Chlorine was used for inactivation of bacteriophage f2 at pH 5.5, 7.5, and 10.0 at $10^{\circ}C$. The inactivation rate phage with chlorine varied depending on the pH value and reaction time. Hypochlorous acid appeared to be the major species of free chlorine for the inactivation. Suevival of the phage treated with chlorine and infectivity of the RNA extracted from the chlorinated phage were examined. The RNA extracted from untreatd phage was chlorinated and its infectivity was assayed. All three samples showed similar rates of inactivation at pH 5.5 and 7.5, but the naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared with specific and non-specific attachment of the phasge f2. The specific attachment of the phage increased after the phage had been inactivated by extended chlorination. Chlorine may penetrate to the becteriophage f2 by altering the structural integrity of the protein coat, but the main target of free chlorine for inactivation of the phage appeared to be the phage RNA.
We investigate the resistance of Cryptosporidium (C.) parvum oocysts to commercial bleach treatment. The viability and infectivity of C. parvum oocysts suspended in 100, 50, 25, 12.5, 6.3 or 3.2% aqueous commercial bleach for 10, 30, 60, 120 or 180 min at room temperature were assessed by nucleic acid Syto-9 staining, histologic examination of ileum and infectivity to immunosuppressed neonatal C57BL/6N mice. Although the viability was decreased compared with normal oocysts, all oocysts in contact with serially diluted commercial bleach for 180 min were alive by nucleic acid dye Syto-9 staining. And, microscopic examination of ileum sections revealed developmental stages of C. parvum in all mice. The oocyst shedding patterns between mice infected with oocysts contacted with commercial bleach and normal control mice were not significantly different each other. Although commercial bleach is widely used as a bacterial and viral disinfectant, the present findings indicate that it is not an effective disinfectant for C. parvum oocysts under practical conditions. Authors conclude that, therefore, it is undesirable to recommend commercial bleach as a disinfectant for C. parvum oocysts.
The present study was undertaken to determine the viability and infectivity of oocysts of Cryptosporidium baileyi that had been stored from 1 to 40 months at $4^{\circ}C$ preserved in 2.5% potassium dichromate solution. Oocysts of C. baileyi were purified from the feces of experimentally infected chickens using discontinuous sucrose gradients. Subsequently, the purified oocysts were suspended in 2.5% potassium dichromate solution at a concentration of $1{\;}{\times}10^7$ organism/ml, and their viabilities were assessed by nucleic acid staining, histologic examination, and infectivity to 2-day-old chickens. All chickens inoculated with oocysts that had been stored for 1-18 months developed patent infections, while chickens infected with older oocysts remained uninfected. Between 5.8% and 82.2% of the oocysts, stored at $4^{\circ}C$ in 2.5% potassium dichromate solution, were found to be viable, as determined by nucleic acid staining. Parasite colonization in the bursa of Fabricius was detected in the microvillus border of bursal epithelium. The finding that C. baileyi oocysts remain infective to chickens for at least 18 months offers important time-saving advantages to investigators who frequently require large numbers of oocysts.
Uzeda, Rosangela Soares;Costa, Kattyanne De Souza;Santos, Sara Lima;Pinheiro, Alexandre Moraes;Almeida, Maria Angela Ornelas De;McAllister, Milton M.;Gondim, Luis Fernando Pita
Parasites, Hosts and Diseases
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v.45
no.4
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pp.295-299
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2007
The purpose of this study was to investigate whether sporulated Neospora caninum oocysts, which had been stored for 46 mo in a 2% sulfuric acid solution at $4^{\circ}C$, remain morphologically viable and infective to gerbils (Meriones unguiculatus). Six gerbils were orally inoculated with doses of 400 or 1,200 oocysts. Two mo after inoculation, the animals did not show any clinical signs, had no histological lesions, and were seronegative for N. caninum at 1:50 in an immunofluorescent antibody test. PCR using the brain from each gerbil did not reveal N. caninum specific DNA. We conclude that oocysts preserved for 46 mo are not infective, despite being morphologically intact.
The infection of marine diatom Coscinodiscus wailesii by a parasitic protist from the Yongho Bay of Busan, Korea was observed during the diatom bloom events in 2017 through 2018. The morphological and molecular features suggested that the parasitic nanoflagellate Pirsonia diadema was responsible for the infection. During the study period, the parasite prevalence ranged from 0.3% to 3.3%, and infected C. wailesii cells were observed only at surface seawater temperatures ranging between 10.9 and 19.9℃, although the host population appeared at temperatures above 25℃. The parasite and host system was successfully established as cultures. Using the cultures, we determined the morphological features over the infection cycle, parasite generation time, parasite prevalence as a function of inoculum size, and zoospore infectivity and survival time. The diatom C. wailesii was readily infected by the parasite P. diadema, with a parasite prevalence reaching up to 100% and a zoospore to host inoculum ratio above 20:1. The survival and infectivity of the parasite zoospores decreased with age. While the zoospores could survive up to 88 hours, they quickly lost their ability to infect after 48 hours. These results could lead to a better understanding of the biology and ecology of the parasitoid infecting the giant-sized diatoms in coastal waters.
Throughout the studies the following experimental results were obtained and summarized. 1. Treatment of MVE virus with acetone, Tween-ether and Tween-ether-protamine sulphate caused an eight to 16 fold increase in HA activity. 2. Treatment with acetone and Tween-ether resulted in a four fold increase in CF activity. Treatment with Tween-ether-protamine sulphate decreased the activity. 3. The crude virus showed a complete loss of infectivity after treatment with Tween-ether, but three log unit was, decreased with acetone treatment. 4. The HA activity of treated and crude virus was disappeared after heating at $37^{\circ}C$ for 60 minutes but CF activity was increased. 5. Tween-ether or acetone treatment equally applicable to the preparation of haemagglutinin for HI test. 6. Zonal centrifugation of crude virus in a linear ten to 60 percent sucrose gradient showed two peaks of CF activity, and one of high buoy ant density part accompanied by HA activity and infectivity and the other of lower density part. Acetone treatment brought a decrease of the high density CF activity but not affected the second peak of low density found with crude virus, and resulted in increased HA activity and decreased infectivity. The peaks of HA, CF and infectivity after acetone treatment were not clearly separated. Tween-ether treatment caused a loss of the peak of CF activity found in the area of high density with crude virus, but the peak in the area of low density was not affected. This peak of CF activity was separated from noninfectious HA activity. The HA and CF activities were considered to be contributed by different parts of the varion.
Cytological examination is widely used as a diagnostic tool because of the ease of collecting cells from the involved area. However, the diagnostic yield of cytological examination is unsatisfactory; the reasons include sampling error, poorly prepared samples, small numbers of malignant cells, and low grades of cellular atypia. In this study, we focused on the high infectivity of adenovirus towards epithelial cells and applied the luciferase-expressing adenoviral vector to a new cancer cell detection tool. In addition, adenoviral infectivity was enhanced by modifying viral fiber proteins. The sensitivity of the diagnostic tool was tested using the NCI-H1299 lung cancer cell line, and validated in body fluid samples from cancer patients with a variety of etiology. Results showed that the adenovirus efficiently transfected NCI-H1299 with high sensitivity. Only 10 cancer cells were sufficient for detection of luciferase signals. In body fluid samples, the adenovirus confirmed the diagnosis for malignant and benign cancer, but not in non-epithelial cell derived samples. This study provides proof-of-concept for a more reliable and sensitive diagnostic tool for epithelium-derived cancer.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.29
no.5
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pp.533-539
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2007
Cell culture infectivity assay using HCT-8 cell was combined with most-probable-number technique to evaluate the inactivation of Cryptosporidium parvum by various disinfectants, including chlorine, ozone, and UV light. The assay was demonstrated to be as sensitive as animal infectivity assay, which has been considered the "gold standard" for assessing Cryptosporidium oocyst infectivity, and a valuable tool to evaluate inactivation of C. parvum by disinfectants. Bench-scale inactivation study showed that at the condition of $5^{\circ}C$ and pH 7.0, CT value of $1,250mg{\cdot}min/L$ by chlorine and $16mg{\cdot}min/L$ by ozone were required to achieve approximately 1.0 log inactivation of C. parvum, suggesting that even ozone could not be sufficient to inactivate C, parvum at low. temperature. Unlike chlorine and ozone, UV light is very effective to inactivate C. parvum, regardless of temperature. A UV light dose of 2 $mJ/cm^2$ provided at least 3 log inactivation of C. parvum.
Yang Hong-Ji;Park Tae-Wook;Do Hong-Ki;Kim Chong-Sung
Journal of the korean veterinary medical association
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v.33
no.10
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pp.612-615
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1997
Parasitic infections of man and animals continue to be entities with serious implications for the health and welfare of mankind, despite advances in diagnosis, treatment and control. In this communication, we discussed on the life cycle, infectivity, mor-
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