Chaeyoung Lee;Jung Min Park;Prima F. Hillman;Minyi Yoo;Hye Yeon Kim;Chang-Seok Lee;Sang-Jip Nam
Biomolecules & Therapeutics
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제32권4호
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pp.492-498
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2024
Bioassay and HPLC-UV guided fractionations of the crude extract of marine-derived Streptomyces sp. SNA-077 have led to the isolation of a red pigment, undecylprodigiosin (1). The chemical structure of undecylprodigiosin (1) was revealed by the interpretation of NMR and mass spectroscopic (MS) data. Further, anti-melanogenic effects of undecylprodigiosin (1) were investigated. First, the melanin contents of undecylprodigiosin (1)-treated B16 cells were evaluated. Furthermore, undecylprodigiosin (1) significantly inhibited the key enzymes involved in melanogenesis, including tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TYRP-1), and dopachrome tautomerase (DCT). The mRNA and protein expression levels of Microphthalmia-associated transcriptian factor (MiTF), a critical transcription factor for tyrosinase gene expression, were also suppressed by undecylprodigiosin (1) treatment in B16 analyses. Collectively, our results suggest for the first time that undecylprodigiosin (1), a potent component isolated from an extract of marine Streptomyces sp. SNA-077, critically exerts the anti-melanogenic ability for melanin synthesis.
Investigation of M. peregrina aerial parts revealed the isolation and identification of 4-flavonoidal compounds, quercetin, quercetin-3-0-rutinoside (rutin), chrysoeriol-7-0-rhamnoside 6,8,3',5'-tetramethoxy apigenin. The compounds were identified by TLC, PC, MS, and $H^1-NMR$. The fatty acids and unsaponifiable matter were studied. The $LD_{50}$ for M. peregrina was 113.4 mg/100g b.wt. Repeated intraperitoneal injection of 1/20 and 1/10 $LD_{50}$ (5.67 mg and 11.34 mg/100g b.wt.) of defatted alcoholic of M. peregrina for 30 days induced significant decrease in serum glucose, liver enzymes and lipid components. M. peregrina administered i.p., 30min prior to carrageenan at the above doses significantly inhibited the rat paw oedema response, In acute pain models, namely, the acetic acid-induced writing and hot-plate assay, M. peregrina exhibited marked analgesic properties. In addition, M. peregrina administered at time of indomethacin injection inhibited the development of gastric lesions in rats.
Eight numerically dominant 4-(2,4-dichlorophenoxy) butyric acid (2,4-DB)-degrading bacteria and three pairs of bacteria showing syntrophic metabolism of 2,4-DB were isolated from soils, and their phylogenetic and phenotypic characteristics were investigated. The isolates were able to utilize 2,4-DB as a sole source of carbon and energy, and their 2.4-DB degradative enzymes were induced by the presence of 2.4-DB. Analysis of 16S rDNA sequences indicated that the isolates were related to members of the genera, Variovorax, Sphingomonas, Bradyrhizobium, and Pseudomonas. The chromosomal DNA patterns of the isolates obtained by polymerase-chain-reaction (PCR) amplification of repetitive extragenic palindromic (REP) sequences were distinct from each other. Four of the isolates had plasmids, but only one strain, DB 1, rad a transmissible 2,4-D degradative plasmid. When analyzed with PCR using primers targeted to the tfdA, B, and C genes, only strains DB2 and DB9a produced DNA bands of the expected sizes with the tfdA and C primers, respectively. All of the isolates were able to degrade 2,4-D as well as 2,4-DB, suggesting that the degradation pathways of these compounds were closely related to each other, but respiratory activities of many isolates adapted to 2,4-DB metabolism were quite low with 2,4-D.
Four carboxypeptidases, CP1, CP2, CP3, and CP4 were isolated from the cotyledons of germinating seedlings of Canavalia lineata by sequential chromatography on the following four columns: 1) CM-cellulose, 2) Sephacryl 5-300, 3) Procion red dye, and 4) Sephacryl S-200. A number of properties of the enzymes, such as substrate specificity, molecular weight, optimum pH, thermal stability, have been determined. Enzyme activities were measured using the Cbz(carbobenzoxy)-dipeptides containing phenylalanine at the penultimate position. The $K_m$ values of four carboxypeptidases for Cbz-Phe-Ala were 0.50, 0.65, 1.30, and 1.35 mM, respectively. The inhibition studies indicated that the four carboxypeptidases were all serine type. Each of the carboxypeptidases with molecular weights of 145, 114, 105, and 104 kDa, respectively, had the optimum enzyme activity at pH 5.0~6.0. And they were sensitive to high temperature.
A total of 45 bacterial strains were isolated from the traditional Korean soybean-fermented food, Chungkookjang. Among these strains, seven strains were selected and identified based on morphological, physiological, and biochemical characteristics, as well as phylogenetic analysis using 16S rDNA sequences. All strains were Gram-positive, aerobic, motile, oxidase-positive, rod-shaped, and endospore-forming bacteria, and produced extracellular enzymes such as amylase, cellulase, lipase, protease, and xylanase. The isolates were grown in the presence of 0-11% (w/v) NaCl. Growth was optimal at pH 6-9 and at temperatures of $30-45^{\circ}C$. According to VITEK automicrobic system tests and supplementary tests, the isolates were similar to several species of the genus Bacillus. The phylogenetic analysis of seven bacterial strains based on comparisons of 16S rDNA sequences, revealed that the strains were closely related to Bacillus species. The identification of strains that produced surfactin was also carried out, based on PCR screening of the sfp gene. Among the seven isolated strains, six yielded a surfactin-positive result with PCR.
In the course of studies on the production of thermostable amylases by thermophilic actinomycetes isolated from soils the investigation was carried out on the production of $\alpha$-amylase by G-1011 strain which had presented the most remarkable $\alpha$-amylase formation ability among 128 amylolytic isolates. The results were as follows : 1. Characteristics of G-1011 strain were compared with those descriptions of thermophilic actinomycetes given in Bergey's Manual. The strain was identical to these species of actinomycetes. The details of physiological properties of the strain luould he published in near future. 2. The optimum temperature for incubation of the cell growth of G-1011 strain and $\alpha$-amylase production by the strain was revealed to 5$0^{\circ}C$. 3. The effective medium for $\alpha$-amylase formation by the strain was consisted of 3.0%, soluble starch, 1.0%, peptone, 0.5%, yeast extract, 0.5%, NaCl, 0.1%, MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$ 0.02%, $K_2$MPO$_4$and 0.002% FeSO$_4$ㆍ7$H_2O$. The pH of the medium was ajusted to 7.0 with phosphate buffer solution. 4. The maximum production of $\alpha$-amylase (3420 D. U/ml) by G-1011 strain resulted when it was grown for 16 hours with the culture of reciprocal shaking.
Ryu, Min-Ji;Baek, Eun-Ki;Kim, Soyeon;Seong, Chi Nam;Yang, Inho;Lim, Kyung-Min;Nam, Sang-Jip
Biomolecules & Therapeutics
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제29권1호
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pp.98-103
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2021
The demand for natural substances with anti-melanogenic activity is increasing due to the recent interest in skin whitening. Intensive investigation on the culture broth of Streptomyces sp. SCO-736, a marine bacterium from the Antarctica coast, has led to the isolation of a new natural product named antaroide (1). The chemical structure was established through the interpretation of MS, UV, and NMR spectroscopic data. Antaroide is a nine-membered macrolide with lactone and lactam moieties. To investigate its applicability in skin whitening cosmetics, its anti-melanogenic activity in B16F10 murine melanoma cells was examined. As a result, antaroide displayed strong inhibitory activities against melanin synthesis and also attenuated the dendrite formation induced by the α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH). Antaroide suppressed the mRNA expression of the melanogenic enzymes such as tyrosinase, TRP-1 and TRP-2. This suggests that it may serve as a transcriptional regulator of melanogenesis. Collectively, the discovery of this novel natural nine-membered macrolide and its anti-melanogenic activity could give new insights for the development of skin whitening agents.
Effects of twenty-three aqueous herbal extracts used in oriental medicines on heme oxygenase (HO)-1 expression were estimated in a mouse hippocampal cell line, HT22. HO-1 is one of the cytoprotective enzymes activated various stimuli, and Western blot analysis was used for evaluated HO-1 expression. Six aqueous extracts such as Rhei Rhizoma, Paeoniae Radix, Uncariae Ramulus et Uncus, Theae Folium, Prunellae Spica, and Coptidis Rhizoma significantly increased HO-1 expression in HT22 cells at the concentration of 300 ${\mu}$g/ml. In Addition, four aqueous extracts including Eucommiae Cortex, Moutan Cortex Radicis, Ginseng Radix Rubra, and Scutellariae Radix moderately increased HO-1 expression. These results would be usefulfor the isolation and identification of their neuroprotective principles.
Inter-specific hybridization between Pleurotus pulmonarius and P. florida was attempted through PEG-induced protoplast fusion to select a fusant. The protocol for protoplast release, regeneration and fusion in these two Pleurotus species was standardized using the variables controlling the process. The mixture of mycolytic enzymes, i.e. commercial cellulase, crude chitinase and pectinase, KCl (0.6 M) as osmotic stabilizer, pH 6 of the phosphate buffer and an incubation time of 3 hours resulted in the maximum release of protoplasts from 3-day-old mycelia of P. florida ($5.3{\sim}5.75{\times}10^{7}$ protoplasts/g) and P. pulmonarius ($5.6{\sim}6{\times}10^{7}$ protoplasts/g). The isolated protoplasts of P. florida regenerated mycelium with 3.3% regeneration efficiency while P. pulmonarius showed 4.1% efficiency of regeneration. Polyethyleneglycol (PEG)-induced fusion of protoplasts of these two species resulted in 0.28% fusion frequency. The fusant produced fruiting bodies on paddy straw but required a lower temperature of crop running ($24{\pm}2^{\circ}C$) than its parents which could fruit at $28{\pm}2^{\circ}C$. The stable fusant strain was selected by testing for the selected biochemical markers i.e. Carbendazim tolerance and utilization of the lignin degradation product, vanillin.
To obtain a new strain of Ganoderma lucidum by protoplast fusion technique, its protoplast formation and regeneration were studied. Several factors affecting the protoplast formation and regeneration were investigated to find their optimum conditions. The mycelium was grown for four days on the cellophane membrane placed on G. Incidum complete medium (GCM). When various commercial lytic enzymes were examined for protoplast isolation, the combination of Novozym 234 and $\beta$glucuronidase was found to be effective. An osmotic stabilizer, 0.6 M sucrose in 20 mM phosphate buffer pH 5.8, gave the highest yield of protoplasts. Three-hour incubation in shaking incubator was most suitable for releasing protoplasts. To increase the protoplast yield, pretreatment with 2-mercaptoethanol was carried out. The regeneration frequency in GCM containing 0.6M MgSO$_4$ 7$H_2O$ was shown to be 0.66%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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