The purpose of this study was to investigate the intestinal and nasal absorption enhancement of cefotaxime (CTX) by ion-pairing with counterions and to design an effective oral and intranasal drug delivery system for antibiotics. Counterions for absorption promotion were cationic surfactants [cetylpyridinium chloride (CP), cetrimide (CT) and benzalkonium chloride (BA)]. In the presence of counterions, the apparent partition coefficient of cefotaxime was increased depending on the molar concentration of the counterions. Anion interference was observed for ion-pairing of cefotaxime with counterions because of the counterbalance between an anion and counterions. The present study employed the in situ simultaneous nasal and intestinal perfusion technique in rats. The apparent permeabilities $(P_{app})$ of cefotaxime were $1.43{\pm}0.04{\times}10^{-5}\;cm/sec(mean{\pm}S.E)$ in the nasal cavity and 0 in the jejunum, respectively, which indicated that the intrinsic absorptivity of cefotaxime was greater in the nasal cavity than in the jejunum. When ionupairing formers were used, the decreasing order of apparent cefotaxime permeability $(P_{app},\;10^{-5}\;cm/sec)$, corrected for surface area of absorption, was as followings: $BA\;(7.50{\pm}0.36)\;>\;CT\;(4.92{\pm}0.24)\;>\;CP\;(3.01{\pm}0.17)$ in the jejunum and $BA\;(22.31{\pm}1.36)\;>\;CP\;(18.24{\pm}0.81)\;>\;CT \;(16.22{\pm}1.87)$ in the nasal cavity. The increase in permeability of cefotaxime was about 13-fold in the rat nasal cavity and was marked in the rat jejunum for ion-pairing with counterions as compared to those without ion-pairing. The damages of jejunal and nasal mucosal membrane by counterions were observed within approximately 2hrs after removal of ion-pair of cefotaxime with counterions from the nasal cavity and jejunum. These results suggest that CP can be used as an ion-pairing former in the jejunum and CP and CT can be used as ion-pairing formers in the nasal cavity for cefotaxime, as well as for poorly absorbed drugs with a negative charge due to ionization.
이온쌍크로마토그래피에서 방향족 유기산들의 머무름을 연구하기 위하여 Amberlite XAD-4 수지에 대한 분배계수 값을 측정하였다. 유기산들의 XAD-4 수지에 대한 흡착은 시료의 농도, 용액의 pH 그리고 이온쌍 형성시약의 농도에 따라 영향을 받는다. Tetraalkylammonium염과 같은 이온쌍 형성 시약에 의한 유기산의 XAD-4 수지에 대한 흡착 증가는 전기적 이중층에 의한 이온 상호작용에 기인됨을 알았으며, 유기산과 이온쌍 형성 시약과의 상호작용은 공존이온과 상대이온의 종류와 농도에 따라 영향을 받음을 알았다. 한편, 이온쌍 형성시약과 메탄올의 농도 변화에 따른 XAD-4수지에 대한 유기산의 뱃치법과 용리법에서 얻은 용량인자의 관계는 좋은 직선관계를 보여주었다. 따라서 뱃치법의 실험으로써 용리법의 머무름을 예측할 수 있는 가능성을 제시하였다.
이성분계 첨가물을 이용한 카드뮴 석출과 수소 생성의 상대족인 속도를 조절할 수 있는 가능한 방법에 대하여 조사하였다. 수소를 발생하는 물의 전기환원을 억제하는 소수성 필름을 형성할 수 있는 벤질 알코올을 첨가제 중의 하나로 선택하였다. 다른 한 가지 첨가제는 카드뮴(II) 이온의 친수성을 약화시킴으로써 소수성 벤질 알코올 필름층을 쉽게 가로질러 환원극에 전착시킬 수 있는 것을 선택하였다. 전압 전류 효율 연구로부터 이온쌍과 착물 첨가제가 벤질 알코올 필름 존재하에서 카드뮴의 환원을 촉진시킬 수 있다는 것을 확인하였다. 벤질 알코올 필름은 나트륨 이온과 카드뮴의 염화착물을 형성하는 이온쌍을 얻기에 충분하도록 전극 주위의 유전상수를 낮추고, 카드뮴의 환원을 촉진시킨다. 이러한 환원의 촉진은 염화물이 존재하지 않는 황산염 용액에서는 일어나지 않는다. 왜냐하면 카드뮴은 본래 아쿠아 착물과 이온쌍으로 존재하여 카드뮴의 환원을 촉진시키지 못하고 환원을 방해시키기 때문이다.
Ion-Paring을 이용한 고성능 액체 크로마토그래피법과 계면활성제를 완충용액에 섞어서 사용하는 미셀 모세관 전기영동법(micellar electrokinetic capillary chromatography, MECC)을 이용하여 아조염료의 합성성분이면서 동시에 독성을 나타내는 분해물인 H-acid, J-acid, ${\gamma}$-acid, orthanilic acid, sulfanilic acid 그리고 2-naphthylamine-1,5-disulfonic acid 등의 디아조 성분에 대하여 분석을 수행하였다. 같은 방법으로 Acid Orange 7, Acid Orange 5, Acid Blue 92 등의 산성염료와 Direct Red 80 등의 직접염료와 같은 반응성 염료 및 Calcion에 대한 분리를 시도한 결과 모든 염료에 대한 완전한 분리를 얻었으며, 특히 각 염료의 환원용액을 H-acid, J-acid, ${\gamma}$-acid, orthanilic acid, sulfanilic acid 혹은 2-naphthylamine-1,5-disulfonic acid 등의 표준물질과 비교 분석한 결과 사용한 각 염료의 디아조 혹은 커플링 성분을 완벽하게 분석할 수 있음을 알 수 있었고, 따라서 Ion-Pair 크로마토그래피법과 모세관 전기영동법은 미지의 염료에 대한 성분확인 및 디아조 혹은 커플링 성분분석에 응용할 수 있음을 보였다.
Cysteamine has been used in cosmetics as an antioxidant, a hair straightening agent, and a hair waving agent. However, recent studies indicate that cysteamine can act as an allergen to hairdressers. The objective of this study was to develop and validate a simple and effective reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method for the measurement of cysteamine and its dimer, cystamine. Sodium 1-heptanesulfonate (NaHpSO) was used as an ion-pairing agent to improve chromatographic performance. Separation was performed on a Gemini C18 column ($250mm{\times}4.6mm$, $5{\mu}m$ particle size) using a mobile phase composed of 85:15 (v/v) 4 mM NaHpSO in 0.1% phosphoric acid:acetonitrile. UV absorbance was monitored at 215 nm. The RP-HPLC method developed in this study was validated for specificity, linearity, limit of detection, limit of quantitation, precision, accuracy, and recovery. Cysteamine and cystamine were chromatographically resolved from other reducing agents such as thioglycolic acid and cysteine. Extraction using water and chloroform resulted in the recovery for cysteamine and cystamine ranging from 100.2-102.7% and 90.6-98.7%, respectively. This validated RP-HPLC method would be useful for quality control and monitoring of cysteamine and cystamine in cosmetics.
1.이온토포레시스에 의한 ISP의 경피촙수증가는 단순투과의 약 13배로서 그 증가정도는 전류세기와 약물농도에 비례하였다. 2. 가해주는 $Na^{+}$ 농도가 커질수록 ISP의 flux는 감소하였다. 3. ion-pairing agent률 가하면 ISP의 flux는 감소하는데, 그 감소정도는 TU>SAL>BEN 로서 이는 이 물질들이 ISP와 ion-pair를 형성하는 능력순서와 같았다. 4. ISP용액의 pH증가시 ISP의 flux는 대체적으로 증가하며 그 pattern은 피부의 pKa를 3.5로 가정할 때의 피부해리곡선과 유사하였다. ISP가 광범위한 pH에서 완벽하게 해리된다고 가정할 때 pH증가시 flux증가는 피부해리 증가에 따른 permselectivity 증가에 기인한 것으로 생각되었다.
본 연구에서는 HPLC-ICP-MS를 이용하여 여러 식품에 포함된 셀레늄의 화학종을 분리하고 정량 하였다. 양이온 교환 크로마토그래피를 사용할 때에 무기셀레늄 화학종의 분리는 효율적이나 유기셀레늄 화학종은 분리가 완전하지 못한 반면, 역상 이온쌍 크로마토그래피에서는 유기와 무기 셀레늄 화학종들을 모두 잘 분리 할 수 있었다. $C_8$ 컬럼($Symmetryshield^{TM}\;RP_8$, 3.5 ${\mu}m$, $4.6{\times}150$ mm)을 이용하여 최적조건(이동상; 5% 메탄올, ion-pairing reagent; 0.05% nonafluorovaleric acid, 흐름속도; 0.9 mL $min^{-1}$)하에서 표준물 Se(IV), Se(VI), SeCys (selenocystein), SeMet (selenomethionine), Se-M-C (seleno methyl cystein)를 성공적으로 분리하였다. 시료에서의 셀레늄화학종의 추출은 마이크로파를 이용한 추출과 효소(protease I, trypsin, protease XIV)를 이용한 추출을 사용하였는데 시료에 따라 서로 다른 효율과 결과를 보여주었다. 식물성 시료인 마늘 시료는 protease I, 동물성 시료인 돼지고기와 고등어 시료는 protease I + trypsin이 가장 효율적인 추출을 보여주었다. 각 시료의 최적 조건을 선택하여 셀레늄 화학종을 추출하고 분리 정량한 결과 이들에는 주로 무기 Se, SeCys, SeMet이 수 ${\mu}g$$g^{-1}$ 내지 수 십 ${\mu}g$$g^{-1}$ 수준으로 포함되어 있음을 알 수 있었다.
A liquid chromatographic method has been developed for the analysis of aminoglycoside antibiotics (AMGs) using Heptafluorobutyric acid (HFBA) as a ion-pairing reagent. AMGs (amikacin, apramycin, dihydrostreptomycin, gentamicin, hygrosin B, kanamycin, neomycin, spectinomycin and tobramycin) were formed by reaction with HFBA as ion-pairing reagent. HFBA was attached to corresponding amino group of AMGs. These AMGs compounds were separated and detected by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS). The experimental conditions for separation of AMGs were optimized and validated. A simple liquid chromatographic method for the determination of AMGs was demonstrated.
생체 시료내의 glutathione(GSH)을 monobromobimane(MBB)이나 4-fluoro-7-sulfobenzofurazan(SBD-F)으로 최적 유도체화 조건을 확립하였고 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)/형광 검출기(FLD)를 사용하여 정량분석 하였다. MBB로 유도체화한 경우에는 검출한계가 $0.03{\mu}g/mL$으로서 SBD-F를 사용한 경우보다 감도가 약 200배 정도 향상되었다. 이때 내부표준물질로서 N-acetylcysteine을 사용하였으며, MBB 유도체의 분리능을 개선시키기 위해 tetrabutylammonium 이온을 counter 이온으로 선택하였다. 위의 조건의 이온쌍 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과 $0.08{\sim}8.33{\mu}g/mL$ 농도 범위에서 상관계수가 0.998 이상으로 좋은 직선성을 보여주고 있다. 재현성을 조사한 결과 세 가지 다른 농도에서 상대 표준 편차가 5% 이내로 나타났다. 이 방법은 혈장, 조직 등의 생체 시료중 GSH의 분석법으로 적합하다는 것을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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