-AQ pulping in terms of its mechanism of mass transfer have been conducted. Experiments performed have demonstrated an 'apparent solubility' of AQ in caustic solutions of wood lignin. The adsorption behavior of AQ species was also analyzed. Anthraquinone-2-sulfonic acid (AQ-S), a water-soluble derivative of AQ, showed selective adsorption on wood. A mechanism for the transport of AQ into wood chips during kraft pulping are proposed, and some explanations for previously unexplained observations are addressed.
Wastewater containing kraft lignin (KL) discharged from pulp and paper industries could cause serious environmental contamination. Appropriate effluent treatment is required to reduce the pollution. Investigations on anaerobic bacteria capable of degrading KL are beneficial to both lignin removal and biofuel regeneration from the effluent. In this paper, an anaerobic strain capable of degrading KL was isolated from the sludge of a pulp and paper mill and identified as Dysgonomonas sp. WJDL-Y1 by 16S rRNA analysis. Optimum conditions for KL degradation by strain WJDL-Y1 were obtained at initial pH of 6.8, C:N ratio of 6 and temperature of 33℃, based on statistical analyses by response surface methodology. For a 1.2 g/l KL solution, a COD removal rate of 20.7% concomitant with biomass increase of 17.6% was achieved after 4 days of incubation under the optimum conditions. After the treatment by strain WJDL-Y1, KL was modified and degraded.
Kraft oak lignin and ricestraw lignin from acetosolve pulping were dissolved in 50/50 mixture of tetralin/m-cresol solvent. The dissolved lignin was reacted in the pressurized autoclave which was operating at $350{\sim}500^{\circ}C$ of reaction temperature and 10~20 atms of reaction pressure respectively_Hydrogen pressure of 60~80kg/$cm^2$ was exercising into the pressurized autoclave reactor to create thermochemical hydrogenolysis reaction. It was identified by GLC, GC-MS and HPLC that the alkyl-aryl-${\beta}$-O-4 ether bond of lignin was cleaved and degraded into various smaller molecules of aromatic compound such as phenols and cresols under the reaction conditions around $300^{\circ}C$ and 10 atms of reaction temoerature and pressure. Hydrogenolysis reaction of lignin compound which was done above $500^{\circ}C$ of reaction temperature and 20 atms of reaction pressure showed that the amount of aromatic compound such as phenols and cresols degraded from reactant lignin was decreasing with newly present and increasing water out of product mixtures. It was supposed that new aliphatic compound of high molecular weight hydrocarbon is composed due to higher reaction temperature and pressure of hydrogenolysis reaction such as $500^{\circ}C$ and 20 atms, even though it was almost impossible, to identify what kind of degraded products it was by HPLC.
식물계 바이오매스는 석유로부터 얻어지는 화학물질들을 대체할 수 있는 물질로 제안되고 있다. 특히 식물계 바이오매스의 15-30%를 이루고 있는 리그닌은 복잡한 방향족 중합체로 이루어져 있어, 리그닌의 저분자화 공정에 의해 다양한 방향족 화합물을 얻을 수 있다. 본 연구에서는 국내에서 가장 많이 배출되는 크래프트 리그닌을 출발 물질로 선정하고, $^{13}C$-Muclear Magnetic Resonance($^{13}C$-NMR), Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FT-IR), Elemental Analysis(EA)을 통해 원료물질의 화학적 구조를 분석하였다. 크래프트 리그닌의 저분자화 는 물-페놀 혼합 용매의 근임계 영역에서 수행되었으며, tube bomb reactor를 사용하였다. 최적의 반응조건을 찾기 위해 물-페놀의 비율, 반응온도($300-400^{\circ}C$)를 변화시키며 실험을 수행하였다. 또한 기체상 수소를 대신하여 수소발생 용매인 formic acid 사용에 따른 영향을 조사하였다. 액상 생성물의 화학 종류 및 양은 GC-MS를 통해 분석하였고, 고체 잔류물(char)은 FT-IR을 통해 분석하였다. GC-MS 분석 결과 페놀이 첨가된 경우 anisole, o-cresol(2-methylphenol), p-cresol(4-methylphenol), 2-ethylphenol, 4-ethylphenol, dibenzofuran, 3-methyl cabazole, xanthene이 생성되는 것을 확인하였다.
The enzymatic isolation of residual lignins obtained from spruce and beech pulps (obtained by sulfite, kraft, ASAM and soda/AQ/MeOH pulping processes) and their characterization was described in previous publications. Here, the residual lignins have been submitted to potassium permanganate oxidation (KMnO4 degradation), and 9 aromatic carboxylic acids (3 of them are dimeric) were identified after methylation with diazomethane by GC/MS. The analytical challenge during qantification by the internal standard methods was the partly high protein content of the samples, which resulted in elevated anisic acid yields in the degradation mixture of sulfite residual lignins. The results are compared with the KMnO4 degradation of the corresponding MWLs and discussed in terms of S/G ratios and degrees of condensation. The latter was calculated as a quotient between the aromatic carboxylic acids derived from condensed and non-condensed lignin structures. Typical degradation patterns for the various processes have been observed. Among other parameter, the relative compositions between iso-hemipinic acid (which is for condensation in pos. 5 of the aromatic ring) and meta-hemipinic acid and 3,4,5-trimethoxyphthalic acid (both are for condensation in pos. 6 of the aromatic ring) was found to be process specific. Kraft and soda/AQ/MeOH residual lignins yielded higher amounts of iso-hemipinic acid. In contrast, the relative yields of meta-hemipinic acid and 3,4,5-trimethoxyphthalic acid (the latter in beech lignins) are higher in sulfite and particularly in ASAM residual lignin. In case of beech residual lignins the amount of acids originated from non-condensed syringyl type lignin units was surprisingly high. The condensation degree of residual lignins was shown to be generally higher than that of MWLs. This was especially true for the G units. ASAM residual lignin exhibited very high S/G ratios and degrees of polymerization. Causality between condensation degree and total yield of degradation products was demonstrated.
Two important steps in utilizing technical kraft lignin (KL) from black liquor to synthesize lignin-phenol-formaldehyde (LPF) resin are its extraction via precipitation and fractionation. However, the effects of precipitation pH and acetone fractionation on the characteristics of hardwood KL have not been studied for LPF resins. Therefore, this paper reports the effects of the precipitation pH of black liquor and acetone fractionation on the characteristics of KL from mixed hardwood species for LPF resins. The precipitation was conducted at various pH levels from 3 to 9 of black liquor to obtain crude KL (C-KL), which was used in acetone fractionation to produce acetone-soluble KL (AS-KL) and acetone-insoluble KL (AI-KL). Precipitation at pH 3 and 9 produced the highest and lowest yields of C-KL, respectively. As expected, the C-KL infrared spectra were similar regardless of the precipitation pH levels. As the pH increased, the molecular weight of C-KL increased. However, the molecular weight of AS-KL and AI-KL after acetone fractionation increased to a maximum of 4,170 and 47,190 g/mol at pH 7, then decreased to 3,210 and 19,970 g/mol at pH 9, respectively. The smallest molecular weights of AS-KL and AI-KL were 3,210 and 15,480 g/mol and were found at pH 9 and 3, respectively. These results suggest that both AS-KL at pH 9 and AI-KL at pH 3 have good potential as starting lignins for synthesizing LPF resins that require cross-linking for polymerization.
액화목재는 목재 및 목질계 자원으로부터 신소재 개발을 위한 새로운 유효이용법의 하나이다. 이 액화목재의 주요 성분변화를 조사하기 위한 실험으로서 액화 전후의 리그닌의 구조적 변화를 알기 위하여 잣나무 KP리그닌과 리그닌설포산을 액화시켜서 유기용매로 분리하고, IR, 1H(13C)-NMR, GC-MS분석기기로 분석하였다. 액화리그닌 중에는 다수의 페놀성 물질들 즉, diguaiacol, acetic acid phenyl ester, phenol, 1-phenyl ethanone 등이 분석되었다.
As an alternative method to solve air pollution problem and difficulty of pulp bleaching of kraft pulping process, NaOH-Urea pulping was applied. The properties of NaOH-Urea pulp were compared to those of NaOH and kraft pulps. Addition of urea in low alkali charges retarded delignification rate compared to NaOH pulping. But, in high alkali application, delignification was significantly enhanced not from the addition of urea but from the high alkalinity. It was disclosed that urea did not participate on delignification reaction by the experiment using lignin model compound. Compared to paper strengths at the same level of sheet density, NaOH-Urea pulp gave as almost same breaking length and tensile index as those of kraft pulp. Especially tensile energy absorption and burst index were higher than those of kraft pulp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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