• 대한한방소아과학회지
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• 제24권1호
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• pp.117-125
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• 2010

Objectives The purpose of this study is to examine the effect of chondrocyte re-differentiation in using ukmijihwang-Tang gamibang aqua-acupuncture. Methods In this study, chondrocytes were extracted from New Zealand white rabbit's knee joint, and cultured in monolayer after collagenase treatment. In the third passage, after the mRNA transcript of the type II collagen significantly reduced, diluted Yukmijihwang-Tang gamibang were added to cultured of chondrocyte, and its effect on the mRNA expression of type II collagen was quantitatively evaluated. Results As a result of treatment with Yukmijihwang-Tang gamibang in vitro for 48 hours, the mRNA expression of type II collagen was up-regulated. In addition, the result of H&E-staining in vivo indicated that chondrocyte-like tissues were formed in repairing injured cartilages after 12 weeks of treatment with Yukmijihwang-Tang gamibang. Conclusions These results indicated that Yukmijihwang-Tang gamibang was effective on the recovery of chondrocyte phenotype, and could be used for cartilage regeneration in arthritic diseases. However, more clinical study of Oriental medical treatment for this case might be also needed.

• The Plant Pathology Journal
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• 제24권3호
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• pp.289-295
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• 2008

RNA-RNA interactions and the dynamic RNA conformations are important regulators in virus replication in several RNA virus systems and may also involved in the regulation of many important virus life cycle phases, including translation, replication, assembly, and switches in these important stages. The 5' non-translated region of Potato virus X(PVX) contains multiple cis-acting elements that facilitate various viral processes. It has previously been proposed that RNA-RNA interactions between various RNA elements present in PVX RNA genome are required for PVX RNA accumulation(Hu et al., 2007; Kim and Hemenway, 1999). This model was based on the potential base-pairing between conserved sequence elements at the upstream of subgenomic RNAs(sgRNAs) and at the 5' and 3' end of RNA genome. We now provide more evidence that RNA-RNA base-pairing between elements present at the 5' end and upstream of each sgRNA is required for efficient replication of genomic and subgenomic plus-strand RNA accumulation. Site-directed mutations introduced at the 5' end of plus-strand RNA replication defective mutant(${\Delta}12$) increasing base-pairing possibility with conserved sequence elements located upstream of each sgRNAs restored genomic and subgenomic plus-strand RNA accumulation and caused symptom development in inoculated Nicotiana benthamiana plants. Serial passage of a deletion mutant(${\Delta}8$) caused more severe symptoms and restored wild type sequences and thus retained possible RNA-RNA base-pairing. Altogether, these results indicate that the RNA element located at the 5' end of PVX genome involved in RNA-RNA interactions and play a key role in high-level accumulation of plus-strand RNA in vivo.

• 대한수의학회지
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• 제50권3호
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• pp.221-229
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• 2010

Encephalomyocarditis virus (EMCV) belongs to the genus Cardiovirus within the family Picornaviridae. EMCV has been recognized either as a cause of mortality in young pigs, due to acute myocarditis, or of reproductive failure in sows. An EMCV K3 strain was isolated from the heart and brain in a mummified and aborted swine fetus in 1989. For the molecular characterization of the poly(C)-tract of EMCV Korean isolates, K3 strain, viral RNA was extracted and digested with RNase T1, and analyzed the length of the poly(C)-tract by polyacrylamide gel electrophoresis. The poly(C) regions also were amplified by RT-PCR and sequenced. The present study shows that K3 strain of EMCV had a short polymorphic poly(C) tracts (5 to 30 C's) with sequences consisting of $C_9$, $C_{10}$, $C_{13}$, $C_{14}$, $C_{16}$, $C_{20}$, $CUC_{11}$, $C_8UCUC_3UC_{10}$, $C_9UCUC_3UC_{10}$, $C_{10}UCUC_3UC_{10}$, etc. These polymorphism of poly(C)-tracts of EMCV K3 strain implies the historical information of in vivo and/or in vitro passage.

• 대한의용생체공학회:의공학회지
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• 제43권4호
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• pp.193-198
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• 2022

Contrast enhanced magnetic resonance imaging using gadolinium-based contrast agent (GBCA) is a very useful in vivo technique to visualize the inner ear pathology including endolymphatic hydrops. Although systemic intravenous (IV) administration can visualize the perilymph space, the visualization was possible by indirect passage of contrast agent through blood-perilymph barrier. All animal experimental procedures were performed under anesthesia with 5% isoflurane. Lipopolysaccharide (LPS) was instilled into the left tympanic cavity through the tympanic membrane using a sterile 27gauge needle to induce hydrops model. Tucker-Davis Technologies system was used to measure Auditory Brainstem Responses (ABRs). For intracerebroven-tricular (ICV) administration, 25 µmol of GADOVIST (Bayer, Berlin, Germany) was used and diluted GADOVIST injection was 10 µl. MR imaging was acquired with a 9.4 Tesla MRI scanner. Transmit-receive volume coil with 40 mm inner diameter and 75 mm out diameter was used. ICV administration well demonstrated the strong enhancement along the cerebrospinal fluid (CSF) microcirculation pathway including CSF fluid in the subarachnoid space and CSF space of the inner ear structures. On the other hand, IV administration showed no contrast enhancement along the CSF microcirculation pathway and showed weak enhancement in the inner ear structures. In case of rat hydrops model, ICV administration showed that the reduced contrast enhancement in the perilymph space of the hydrops induced inner ear compared to the contrast enhancement in the perilymph space of the normal inner ear. New systemic ICV administration method provide contrast enhancement of GBCA in the inner ear through CSF microcirculation pathway.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제16권11호
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• pp.1634-1641
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• 2003

In vivo digestion and metabolism trials were conducted with 10 wethers equipped with ruminal, abomasal, and ileal cannulae to evaluate digestion of ensiled broiler litter (EBL), deepstacked broiler litter (DBL), and composted broiler litter (CBL). Wethers were fed a low protein (6.3% CP) basal diet alone or supplemented to 10.3% CP with EBL, DBL, CBL or soybean meal (SBM). All diets were formulated to be isoenergetic (56% TDN, DM basis). Apparent digestibilities of DM, OM, and ADF were not affected (p<0.05) by diet, but digestibility of CP was improved (p<0.05) by N supplementation. Apparent digestibility of CP was lower (p<0.05) for diets supplemented with CBL and DBL than for diets supplemented with SBM and EBL. Ruminal $NH_3$ concentration was 20 to 24 mg/dl at 2 h after feeding litter-supplemented diets compared with 13 mg/dl for SBM. Abomasal N, $NH_3$ N, and nonammonia N flows were increased (p<0.05) by N supplementation, whereas microbial N flow was not influenced (p<0.05) by diet. Compared with SBM and EBL, undegraded dietary CP flow to the abomasum tended to be greater (p<0.1) when wethers were fed DBL and CBLsupplemented diets. Retention of N (g/d) also was greater (p<0.05) due to greater (p<0.05) N intake and lower (p<0.05) urinary N excretion when wethers were fed diets supplemented with litter (especially EBL) vs. SBM. Overall, characteristics of ruminal fermentation and digestion indicated that broiler litter N was utilized efficiently by wethers, but ensiling may be preferable to deepstacking or composting.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제32권4호
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• pp.481-491
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• 2024

Paxlovid is the first approved oral treatment for coronavirus disease 2019 and includes nirmatrelvir, a protease inhibitor targeting the main protease (M^pro) of SARS-CoV-2, as one of the key components. While some specific mutations emerged in M^pro were revealed to significantly reduce viral susceptibility to nirmatrelvir in vitro, there is no report regarding resistance to nirmatrelvir in patients and animal models for SARS-CoV-2 infection yet. We recently developed xenograft tumors derived from Calu-3 cells in immunodeficient mice and demonstrated extended replication of SARS-CoV-2 in the tumors. In this study, we investigated the effect of nirmatrelvir administration on SARS-CoV-2 replication. Treatment with nirmatrelvir after virus infection significantly reduced the replication of the parental SARS-CoV-2 and SARS-CoV-2 Omicron at 5 days post-infection (dpi). However, the virus titers were completely recovered at the time points of 15 and 30 dpi. The virus genomes in the tumors at 30 dpi were analyzed to investigate whether nirmatrelvir-resistant mutant viruses had emerged during the extended replication of SARS-CoV-2. Various mutations in several genes including ORF1ab, ORF3a, ORF7a, ORF7b, ORF8, and N occurred in the SARS-CoV-2 genome; however, no mutations were induced in the M^pro sequence by a single round of nirmatrelvir treatment, and none were observed even after two rounds of treatment. The parental SARS-CoV-2 and its sublineage isolates showed similar IC₅₀ values of nirmatrelvir in Vero E6 cells. Therefore, it is probable that inducing viral resistance to nirmatrelvir in vivo is challenging differently from in vitro passage.

• 생명과학회지
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• 제19권4호
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• pp.508-513
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• 2009

우리나라에서 자생하고 있는 소나무류 가운데 대표적인 적송(pinus densiflora)을 열수 및 아임계 추출하여 콜레스테롤식이에 의해 혈 중 지질함량이 증가한 상태에서 흰쥐의 지질 및 혈류, 혈소판 응집 억제를 통하여 적송잎이 혈행 및 혈청 중의 지질개선에 미치는 영향을 검토하였다. 본 실험에서는 콜레스테롤식이로 혈행 장애와 혈중의 높은 지질함량을 유도시키기 위해 흰쥐에게 3주간 0.5%콜레스테롤 식이를 투여하였고 적송의 효능을 검토하기 위해 적송잎의 열수 및 아임계추출물을 병합 투여하여 실험하였다. 그 결과 혈청 중 중성지방 및 총콜레스테롤 함량은 적송잎 추출물 투여(열수 및 아임계추출)에 의해 저하되었으며, 특히 중성지방 함량을 유의적으로 감소시키는 결과를 나타내었다. 한편 Hdl-콜레스테롤 농도는 콜레스테롤 식이 투여에 의해 감소하였으나, 적송잎 열수 및 아임계추출물 투여에 의해 증가되었다. Ldl-콜레스테롤과 동맥경화지수(AI)와 심혈관위험지수(CRF) 또한 적송잎 추출물 투여에 의해 저하되었다. 콜레스테롤 식이 투여로 인해 혈장 내 혈액응고인자(coagulation factors)의 지나친 활성화 및 혈소판 응집 촉진으로 혈류의 모세관 통과 시간이 늦어 졌으나, 적송잎 추출물의 투여로 인해 혈류의 속도가 빨라짐을 볼 수 있었고, 이는 적송잎이 혈액의 유동성에 좋은 영향을 줄 것으로 사료되어진다. 적송잎 추출물의 항혈소판 응집에 미치는 영향을 검토한 결과, 0.5%콜레스테롤 식이 투여(0.5%CHOL)군의 경우 대조군(CON)에 비해 혈소판이 응집되는 결과가 나타난 반면 적송잎 추출물을 투여한 군은 0.5%CHOL군에 비해 혈소판 응집이 억제되는 것으로 나타났다 이상의 결과로 미루어 적송잎이 혈행 개선과 혈청 중의 지질개선 효과를 나타내어 동맥경화증, 혈전증 등의 혈관 관련성 질환에 효과가 있을 것으로 기대되며, 기능성 식품 및 식재료로 사용하기 위한 앞으로의 더욱 구체적인 연구가 필요한 것으로 사료된다.

• 대한의용생체공학회:의공학회지
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• 제23권2호
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• pp.147-153
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• 2002

본 연구에서는 관상의 Poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) 담체에 대한 인간의 초자연골과 탄성연골의 형성정도를 살펴보았다. 담체는 PLGA의 분자량에 따라서는 110,000 g/mol과 220,000 g/mol을 비교하였고 내경 유지를 위하여 내경측에는 220,000 g/mol, 외경측에는 110,000 g/mol 의 복합체를 만들거나, 비분해성 고분자 폴리에틸렌 튜브와 110,000 g/mol PLGA의 담체와의 결합도 시도하였다. PLGA 담체들은 주사전자현미경으로 단면 구조를 관찰하였다. 각각의 담체에 20세 미만의 환자들의 비중격에서 채취된 초자연골과 귀에서 채취된 탄성연골에서 분리한 연골세포를 심었다. 분리된 연골세포는 두 번의 계대배양을 거쳐 각각의 PLGA 담체에 심었고 일주일동안 생체 외 환경에서 배양하였다. 각각의 세포와 담체의 복합체를 nude mouse의 배부 좌, 우로 피하조직에 이식하고 8주 뒤 H&E 염색으로 조직 검사를 시행하였다. 110,000 g/mol의 PLGA담체의 연골조직은 잘 형성되어 있었지만 그 내경은 유지되지 못하였다. 반면 220,000 g/mol의 PLGA담체의 연골조직은 내경은 유지하였으나 연골조직이 부분적으로 형성되어 있고 성숙한 연골조직의 양이 많지 않았다. 초자연골 세포에 비교하여 탄성연골 세포가 같은 조건하에서 연골조직을 더 많이 형성한 것으로 나타났다. 관상의 유지를 위하여 220,000 9/mol PLGA 담체를 내경측에 110,000 g/mol PLGA 담체를 외경측으로 한 담체에서는 연골조직 형성이 잘 되지 않았으나 내경측에 폴리에틸렌 튜브를 끼운 110,000 g/mol PLGA 담체에서는 조직 형성과 내경유지가 잘 되었고 원래의 담체와 거의 유사한 형태로 유지되었다. 분화된 연골세포도 조직 소견으로 확인할 수 있었다. 이 1mm 내경의 관상 연골조직은 인공 기관지나 식도 등을 위한 동물 실험과 인공 합성 튜브의 대체 등 앞으로 많은 응용분야가 기대된다.

• 환경생물
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• 제36권3호
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• pp.359-369
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• 2018

하계 우리나라 연안내만에서 빈번하게 발생하는 유해 적조생물 제어는 수산피해를 최소화하기 위한 중요한 국가적 현안문제이다. 본 연구에서는 Thiazolidinedione 유도체 물질인 GreenTD 농도 구배별로 유해 미세조류 4종(Chattonella marina, Heterosigma akashiwo, Cochlodinium polykriokides, Heterocapsa circularisquama)과 무해 미세조류 3종 (Chaetoceros simplex, Skeletonema sp., Tetraselmis sp.)에 대해 생물 고밀도 실험군과 저밀도 실험군에서 살조물질 농도별 살조효율과 선택성을 조사하였다. 유해종에 속하는 침편모조류 C. marina와 H. akashiwo는 각각 GreenTD 0.5와 $0.2{\mu}gL^{-1}$ 농도에서 단시간에 확실한 효과를 보였으며, 14일 동안의 관찰에서도 재성장을 보이지 않았다. 적조생물 C. polykrikoides은 GreenTD $0.2{\mu}gL^{-1}$ 이상의 농도에서 광합성활성이 현저하게 떨어졌고, 살조효율 역시 80% 이상으로 나타났다. 특히, GreenTD $0.2{\mu}gL^{-1}$에서도 C. polykrikoides가 재성장하지 않은 것으로 보아, 본 물질은 C. polykrikoides에 대한 살조효과가 우수할 것으로 판단된다. H. circularisquama는 고밀도 실험군에서 GreenTD $0.5{\mu}gL^{-1}$, 저밀도 실험군에서는 GreenTD $0.2{\mu}gL^{-1}$ 농도에서부터 일정하게 영향을 받는 것으로 파악되었다. 규조류 C. simplex와 Skeletonema sp.에 대해서는 생물농도가 고밀도일 때 GreenTD $0.2{\mu}gL^{-1}$에서는 크게 영향을 받지 않았으며, 초기 일정한 영향을 받은 후 시간 경과와 더불어 재성장이 이루어졌다. 특히 녹조류 Tetraselmis sp.는 최고농도인 GreenTD $1.0{\mu}gL^{-1}$에서도 일정하게 높은 값을 유지하였다. GreenTD 농도와 생물밀도에 따른 차이가 뚜렷하게 나타났으나, 전반적으로 살조물질의 효과는 침편모조류>와편모조류>규조류>녹조류 순으로 나타났다. 결과적으로 GreenTD 물질은 유해종에는 높은 살조능력이 있고, 무해종에는 일시적으로 광합성활성에 영향을 주지만, 시간의 경과에 따라 회복되는 것을 알 수 있다. 따라서, 적조생물 C. polykrikoides 제어하기 위해서는 고밀도 실험군에서 80.8%의 살조효과를 보인 GreenTD $0.2{\mu}gL^{-1}$의 농도가 적절할 것으로 판단되며, 현장 적용시 일시적인 희석등을 고려하여 적정농도보다 높게 살포하면 일정하게 높은 살조효율을 가질 것이며, 이는 경제성을 고려하여 충분한 경쟁력이 있는 물질로 기대된다.