Incubation routine and sex role of Streaked Shearwaters Calonectris leucomelas at Sasudo Island, in Jeju, South Korea, were studied during the incubation period, June to August in 2002. Incubation routine in Procellariiformes represents a sequence of alternating shifts taken in turn by female and male in a species-specific pattern. Hence, coordination of individual incubation rhythms between partners is crucial for successful breeding attempt. In Streaked Shearwaters, incubation routine represents a sequence of alternating shifts taken in turn by male and female. The first incubation shift was made by male after female had laid the egg. The mean incubation period was 50.8 days until hatching. Males had spent on average 26.5 days incubating and females 24.3 days accordingly. The mean duration of incubation shifts decreased progressively from 6th and 7th shift to hatching. Overall, males had spent more time incubating than females during the incubation period, but the mean duration of the incubation shift 5.6 days for males and 5.7 days for females did not differ between males and females. There were no effect of the body size of the breeding pair on incubation performance. For males the mean of body weight decreased during the incubation, whereas for females it remained approximately stable. In Streaked Shearwaters, the duration of incubation shift and subsequent foraging trip are related to loss of body weight during the period of fasting. In addition, coordination of individual incubation rhythms affects their incubation behaviour.
유기용매나 계면활성제를 첨가하지 않은 효소반응계의 고상계에서 경화우지와 글리세롤(GL)로부터 디글리세리드(DG)를 생산하기 위해 리파제에 의한 글리세롤리시스 반응온도의 최적화를 수행하였다. 두 기질은 트리글리세리드(TG)인 경화우지가 완전히 디글리세리드로 전환하기에 적합한 몰비율인 GL/TG=0.5로 하여 반응시켰다. $60^{\circ}C$에서의 글리세로리시스반응는 액상에서의 평형으로 인하여 높은 함량의 디글리세리드의 생산은 불가능하였으며 반응온도를 경화우지의 녹는점 보다 낮게 조정하여 반응혼합물의 고상화를 유도함으로써 디글리세리드의 함량을 증가시킬 수가 있었다. 초기 2시간을 $60^{\circ}C$에서 반응시켜 트리글리세리드를 급격히 감소시킨 후에 $55^{\circ}C$에서 4시간을 유지시키고 마지막으로 $50^{\circ}C$에서 계속 수일간 반응시키는 것이 디글리세리드이 생산에 가장 적합한 생산조건이었다. 글리세로리시스반응 72시간 후 71%의 DG가 생성되었다. 전체 디글리세리드 중의 73%가 1,3-DG였고 27%가 1,2-DG 였다. 글리세로리시스 반응 동안 2% 내외의 자유지방산 생성이 확인되었다.
The osmotic and mechanical red cell fragility of the professional blood donors, who were found to be anemic as the result of frequent and repeated blood loss the past 5-6 years, were compared with that of the normal person while incubating the blood at $4-6^{\circ}C$ for 28 days. The fragility was expressed as % hemolysis occured during the incubation, and the following results were obtained: 1. The osmotic fragility in the normal persons (i.e, ; control group) progressively increased as the incubation became longer, and % hemolysis in 0.42% NaCl solution at 0, 10, 15, 21 and 28 incubation day was 31.90, 50.20, 41.68, 43.50 and 55.40 respectively. The mechanical fragility. in the normal red cells ranged between the minimum of 0.00% to the maximum of 5.80% both in 0.90 and 0.66% of NaCl solutions. 2. The hemolysis curve obtained in the red cell osmotic fragility from three cases of the anemic persons (i.e,; experimental group) showed a significant left side shift comparing with the normal in general which indicates that the fragility was more increased in the experimental group. The mechanical fragility in the experimental group ranged between the minimum 0.00% to the maximum 19.00% both in 0.90 and 0.66% of NaCl solutions. 3. The red cells of the chronic anemic person due to the frequent blood loss as the professional blood donor exhibit significantly marked increase both in osmotic and mechanical fragility comparing with the normal, and the tendency was more prominent as the incubation period became longer.
The effects of dry roasting whole faba beans (WFB) and whole lupin seeds (WLS) at 110, 130 or $150{^{\circ}C}$ for 15, 30 or 45 min on rumen (RDCP%), estimated intestinal (IDCP%) and total tract disappearance of CP (TDCP%) and intestinal availability (IARUCP%) of rumen undegraded CP (RUCP%) were determined. The RDCP values were estimated by in sacco technique by incubating nylon bags for 8, 12 and 24 h in the rumen of dairy cows. The IDCP and IARUCP values were estimated using a sequence of ruminal incubation, in vitro incubation in acid-pepsin for 1 h and then in pancreatin for 24 h of three-step in vitro procedure technique. Dry roasting at 130 and $150^{\circ}C$ decreased RDCP with correspondingly increasing IDCP. The IDCP value generally increased from 12.3(raw) to 8.6, 14.8 and 39.6% (WFB) and from 28.3 (raw) to 33.7, 36.2 and 56.2% (WLS) at 8 h rumen incubation; from 2.9 (raw) to 2.9, 4.6 and 23.3% (WFB) and from 19.6 (raw) to 19.0, 24.0 and 46.6% (WLS) at 12 h rumen incubation; from 1.3 (raw) to 1.9, 1.7 and 11.0% (WFB) and from 4.4 (raw) to 4.2, 10.7 and 36.7% (WLS) at 12 h rumen incubation as the temperatures rose to 110, 130 and $150{^{\circ}C}$ respectively. The TDCP values were always high and increased by time in the rumen, the average values of which were 97.9, 96.6; 99.2, 96.9 and 99.6, 98.7% for WFB and WLS, respectively, at 8, 12 and 24 h rumen incubation. But within the same retention time, TDCP was generally unchanged. The average IARUCP increased from 87.3 (raw) to 87.4, 88.7 and 92.0% (WFB); from 87.6 (raw) to 88.9, 91.5 and 93.0% (WLS) at roasting temperatures of 110, 130 and $150{^{\circ}C}$, respectively. It was concluded that dry roasting can shift the digestion of CP from rumen to the lower gastrointestinal tract without depressing the digestion of RUCP. The best processing condition in this study was dry roasting at $150{^{\circ}C}$ for 45 min in terms of effects on the disappearances and availability of CP. Research data on intestinal availability of individual amino acids need to be further investigated.
The aim of this study was to evaluate the effects of $Ca^{2+}$, $HCO_3{^-}$ and BSA on the in vitro capacitation-associated protein tyrosine phosphorylation, hyperactivation and acrosome reaction in guinea pig sperm. Caudal epididymal sperm were incubated in four different groups: modified TALP (Tyrode's albumin lactate pyruvate) or TALP without one of the medium constituents ($Ca^{2+}$, $HCO_3{^-}$ and BSA). After incubation for the required time (0 h, 0.5 h, 1 h, 3 h, 5 h, and 7 h), sperm were removed for further experiment. The capacitation effect was assessed by CTC (Chlortetracycline) staining. Western blotting and indirect immunofluorescence were used to analyze the level and localization of tyrosine phosphorylation. The results showed that guinea pig sperm underwent a time-dependent increase in protein tyrosine phosphorylation during the in vitro capacitation and the percentage of protein tyrosine phosphorylated sperm increased from 36% to 92% from the beginning of incubation to 7 h incubation. Also, there was a shift in the site of phosphotyrosine-specific fluorescence from the head of sperm to both the head and the flagellum. Moreover, an absence of $Ca^{2+}$ or $HCO_3{^-}$ inhibited in vitro hyperactivation and acrosome reaction and decreased the phosphorylation of the proteins throughout the period of in vitro capacitation. However, an absence of BSA could not influence these processes if substituted by polyvinyl alcohol (PVA) in the medium.
The objectives were to compare the ability of various rumen microbial fractions to reduce nitrate and to assess the effect of nitrate on in vitro fermentation characteristics. Physical and chemical methods were used to differentiate the rumen microbial population into the following fractions: whole rumen fluid (WRF), protozoa (Pr), bacteria (Ba), and fungi (Fu). The three nitrogen substrate treatments were as follows: no supplemental nitrogen source, nitrate or urea, with the latter two being isonitrogenous additions. The results showed that during 24 h incubation, WRF, Pr and Ba fractions had an ability to reduce nitrate, and the rate of nitrate disappearance for the Pr fraction was similar to the WRF fraction, while the Ba fraction needed an adaptation period of 12 h before rapid nitrate disappearance. The WRF fraction had the greatest methane ($CH_4$) production and the Pr fraction had the greatest prevailing $H_2$ concentration (p<0.05). Compared to the urea treatment, nitrate diminished net gas and $CH_4$ production during incubation (p<0.05), and ammonia-N ($NH_3$-N) concentration (p<0.01). Nitrate also increased acetate, decreased propionate and decreased butyrate molar proportions (p<0.05). The Pr fraction had the highest acetate to propionate ratio (p<0.05). The Pr fraction as well as the Ba fraction appears to have an important role in nitrate reduction. Nitrate did not consistently alter total VFA concentration, but it did shift the VFA profile to higher acetate, lower propionate and lower butyrate molar proportions, consistent with less $CH_4$ production by all microbial fractions.
The effects of microbial iron reduction and oxidation on the immobilization and mobilization of copper were investigated in a high concentration of sulfate with synthesized Fe(III) minerals and red earth soils rich in amorphous Fe (hydr)oxides. Batch microcosm experiments showed that red earth soil inoculated with subsurface sediments had a faster Fe(III) bioreduction rate than pure amorphous Fe(III) minerals and resulted in quicker immobilization of Cu in the aqueous fraction. Coinciding with the decrease of aqueous Cu, $SO_4{^{2-}}$ in the inoculated red earth soil decreased acutely after incubation. The shift in the microbial community composite in the inoculated soil was analyzed through denaturing gradient gel electrophoresis. Results revealed the potential cooperative effect of microbial Fe(III) reduction and sulfate reduction on copper immobilization. After exposure to air for 144 h, more than 50% of the immobilized Cu was remobilized from the anaerobic matrices; aqueous sulfate increased significantly. Sequential extraction analysis demonstrated that the organic matter/sulfide-bound Cu increased by 52% after anaerobic incubation relative to the abiotic treatment but decreased by 32% after oxidation, indicating the generation and oxidation of Cu-sulfide coprecipitates in the inoculated red earth soil. These findings suggest that the immobilization of copper could be enhanced by mediating microbial Fe(III) reduction with sulfate reduction under anaerobic conditions. The findings have an important implication for bioremediation in Cu-contaminated and Fe-rich soils, especially in acid-mine-drainage-affected sites.
생태계 질소 순환 연구에서 동위원소 추적자를 이용한 실험은 그 유용성에도 불구하고, 무기 질소의 안정동위원소 측정이 어려워 자료의 생산이 활발하지 못한 형편이다. Gardner et al. (1996)은 HPLC (high performance liquid chromatography)를 이용하여 비교적 간편하고 정밀하게 암모늄의 동위원소 비를 측정하는 방법을 개발해 질소순환 연구에 활발하게 활용하였다. 그러나 일반적이지 않은 syringe 펌프가 필요해 다른 실험실에 이 시스템이 도입되지는 못하였다. 본 연구에서는 최신 HPLC 펌프 기술을 활용하여 Dr. Gardner 그룹 이후 최초로 암모늄 동위원소비 측정 시스템을 구축하였다. 표준시료 측정 결과 RTS (retention time shift)는 안정동위원소 비와 좋은 상관관계를 보였다. 이 시스템은 측정 자료를 디지털 형태로 변환하는 장치까지 갖추어 컴퓨터 프로그램을 이용한 다양한 자료처리가 가능하다. 특히 Matlab$^{(R)}$ 이용하여 retention time 계산에 peak 면적을 이용함으로써 측정의 정확성을 높이고, 직선성을 향상할 수 있었다. 영산강 하구 해수를 가지고 실시한 $^{15}N$-암모늄 첨가 실험에서 $^{15}N/^{14}N$ 비율 변화를 HPLC-RTS법을 통해 측정하였으며, 식물성 플랑크톤에 의한 암모늄 섭취와 재광물화 과정을 각각 독립적으로 측정하는 것이 가능했다.
재조합 단백질 생산에서 문제가 되고 있는 번역 후 과정인 glycosylation 을 in vitro 상에서 수행하였다. 원핵생물 시스템에서 재조합 단백질을 생산하고, 이후 효소를 이용하여 올리고당을 붙여 원래의 당단백질과 유사한 단백질을 생산하는 것이 산업적으로 경쟁력을 가질 수 있으므로 이를 위하여 glucose oxidase와 fetuin을 모델 당단백질로, 가수분해 효소인 peptide-N-glycosidase F 의 역반응 활성을 이용하여 glycosylation 을 시도하였다. 역가수분해로의 평형 이동을 위하여 그 기질인 올리고당과 암모니아를 과량 첨가하고, 반응 온도를 높였다. Glucose oxidase의 경우에는 denaturation 했을 때 완전한 deglycosylation 이 일어났지만, fetuin의 경우에는 그렇지 못했다. Glucose oxidase 의 glycosylation 은 수용액상에서는 불가능 했지만 acetone 을 media로 사용하여 $50^{\circ}C$에서 4 시간동안 반응시켰을 때 SDS-PAGE 분석 결과 reglycosylation이 일어나 단백질 밴드가 위로 올라감을 관찰할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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