Kim, Kyung-Suk;Chang, Yu-Jung;Chung, Yun-Jo;Park, Chung-Ung;Seo, Hyang-Yim
BMB Reports
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제40권1호
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pp.82-87
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2007
Our heterologous expression system of the human ferritin H-chain gene (hfH) allowed us to characterize the cellular effects of ferritin in yeasts. The recombinant Saccharomyces cerevisiae (YGH2) evidenced impaired growth as compared to the control, which was correlated with ferritin expression and with the formation of core minerals. Growth was recovered via the administration of iron supplements. The modification of cellular iron metabolism, which involved the increased expression of high-affinity iron transport genes (FET3 and FTR1), was detected via Northern blot analysis. The findings may provide some evidence of cytosolic iron deficiency, as the genes were expressed transcriptionally under iron-deficient conditions. According to our results examining reactive oxygen species (ROS) generation via the fluorescence method, the ROS levels in YGH2 were decreased compared to the control. It suggests that the expression of active H-ferritins reduced the content of free iron in yeast. Therefore, present results may provide new insights into the regulatory network and pathways inherent to iron depletion conditions.
Hepatic encephalopathy (HE) associated with liver failure is accompanied by hyperammonemia, severe inflammation, depression, anxiety, and memory deficits as well as liver injury. Recent studies have focused on the liver-brain-inflammation axis to identify a therapeutic solution for patients with HE. Lipocalin-2 is an inflammation-related glycoprotein that is secreted by various organs and is involved in cellular mechanisms including iron homeostasis, glucose metabolism, cell death, neurite outgrowth, and neurogenesis. In this study, we investigated that the roles of lipocalin-2 both in the brain cortex of mice with HE and in Neuro-2a (N2A) cells. We detected elevated levels of lipocalin-2 both in the plasma and liver in a bile duct ligation mouse model of HE. We confirmed changes in cytokine expression, such as interleukin-1β, cyclooxygenase 2 expression, and iron metabolism related to gene expression through AKT-mediated signaling both in the brain cortex of mice with HE and N2A cells. Our data showed negative effects of hepatic lipocalin-2 on cell survival, iron homeostasis, and neurite outgrowth in N2A cells. Thus, we suggest that regulation of lipocalin-2 in the brain in HE may be a critical therapeutic approach to alleviate neuropathological problems focused on the liver-brain axis.
본 연구는 식이 철과 운동이 흰쥐의 헴 생합성과 지질대사에 미치는 영향을 살펴보고자 수행되었다. 쥐는 식이 철의 수준에 따라 철결필군(Fe-, 5 ppm)과 철 충분군(Fe+, 50 ppm)으로 나누고 규칙적인 운동 여부에 따라 운동군과 대조군으로 나누었다. 실험 식이의 공급과 운동을 시킨 기간은 8주였으며, 운동군은 경사 6도에서 28 m/min의 속도로 1회 30분씩 일주일에 5회씩 트레이드밀 운동을 시켰다. 그 결과 횐쥐의 헴 생합성 정도는 운동을 한 군에서 유의적으로 증가하는 것으로 나타났다. 운동은 또한 체중 증가량을 낮추고, 부고환지방량을 감소시켰으며, 혈중 중성지방과 콜레스테롤 수치를 낮추고 HDL-콜레스테롤의 수치를 증가시켰다. 한편, 식이 철의 부족은 헤마토크리트와 헤모글로빈 농도를 감소시켰으며, 간 콜레스테롤의 축적을 증가시켰다. 앞으로 인체를 대상으로 철분 수준이 다른 상태에서의 운동이 헴의 생합성, 지질대사 및 젖산 농도 등에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구가 더 많이 이루어져야 할 것으로 사료된다.
철의 대사과정에 관여하는 ferritin 단백질의 발현은 ferritin transcript의 5'-untranslated region에 위치한 iron-responsive element (IRE)와 철 농도 조절 단백질의 결합에 의해 조절된다. 이러한 ferritin의 생성에 관여하는 구조적인 요소를 밝히기 위해, RNA 이차구조인 IRE의 bulge 부분을 다른 염기로 변환시켜 철 농도 조절단백질에 의한 RNA 결합력과 ferritin 단백질의 생성의 저해정도를 비교 측정하였다. 측정된 결과로부터 IRE의 bulge 부분의 시토신 염기배열만이 RNA 이차구조의 형성에 중요한 작용을 하여 ferritin 합성을 조절할 수 있는 것을 보였다.
This study investigated the effects of chitosan on mineral metabolism in rats exposed to cadmium by oral administration. Six week-old Sprague-Dawley rats were divided into eight groups. Four groups were fed AIN-93G based 3% ${\alpha}$-cellulose diets and the other four groups were fed 3% chitosan diets for four weeks with the oral administration of 0, 0.5, 1.0, 2.0 mg Cd/2ml distilled water three times per week, respectively. The essential mineral contents of serum, liver, kidney and bone (femur and lumbar), and the excretion of calcium in feces and urine were determined. There was no significant difference in weight gain and food intake among groups. The cadmium administration significantly decreased calcium in serum, iron in blood, calcium and iron in liver and iron contents in kidney. In contrast, calcium and zinc contents in kidney increased by the administration of cadmium. The weight, length and breaking forces of the femur and lumbar were not significantly different due to cadmium administration and chitosan among the groups. The fecal excretion of calcium was increased by the administration of cadmium. On the other hand, calcium absorption and the absorption rate were decreased by Cd administration. In the groups without Cd administered (N, N-Chi groups), chitosan significantly decreased the absorption rate of calcium by increasing the excretion in feces (p<0.05). These results suggest that cadmium administration may facilitate the decline of essential minerals in rats and also, chitosan may have a conflicting effect between cadmium and the essential minerals of tissues.
Park, Yong-Sung;Yun, Cheol-Won;Kong, Jae-Yang;Kim, Tae-Hyoung;Sung, Ha-Chin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권3호
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pp.470-473
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2004
In the yeast Saccharomyces cerevisiae, iron can be toxic. Because of this phenomenon, its metabolism of iron is strictly regulated. We have constructed a model system in which cell growth is defected during periods of iron over-load. When $Aft1-1^{up}$ protein was overexpressed with Ga110 promoter, a galactose inducible promoter, cell growth was defected and levels of CLN2 transcript decreased. However transcript levels of AFT1 and FET3 genes increased over time in a consistent manner throughout the course of $AFT1-1^{up}$ overexpression. We have screened to find genes to suppress cell growth defect by iron overload with YEp-derived high copy yeast genomic DNA library and found that high copy of Rmelp suppressed cell growth defects. Rme1p has been known as an activator protein of CLN2 gene expression. Taking these results together, we suggest that the yeast cell cycle is arrested at the $G_1$, phase by iron overload via Cln2p.
Tetrahyropapaveroline (THP) is compound derived from dopamine metabolism and is capable of causing dopaminergic neurodegenerative disorder, such as Parkinson's disease (PD). The aim of this study was to evaluate the potential of THP to cause oxidative damage on the structure of cytochrome c (cyt c). Our data showed that THP led to protein aggregation and the formation of carbonyl compound in protein aggregates. THP also induced the release of iron from cyt c. Reactive oxygen species (ROS) scavengers and iron specific chelator inhibited the THP-mediated cyt c modification and carbonyl compound formation. The results of this study show that ROS may play a critical role in THP-induced cyt c modification and iron releasing of cyt c. When cyt c that has been exposed to THP was subsequently analyzed by amino acid analysis, lysine, histidine and methionine residues were particularly sensitive. It is suggested that oxidative damage of cyt c by THP might induce the increase of iron content in cells and subsequently led to the deleterious condition. This mechanism is associated with the deterioration of organs under neurodegenerative disorder such as PD.
The amount and type of dietary protein that effects affect bone mineral loss after menopause and different dietary patterns may influence anthropometric measurements, biochemical values, and bone metabolism. Objective : Our objective was to investigate bone metabolism and chronic disease factors in two different dietary patterns. Design: The sample consisted of 40 lacto-ove-vegetarians(LOV) and 49 omnivores aged from 47 to 85 years in good condition without any medical problems. Results : The average energy intake of LOV was 1414.0kcal and omnivores, 1403.2kcal. The difference between means was not statistically significant. The differences of means of body weight and BMI between the two groups were not significant but the systolic blood pressure of LOV group was significantly lower than omniovores(p<0.05). The values of serum cholesterol(p<0.05) and glucose(p<0.05) of LOV were signifcantly lower than that of omnivores. The serum albumin level(p<0.01) of LOV was lower than it'scounterpart but in a normal range. The intake of crude fiber(p<0.05) of LOV group was significantly higher. The urinary pH of LOV was 7.4 and that of omnivores was 6.3(p<0.001). Plant calcium(p>0.05) and plant iron(p<0.001) had positive correlations with the uninary pH but animal protein(p>0.05) and animal iron(p>0.05) had negative correlations with the urinary pH. The level of urinary biochemical marker of bone resorption, deoxypyridinoline(DPD) of LOV was significantly lower than the other group(p>0.05). The T-scores of bone mineral density for the two sites in the two groups were not significantly different. Conclusions : The DPD level and urinary pH value of LOV were more desirable for the bone metabolism that the omnivores. The diet of LOV had lower risk factors of chronic diseases than the other group.
Exposures to lead (Pb) are associated with neurological problems including psychiatric disorders and impaired learning and memory. Pb can be absorbed by iron transporters, which are up-regulated in hereditary hemochromatosis, an iron overload disorder in which increased iron deposition in various parenchymal organs promote metal-induced oxidative damage. While dysfunction in HFE (High Fe) gene is the major cause of hemochromatosis, the transport and toxicity of Pb in Hfe-related hemochromatosis are largely unknown. To elucidate the relationship between HFE gene dysfunction and Pb absorption, H67D knock-in Hfe-mutant and wild-type mice were given drinking water containing Pb 1.6 mg/ml ad libitum for 6 weeks and examined for behavioral phenotypes using the nestlet-shredding and marble-burying tests. Latency to nestlet-shredding in Pb-treated wild-type mice was prolonged compared with non-exposed wild-types (p < 0.001), whereas Pb exposure did not alter shredding latency in Hfe-mutant mice. In the marble-burying test, Hfe-mutant mice showed an increased number of marbles buried compared with wild-type mice (p = 0.002), indicating more repetitive behavior upon Hfe mutation. Importantly, Pb-exposed wild-type mice buried more marbles than non-exposed wild-types, whereas the number of marbles buried by Hfe-mutant mice did not change whether or not exposed to Pb. These results suggest that Hfe mutation could normalize Pb-induced behavioral alteration. To explore the mechanism of repetitive behavior caused by Pb, western blot analysis was conducted for proteins involved in brain dopamine metabolism. The levels of tyrosine hydroxylase and dopamine transporter increased upon Pb exposure in both genotypes, whereas Hfe-mutant mice displayed down-regulation of the dopamine transporter and dopamine D1 receptor with D2 receptor elevated. Taken together, our data support the idea that both Pb exposure and Hfe mutation increase repetitive behavior in mice and further suggest that these behavioral changes could be associated with altered dopaminergic neurotransmission, providing a therapeutic basis for psychiatric disorders caused by Pb toxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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