Ouabain, strychnine sulfate, caffeine sodium benzoate and chlorpromazine hydrochloride were introduced intraperitoneally into male mice for 7, 14 and 21 days to induce the changes in the relative percentages of lactate dehydrogenase isozymes. The five isozymes in brain, heart and kidney tissues were electrophoresed on cellulose acetate strip and subjected to densitometry. Ouabain caused a drastic increase of B$_4$isozymes only in brain tissues. The two stimulants altered the relative percentages of $A_4$and B$_4$isozymes conspicuously in brain tissues, whereas virtually no redistributions of five isozymes were occurred by the depressant except B$_4$isozymes in brain and heart tissues. On the basis of these observations, it might be suggested that the changes in intracellular concentration of sodium and calcium ions are not the cause of the isozyme redistributions and that Organization of plasma membrane could be one of the factors involved in the tissue specificity of lactate dehydrogenase isozymes in vertebrates.
The alcohol dehydrogenase (ADH) isozyme of the four strains of Drosophila melanogaster in Korea was studied by the starch gel electrophoresis and the results are given below: 1. The numbers of bands, staining intensity and mobility are considerably variable in the three strains, Chunchun, Jinju and Sinchon-Seoul, but relatively uniform in the Taijun strain. 2. It is suggested that the Taijun strain may be homogeneous and the other three strains, on the contrary, heterogeneous for the ADH constitution. 3. The electrophoretic patterns are observed to be different between males and females in all strains used which is hard to intereret. 4. The starch gel electrophoresis is to have a resolving power superior to cellulose acetate electrophoresis.
Ji, Hye-Young;Lee, Seung-Seok;Yoo, Sung-Eun;Kim, Hosoon;Lee, Dong-Ha;Lim, Hong;Lee, Hye-Suk
Archives of Pharmacal Research
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v.27
no.2
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pp.239-245
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2004
KR-31543, (2S,3R,4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(2 -methyl-2H-tetrazol-5-ylmethyl) amino]-3,4-dihydro-2-dimethoxymethyl-3-hydroxy-2-methyl-2H-1-benzopyran, is a new neuroprotective agent for preventing ischemia-reperfusion damage. This study was performed to identify the metabolic pathway of KR-31543 in human liver microsomes and to characterize cytochrome P450 (CYP) enzymes that are involved in the metabolism of KR-31543. Human liver microsomal incubation of KR-31543 in the presence of NADPH resulted in the formation of two metabolites, M1 and M2. M1 was identified as N-(4-chlorophenyl)-N-(2-methyl-2H-tetrazol-5-ylmethyl)amine on the basis of LC/MS/MS analysis with a synthesized authentic standard, and M2 was suggested to be hydroxy-KR-31543. Correlation analysis between the known CYP enzyme activities and the rates of the formation of M 1 and M2 in the 12 human liver microsomes have showed significant correlations with testosterone 6$\beta$-hydroxylase activity (a marker of CYP3A4). Ketoconazole, a selective inhibitor of CYP3A4, and anti-CYP3A4 monoclonal antibodies potently inhibited both N-hydrolysis and hydroxylation of KR-31543 in human liver microsomes. These results provide evidence that CYP3A4 is the major isozyme responsible for the metabolism of KR-31543 to M1 and M2.
This study focused on the green peach aphid, Myzus persicae, as an indicator pest in Chinese cabbage cultivation to develop a genetic marker. We hypothesized that M. persicae gene flow is related to climate change. Genetic variation was analyzed using five local populations collected at different altitudes (157 m, 296 m, 560 m, 756 m and 932 m above sea level) in Hoengseong, Pyeongchang, and Gangneung areas, plus a laboratory strain used as an outgroup. There were no differences in ecological characteristics among strains. Esterase isozyme pattern and inter-simple sequence repeat (ISSR) PCR results showed significantly different bands between laboratory and wild, local populations. However, there was no difference among local populations. Partial fragments of ribosomal RNA (rRNA) and mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCO I) were amplified and their nucleotide sequence was analyzed. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) were detected in internal transcribed spacer-2 (ITS-2) and mtCO I regions among the five local populations. These SNPs can be use to discriminate different populations of M. persicae to monitor gene flow.
Dynamic parameters of biochemistry including the POD (peroxidase) activity, contents of DNA and RNA, isozymes of POD and ES (esterase) in American send (Panax quinquefolium L.) seed are reported in the present paper. The dynamic changes of POD activity proved that the PAS (physiological afterripening stage) is a stage in which some substances are prepared for seed germination. The POD activity correlated with ER (embryo ratio) significantly DNA content changed little only within 0.0036∼0.013 mg/ml, which did not correlate with ER. RNA content changed from 0.1539 to 1.0313 mg/ml and correlated significantly with RE during all of the embryo afterripening. None of the POD isozyme band was obtained in ESGS (embryo slowly growth stage), but five bands in ERGS (embryo rapidly growth stage) and six bands in PAS. Four bands of ES isozymes were obtained in ESGS, but six bands in ERGS, particularly, the content of ES isozymes increased in PAS. All of these may provide some information for understanding the dormancy mechanisms of American song seed.
Surveys of electrophoretic variation in isozymes and general proteins encoded by 26 loci were conducted to assess species recognition and to estimate the degree of genic variation and species divergence for seven species of the genus Moroco inhabiting in Korea and Japan. Estimates of the average calculated heterozygosity per species of M semotilus, M sp., M percnurus, M lagowskii, M oxycephalus, M steindachneri and M jouyf are low: 0.021, 0.019, 0.051, 0.031, 0.023, 0.046, and 0.007, respectively, and observed heterozygosities are 0.038, 0.022, 0.060, 0.027, 0.025, 0.042, and 0.002, respectively. Allozyme analyses show these species to be distinct genetically with the lafter four species being more closely related one another than any one of them is to the rest of the species. However, these four species (M. lagowskii, M. oxycephalus, M. steindachneri and M jouyi), had unique genetic markers in each species to be recognized as valid species. These results contrast to the previous report of Chung et of. (1986) mainly due to their error in analyzing the isozyme pallems, particularly in MDH and PGI analyses. The genetic distances among M semotilus, M sp., and M percnurus are near the high end of the scale of such estimate for freshwater fish congeners. Based on estimated divergent time of these species of the genus Moroco (5 to 0.6 million years) it is assumed that they are speciated during late Pliocene to middle Pleistocene epoch prior to migration to Korean and Japanese waters through Paleo Amur River system.
The objective was to devise an animal model of myocardial infarction (MI) against which cardioprotective drugs might be tested. We describe the effects of nimesulide, a COX experience with development and validation of such a model. The rabbit was chosen in preference to rodents because its heart and cardiac circulation more closely resemble those of human. Thus, the cardiovascular system of anaesthetized male rabbits, 1 to 1.5 kg (n=11), was stressed by a single bolus intravenous injection of isoprenaline (ISP), 65 mg/kg. The effects of the injection were followed for sixteen days and were evaluated in four ways: 1) measurements of creatinine kinase isozyme and troponin-I (TPI) in serum 2) Electrocardiographic (ECG) changes (ST elevation and Q wave development) 3) Cardiac histopathology observed in tissue sections of the isolated of the heart. The histopathological analysis showed that rabbit heart on 2nd day after ISP injection showed changes of coagulation necrosis. Day 4 total coagulation with the loss of nuclear and striation associated with heavy interstitial infiltrate of neutrophils was found. Day 8 after infarction showed collagen deposition with capillary channels in between the remaining islands of myocytes in the infarcted area. On the 16th day scarring was complete. Coronary perfusion rates (CPR) and heart rate (HR) of the infarcted and nimesulide (a COX-2 inhibitor) treated rabbits displayed significant improvement (n=11) on each corresponding day after infarction as compared to the infarcted and saline treated rabbits (P<0.05). All four indices revealed similarities with effects commonly associated with MI in humans.
Optimal conditions for the preservation of mushroom cultures in sterile distilled water were investigated. Mycelial disks from 12 mushroom cultures were preserved at room temperature, $5^{\circ}C,\;-20^{\circ}C$ and $-75^{\circ}C$ using sterile water and 6 cryoprotectants for 12 months. The maximal viability of mycelial disks was observed at room temperature and $5^{\circ}C$ with the value of 91.7%. At $-75^{\circ}C$, the viability was highest in polyethylene glycol (PEG) and lowest in 10% dimethyl sulfoxide (DMSO). The average mycelial growth was highest for disks preserved at $-75^{\circ}C$ in PEG. PEG was the most suitable for the preservation at $-75^{\circ}C$, although this chemical has rarely been used as a cryoprotectant in fungal culture preservation. The laccase isozyme patterns of the preserved isolate of H. ferrugineum were not changed during preservation at $5^{\circ}C$ in sterile distilled water as compared to that of slant culture.
The protective effects of the Naringin, on carbon tetrachloride ($CCl_4$)-induced hepatotoxicity and the possible mechanisms involved in this protection were investigated in mice. Pretreatment with Naringin prior to the administration of $CCl_4$ significantly prevented an increase in serum alanine, aspartate aminotransferase activity and hepatic lipid peroxidation in a dose-dependent manner. In addition, pretreatment with Naringin also significantly prevented the depletion of glutathione (GSH) content in the livers of $CCl_4$-induced mice. However, reduced hepatic glutathione levels was unaffected by treatment with Naringin alone. In addition, Naringin prevented $CCl_4$-induced apoptosis and necrosis, as indicated by a liver DNA laddering. To determine whether caspase-8,-3 pathway involved in $CCl_4$-induced acute liver injury, caspase-8, -3 activities were tested by ELISA. Naringin attenuated $CCl_4$induced caspase-8, -3 activities in mouse livers. $CCl_4$-induced hepatotoxicity was also prevented, as indicated by a liver histopathologic study. The effects of Naringin on the cytochrome P450 (CYP) 2E1, the major isozyme involved in $CCl_4$ were also investigated. Treatment of mice with Naringin resulted in a significant decrease of the CYP2E1-dependent hydroxyl at ion and aniline in a dose-dependent manner. These findings suggest that protective effects of Naringin against the $CCl_4$-induced hepatotoxicity may be due to its ability to block CYP2E1-mediated $CCl_4$ bioactivation and that is also protects against caspase-8, -3 pathway mediated apoptosis.
The geographic distribution and variation for Rhinogobius brunneus were surveyed by means of allozymic and morphological analyses and it was revealed that the Korean populations of R. brunneus comprise three distinct types, Type-A, Type-B, and Type-C, which show considerable differentiation to a degree of interspecific level(Rogers' S(1972): $S_{A-B}$=0.631, $S_{A-C}$=0.628, $S_{B-C}$=0.661). In addition, no evidence of gene flow among the types was found at sympatric area and it is assumed that reproductive isolation is completed. Moreover there is microhabitat segregation according to the distance from river mouth among each types and which segregation was regarded as a factor to facilitate reproductive isolating mechanism. Therefore, based on the evidence presented above, these three types of R. brunneus are considered as typical discrete species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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