This study was carried out to separate the calcium-binding protein derived from enzymatic hydrolysates of cheese whey protein. CWPs (cheese whey protein) heated for 10 min at $100^{\circ}C$ were hydrolyzed by trypsin, papain W-40, protease S, neutrase 1.5 and pepsin, and then properties of hydrolysates, separation of calcium-binding protein and analysis of calcium-binding ability were investigated. The DH (degree of hydrolysis) and NPN (non protein nitrogen) of heated-CWP hydrolysates by commercial enzymes were higher in trypsin than those of other commercial enzymes. In the result of SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis), $\beta$-LG and $\alpha$-LA in trypsin hydrolysates were almost eliminated and the molecular weight of peptides derived from trypsin hydrolysates were smaller than 7 kDa. In the RP-HPLC (reverse phase HPLC) analysis, $\alpha$-LA was mostly eliminated, but $\beta$-LG was not affected by heat treatment and the RP-HPLC patterns of trypsin hydrolysates were similar to those of SDS-PAGE. In ion exchange chromatography, trypsin hydrolysates were shown to peak from 0.25 M NaCl and 0.5 M NaCl, and calcium-binding ability is associated with the large peak, which was eluted at a 0.25 M NaCl gradient concentration. Based on the results of this experiment, heated-CWP hydrolysates by trypsin were shown to have calcium-binding ability.
The structural and energetic preferences of thiacalix[4]biscrown-5 with and without alkali metal ions ($Na^+$, $K^+$, $Rb^+$, and $Cs^+$) have been theoretically investigated for the first time using molecular dynamic (MD) simulations and density functional theory (MPWB1K/6-31G(d)//B3LYP/6-31G(d)) methods. The formation of the metal ion complex by the host is mainly driven by the electrostatic attraction between crown-5 oxygens and a cation together with the minor contribution of the cation-$\pi$ interaction between two facing phenyl rings around the cation. The computed binding energies and the atomic charge distribution analysis for the metal binding complexes indicate the selectivity toward a potassium ion. The theoretical results herein explain the experimentally observed extractability order by this host towards various alkali metal ions. The physical nature and the driving forces for cation recognition by this host are discussed in detail.
Kim Sang-Moo;Park Seong-Min;Lee Keun-Tae;Bae Tae-Jin
Fisheries and Aquatic Sciences
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제2권2호
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pp.149-154
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1999
Response Surface Methodology was applied for optimizing the processing parameters of ultrasound treatment in order to produce low-molecular alginate. The use of ultrasound significantly reduced viscosity of alginate solutions. Suggested parameters of ultrasound treatment for maximum reduction of alginate molecular weight were: specific intensity, 115.81 $W/cm^2$ at 20kHz frequency; treatment time, 35.55 min; temperature, $20.08^{\circ}C$; alginate concentration, $2.5\%$. Low-molecular alginate obtained by ultrasound had two peaks on Sepharose CL-6B gel filtration. The viscosities of control, fraction I, and fraction II at $0.1\%$ concentration and $25^{\circ}C$ were 3.07, 1.23, and 0.82cps, respectively. Molecular weights of control, fraction I, and fraction II alginates were 336,500, 70,400, and 52,800 daltons, and their solubilities were 3, 6, and $14\%$, respectively. The lower molecular weight of alginate, the lower the alcohol precipitation and the higher $Ca^{2+}$ ion binding capacities. Heavy metal ion binding capacities of alginates were high in the following order of Pb, Cd, Zn, and Co.
Ghoreishi, Sayed Mehdi;Naeimi, Hossein;Navid, Mohammad Davodi
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제26권4호
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pp.548-552
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2005
The interaction between ionic surfactants and different nonionic molecules and polymers are studied using ion surfactant selective electrode. From the experimental data, critical concentrations of the interaction and binding process are evaluated. The interaction between hexadecyltrimethylammonium bromide (HTAB) with polyethylene glycol (PEG) in three molecular weights (1000, 10000 and 100000) and also schiff-bases, 2-[2-carboxyphenyl nitrilomethylidyne]-phenol (ortho CNP), 2-[3-carboxyphenyl nitrilomethylidyne]-phenol (meta CNP)and 2-[4-carboxyphenyl nitrilomethylidyne]-phenol (para CNP) with the potentiometric method were investigated using HTAB membrane selective electrode. In the case of PEG with increasing molecular weights more interaction to HTAB occurs. The electromotive force (EMF) data also showed that interaction between para CNP with HTAB is more than the other schiff-bases. It seems this case related to less space interference of COOH group for that compound. The onset of binding ($T_1$) of course is the same for three schiffbase molecules.
Gyeong Soo Ko;Thang Quyet Nguyen;Seri Koh;Wonchull Kang
대한화학회지
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제68권1호
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pp.32-39
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2024
Glycerol dehydrogenase (GlyDH) plays a crucial role in the glycerol metabolism pathway by catalyzing the oxidation of glycerol to dihydroxyacetone (DHA). Previous studies of GlyDH have predominantly focused on unraveling the structural features of the active site and its binding interactions with ligand. However, the structural details of GlyDH in complex with both NAD+ and the substrate bound have remained elusive. In this study, we present the crystal structures of Klebsiella pneumoniae GlyDH (KpGlyDH) in the absence and presence of NAD+ at a resolution of 2.1 Å. Notably, both structures reveal the binding of the substrate, ethylene glycol, to the zinc ion. Interestingly, a significant change in the coordination number of the zinc ion is observed, with three in the absence of NAD+ and four in its presence. These findings shed light on the structural aspects of GlyDH and its interactions with NAD+ and the substrate.
Vacancy defects in graphene can be created by electron or ion irradiation and those induce ripples which can change the electronic properties of graphene. Recently, the formation of defect structures such as vacancy defects and non-hexagonal rings has been reported in the high resolution transmission electron microscope (HR-TEM) of reduced graphene oxide [1]. In those HR-TEM images, it is noticed that the dislocations with pentagon-heptagon (5-7) pairs are formed and diffuses. Interestingly, it is also observed that two 5-7 pairs are separated and diffuse far away from each other. The separation of 5-7 pairs has been known to be due to their self-diffusion. However, from our tight-binding molecular dynamics simulation, it is found that the separation of 5-7 pairs is due to the diffusion of single vacancy defects and coalescence with 5-7 pairs. The diffusion and coalescence of single vacancy defects is too fast to be observed even in HR-TEM. We also implemented Van der Waals interaction in our tight-binding carbon model to describe correctly bi-layer and multi-layer graphene. The compressibility of graphite along c-axis in our tight-binding calculation is found to be in excellent agreement with experiment. We also discuss the difference between single layer and bi-layer graphene about vacancy diffusion and reconstruction.
Woo, Seon-Ock;Son, Sung-Hee;Park, Hong-Seog;Vulpe, Chris D.;Ryu, Jae-Chun;Yum, Seung-Shic
Molecular & Cellular Toxicology
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제4권4호
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pp.293-299
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2008
To screen the differentially expressed genes in cadmuim-exposed marine medaka fish (Oryzias javanicus), a candidate marine test fish for ecological toxicity, the differential display polymerase chain reaction (DD-PCR) was carried out, since the genome-wide gene expression data are not available in this fish species yet. A total of 35 clones were isolated from cadmium-exposed fish and their nucleotide sequences were analyzed. The differentially expressed gene candidates were categorized to response to stimulus (3); ion binding (3); DNA binding (1); protein binding (6); carbohydrate binding (1); metabolic process (4); biological regulation (3); cellular process (2); protein synthesis (2); catalytic activity (2); sense of sight (1); immune (1); neurohormone (1); signaling activity (1); electron carrier activity (1) and others (3). For real-time quantitative RT-PCR, we selected catalase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, heat shock protein 70, and metallothionein and confirmed that cadmium exposure enhanced induction of these four genes.
Human neutrophil elastase (HNElastase, EC 3.4.21.37), a causative factor of inflammatory diseases, was purified by Ultrogel AcA54 gel filtration and CM-Sephadex ion exchange chromatography. HNElastase was inhibited by phenylbutazone in a concentration dependent manner up to 0.4 mM, but as the concentration increased, the inhibitory effect gradually diminished. Binding of phenylbutazone to the human neutrophil elastase caused strong Raman shifts at 200, 440, and 1194 $cm^{-1}$. The peak at 1194 $cm^{-1}$ might be evidence of the presence $of\;-N=N-{\Phi}$ radical. The core area of the elastase, according to the visual molecular model of human neutrophil elastase, was structurally stable. A deeply situated active center was at the core area surrounded by hydrophobic amino acids. Directly neighboring the active site was one positively charged atom and two atoms carrying a negative charge, which enabled the enzyme and the drug to form a strong interaction. Phenylbutazone may form a binding, similar to a key & lock system to the atoms carrying opposite charges near the active site of the enzyme molecule. Furthermore, the hydrophobicity of the surrounding amino acid near the active site seemed to enhance the binding strength of phenylbutazone. Binding of phenylbutazone near the active site may cause masking of the active site, preventing the substrate from approaching the active site and inhibiting elastase activity.
Interactions between metal ions and chitosan in solution were studied by spectroscopic and viscometric measurements. $Cu^{++}$-chitosan complex exhibited an absorption band at 265 nm, whereas D-glucosamine complex showed one at 245 nm. The difference in ${\lambda}_{max}$ was attributed to the different amine to $Cu^{2+}$ ratios of the complexes, that is, 2 : 1 for chitosan and 1 : 1 for D-glucosamine. The molar absorptivities and binding constants of the complexes were evaluatatled. The binding of $Cu^{2+}$ to chitosan was cooperative near pH 5, and both intra- and intermolecular chelations depending on chitosan and $Cu^{2+}$concentrations were observed, The intermolecular chelation was stabilized by addition of salts. The cooperative intermolecular chelation of $Ni^{++}$ was also observed at pH 6.2. No significant binding of other divalent ions was observed. The reported high adsorption abilities of chitosan particles for these ions were attributed to the deposition of metal hydroxide aggregates in pores of chitosan particles rather than chelation to amine groups.
The main objective of this study is to determine the critical chloride ion concentrations in the pore solutions causing depassivation of steel reinforcement in concrete made with cements of different $C_3A$ contents. Cement pastes with water-ratio of 0.5 were prepared using four cements with $C_3A$ contents of 0.46, 5.97, 9.14, and 9.65 percent. The pastes were allowed to hydrate in sealed containers for 28days and then objected to pore solution expression. The expressed pore fluids were analyzed for chloride and hydroxyl ion concentrations. It was found that the free cholride concentration in the pore solution decreases significantly with an increase in the $C_3A$ content of the cement. With increasing level of chloride addition, although the alsolute amount of bound chloride increase, the ratio of bound to total chlorides decreases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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