Transcription factor called activating enhancer binding protein 2C (AP2-gamma) is found in a variety of species and expressed from oocyte stage onwards, particularly restricted to the trophectoderm. Recent studies demonstrated that ablation of Tfap2c led to failure of tight junction biogenesis, particularly the knock-down embryos of Tfap2c did not form cavity from morula to blastocyst in mouse and pig. We speculated that the Tfa2pc may also be involved in desmosome biogenesis because blastocoel formation is coincident with the establishment of desmosome. To determine this, we depleted Tfap2c injecting siRNA into one-cell zygote and analysed the expression levels of genes that are required for desmosome complex such as PkP2, Pkp3, Dsc2, and Dsg2. We found only Pkp3 was up-regulated in the knockdowned morula embryos. Interestingly, upstream region of Pkp3 had putative Tfap2c binding sites. In conclusion, our results suggest that Tfap2c is not a crucial factor but somehow it might be involved in desmosome biogenesis directly or indirectly via Pkp3.
Park, Sang-Ho;Choi, Hoseong;Kim, Semin;Cho, Won Kyong;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제32권4호
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pp.371-376
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2016
Grapevine Algerian latent virus (GALV) is a member of the genus Tombusvirus in the Tombusviridae and infects not only woody perennial grapevine plant but also herbaceous Nicotiana benthamiana plant. In this study, we developed GALV-based gene expression and virus-induced gene silencing (VIGS) vectors in N. benthamiana. The GALV coat protein deletion vector, pGMG, was applied to express the reporter gene, green fluorescence protein (GFP), but the expression of GFP was not detected due to the necrotic cell death on the infiltrated leaves. The p19 silencing suppressor of GALV was engineered to inactivate its expression and GFP was successfully expressed with unrelated silencing suppressor, HC-Pro, from soybean mosaic virus. The pGMG vector was used to knock down magnesium chelatase (ChlH) gene in N. benthamaina and the silencing phenotype was clearly observed on systemic leaves. Altogether, the GALV-derived vector is expected to be an attractive tool for useful gene expression and VIGS vectors in grapevine as well as N. benthamiana.
The objective of the research was to study the effects of Miller cycle in a modified using diesel engine. The engine was dedicated to natural gas usage by modifying pistons, fuel system and ignition systems. The engine was installed on a dynamometer and attached with various sensors and controllers. Intake valve timing, engine speed, load, injection timing and ignition timing are main parameters. The results of engine performances and emissions are present in form of graphs. Miller Cycle without supercharging can increase brake thermal efficiency and reduce brake specific fuel consumption. The injection timing must be synchronous with valve timing, speed and load to control the performances, emissions and knock margin. Throughout these tested speeds, original camshaft is recommended to obtain high volumetric efficiency. Retard ignition timing can reduce $NO_x$ emissions while maintaining high efficiency.
In murine gastrointestinal myocytes muscarinic stimulation activates nonselective cation channels via a G-protein and $Ca^{2+}$-dependent pathway. We recorded inward cationic currents following application of carbachol ($I_{CCh}$) to murine gastric myocytes held at -60 mV, using the whole-cell patch-clamp method. The properties of the inward cationic currents were similar to those of the nonselective cation channels activated by muscarinic stimulation in other gastrointestinal smooth muscle cells. CCh-induced $I_{CCh}$ and spontaneous decay of $I_{CCh}$ (desensitization of $I_{CCh}$) occurred. Unlike the situation in guinea pig gastric myocytes, desensitization was not affected by varying $[EGTA]_i$. Pretreatment with the PLC inhibitor (U73122) blocked the activation of $I_{CCh}$, and desensitization of $I_{CCh}$ was attenuated in PLC ${\beta}_1$ knock-out mice. These results suggest that the desensitization of $I_{CCh}$ in murine gastric myocytes is not due to a pathway dependent on intracellular $Ca^{2+}$ but to the PLC ${\beta}_1$ pathway.
Objective: Investigated the effect and mechanism of ascorbic acid on the development of porcine embryos produced by somatic cell nuclear transfer (SCNT). Methods: Porcine embryos were produced by SCNT and cultured in the presence or absence of ascorbic acid. Ten-eleven translocation 3 (TET3) in oocytes was knocked down by siRNA injection. After ascorbic acid treatment, reprogramming genes were analyzed by realtime reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Furthermore, relative 5-methylcytosine and 5-hydroxymethylcytosine content in pronucleus were detected by realtime PCR. Results: Ascorbic acid significantly increased the development of porcine embryos produced by SCNT. After SCNT, transcript levels of reprogramming genes, Pou5f1, Sox2, and Klf were significantly increased in blastocysts. Furthermore, ascorbic acid reduced 5-methylcytosine content in pronuclear embryos compared with the control group. Knock down of TET3 in porcine oocytes significantly prevents the demethylation of somatic cell nucleus after SCNT, even if in the presence of ascorbic acid. Conclusion: Ascorbic acid enhanced the development of porcine SCNT embryos via the increased TET3 mediated demethylation of somatic nucleus.
The EGR system has been widely used to reduce nitrogen oxides (NO$\_$x/) emission, to improve fuel economy and suppress knock by using the characteristics of charge dilution. However, as the EGR rate at a given engine operating condition increases, the combustion instability increases. The combustion instability increases cyclic variations resulting in the deterioration of engine performance and emissions. Therefore, the optimum EGR rate should be carefully determined in order to obtain the better engine performance and emissions. An experimental study has been performed to investigate the effects of EGR on combustion stability, engine performance,70x and the other exhaust emissions from 1.5 liter gasoline engine. Operating conditions are selected from the test result of the high speed and high acceleration region of SFTP mode which generates more NO$\_$x/ and needs higher engine speed compared to FTP-75 (Federal Test Procedure) mode. Engine power, fuel consumption and exhaust emissions are measured with various EGR rate. Combustion stability is analyzed by examining the variation of indicated mean effective pressure (COV$\_$imep/) and the timings of maximum pressure (P$\_$max/) location using pressure sensor. Engine performance is analyzed by investigating engine power and maximum cylinder pressure and brake specific fuel consumption (BSFC)
Nimopidine, one of dihydropyridine derivatives, has been widely used to pharmacologically identify L-type Ca currents. In this study, it was tested if nimodipine is a selective blocker for L-type Ca currents in sensory neurons and heterologous system. In mouse dorsal root ganglion neurons (DRG), low concentrations of nimodipine $(<10\;{\mu}M),$ mainly targeting L-type Ca currents, blocked high-voltage-activated calcium channel currents by ${\sim}38%.$ Interestingly, high concentrations of nimodipine $(>10\;{\mu}M)$ further reduced the 'residual' currents in DRG neurons from ${\alpha}_{1E}$ knock-out mice, after blocking L-, N- and P/Q-type Ca currents with $10\;{\mu}M$ nimodipine, $1\;{\mu}M\;{\omega}-conotoxin$ GVIA and 200 nM ${\omega-agatoxin$ IVA, indicating inhibitory effects of nimodipine on R-type Ca currents. Nimodipine $(>10\;{\mu}M)$ also produced the inhibition of both low-voltage-activated calcium channel currents in DRG neurons and ${\alpha}_{1B}\;and\;{\alpha}_{1E}$ subunit based Ca channel currents in heterologous system. These results suggest that higher nimodipine $(>10\;{\mu}M)$ is not necessarily selective for L-type Ca currents. While care should be taken in using nimodipine for pharmacologically defining L-type Ca currents from native macroscopic Ca currents, nimodipine $(>10\;{\mu}M)$ could be a useful pharmacological tool for characterizing R-type Ca currents when combined with toxins blocking other types of Ca channels.
In the previous reports, we developed the CO5 by introducing genes for the first and second urea cycle enzymes, carbamoyl phosphate synthetase I (CPS I) and ornithine transcarbamoylase (OTC) into the IBE cell lines producing erythropoietin (EPO). The CO5 have been found out to have 15-20% higher cell growth rate and produce 2-times more EPO than the parental cell line, IBE. To investigate the role of CPS I in CO5 cell line for the cell growth and amount of EPO, we knock-downed CPS I gene expression via siRNA treatment. Expression level of EPO in cell lysate of CO5 was 3-5 fold higher than that of IBE. After siRNA treatment, the cell growth of CO5 was decreased 8-21% and the EPO productivity in the cell Iysate was significantly decreased. However, these changes of the cell growth and EPO productivity were not observed in IBE. These results indicate that CPS I gene expression is important for the increased cell growth and EPO productivity of CO5 cell line.
SR proteins are essential splicing regulators and also modulate alternative splicing events, which function both as redundant and substrate-specific manner. The Drosophila B52/SRp55, a member of the SR protein family, is essential for the fly development in vivo, as deletion of B52 gene results in lethality of animals at the second instar larval stage. Identification of the splicing target genes of B52 thus should be crucial for the understanding of the specific developmental role of B52 in vivo. In this study, we performed whole-genome DNA microarray experiments with a B52- knock-out animal. Analysis of the microarray data not only provided the B52-dependent gene expression signature, but also revealed a larval-stage specific, alternative splicing target gene of B52. Our result thus provides a starting point to understand the essential function of B52 at the organismal level.
현대글로비스는 현대자동차 그룹 계열 종합물류유통기업으로 첨단 정보시스템과 선진 물류기술을 활용해 국내 국제물류, 해상운송, 물류컨설팅 등의 업무를 수행하는 전문업체이다. 또한 최근에는 물류는 물론 유통, 자원개발 및 자원순환을 활용한 친환경 경영 인프라를 구축해나가고 있다. 이번에 소개되는 현대글로비스 아산KD센터는 현대글로비스의 핵심 사업이라 할 수 있는 해외공장 자동차 조립생산용 부품(KD: KNOCK DOWN) 공급사업을 전문으로 하는 사업장이다. 2004년 11월 현대자동차 아산공장 인근 인주지방산업단지 내에 준공된 현대글로비스 아산KD센터는 임직원 50명과 협력사 인원 300명 등 총 350영의 인력을 갖추고 KD사업의 본산지로 자리매김해 나가고 있다. 실제로 이곳 센터는 발주에서 포장, 운송은 물론 현지에서의 내륙운송 및 보관 등 KD물류에 대한 종합서비스를 제공하고 있다. 이처럼 현대글로비스 아산KD센터는 자동차조립생산용 부품을 국내외 협력사로부터 조달해 전 세계로 운송 판매하고 있는 만큼 근로자의 안전보건이 기업경영의 초석이 되고 있다. 여기에 더해 세계 자동차산업의 경쟁력을 좌우하는 부품 물류산업을 선도하는 기업인만큼 이곳의 안전관리는 전국 안전인들의 남다른 관심을 받고 있다. 근로자의 안전보건을 밑바탕으로 글로벌 물류기업으로 비상하고 있는 현대글로비스 아산KD센터 찾아가봤다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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